基于蛋白定向进化的BT毒蛋白制造技术

一种基于蛋白定向进化的BT毒蛋白，属于虫害防治生物技术领域。本发明专利技术的目的是针对玉米螟钙黏蛋白的BT毒蛋白（Cry3Aa），能够更高效的抑制并杀灭玉米螟，应用于转基因作物和农药制剂中的基于蛋白定向进化的BT毒蛋白。本发明专利技术毒蛋白在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代：第20位、第136位、第215位、第374位。本发明专利技术专门针对玉米螟BT毒蛋白（Cry3Aa）受体钙粘蛋白进行进化，如果应用于玉米转基因，将极大地提高抗虫效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于虫害防治生物。

技术介绍

1、苏云金芽孢杆菌(bt，bacillus thuringiensis)是一种细菌，广泛应用于虫害防治。其抗虫功能在于其在多个生理过程中会伴随着分泌大量有毒蛋白，这些蛋白对人伤害较小，却可以有效抑制虫类生长，甚至直接杀死昆虫，因此在农业领域有很高的贡献。bt体内有很多种毒素，主要分为cry蛋白和cyt蛋白，由cry基因和cyt基因编码。cry蛋白分为5类，cryi对鳞翅目有杀虫活性，cryii类对鳞翅目和双翅目有杀虫活性，cryiii对鞘翅目有杀虫活性，cryiv类对双翅目有杀虫活性，cry v类对鳞翅目和鞘翅目有杀虫活性。

2、玉米螟是一类鳞翅目昆虫，是对中国农业生产影响最大的害虫之一，也是玉米生产上最重要的害虫，玉米螟造成的损失范围广，面积大。通过对玉米螟的杀灭可挽回大量农产品损失。然而玉米螟的防治是困难的，因为玉米株高限制，通过化学防治需要更重型的仪器。所以，从玉米品种着手培养抗虫株系是解决玉米虫害的思路之一，然而玉米天然基因中罕有抗虫位点，因此转入外源基因的方法已经被提出和验证。

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【技术保护点】

1.一种基于蛋白定向进化的BT毒蛋白，其特征在于：毒蛋白的构建过程是：

2.根据权利要求1所述的基于蛋白定向进化的BT毒蛋白，其特征在于：毒蛋白在SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代：第20位、第136位、第215位、第374位，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有96％以上同一性并具有BT毒蛋白毒性。

3.根据权利要求1所述的基于蛋白定向进化的BT毒蛋白，其特征在于：BT毒蛋白Cry3Aa杀虫剂在病虫害防治领域中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种基于蛋白定向进化的bt毒蛋白，其特征在于：毒蛋白的构建过程是：

2.根据权利要求1所述的基于蛋白定向进化的bt毒蛋白，其特征在于：毒蛋白在seq idno.1所示的氨基酸序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代：第20位、...

【专利技术属性】
技术研发人员：石清池，莫伟亮，纪璐瑶，左泽乘，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：