【技术实现步骤摘要】
本申请涉及细胞生物学的，更具体地说，涉及一种永生化间充质干细胞外囊泡及其应用。
技术介绍
1、骨关节炎(osteoarthritis，oa)是一种最常见的关节疾病之一，当患有oa时，关节组织的成分(骨、关节囊、滑膜组织、肌腱、韧带和软骨)会以各种方式失效，从而导致关节不稳定。通常表现为软骨丢失、骨硬化或骨赘形成、疼痛和其他临床症状。其中，一个重要的临床症状是软骨表面的侵蚀和关节炎症日益加重，并伴有全身低度慢性炎症。然而，受损关节软骨的自愈过程是缓慢和有限的。因此，在oa的治疗中，关节软骨一直是研究的重点。目前的治疗方案包括外科手术(例如，全膝关节置换术，total knee replacement，tkp)和非手术治疗(例如，药物治疗、黏剂治疗等)，上述治疗方案均存在治疗效率低和有副作用的缺陷。
2、目前的oa治疗是针对减轻疼痛、改善关节活动度和限制疾病进展的支持性治疗。oa治疗的主要策略是基于药物和再生医学，如细胞移植。移植于oa患者骨髓和脂肪组织的间充质干细胞(mscs)在疼痛管理和功能恢复方面有很好的结果。
3、evs或外泌体由干细胞产生，含有强效细胞因子、生长因子，可能在介导炎症和增强祖细胞增殖方面具有强大的作用。mscs衍生的evs在治疗心血管、呼吸、肾脏和肝脏疾病和软骨再生方面的益处已得到证实。evs表现出更强的逃避免疫系统降解或清除的能力，而mscs来源的evs(msc-evs)由于具有较好的免疫调节作用，尤其是抑制炎症的作用，已被证明在调节不同疾病的细胞内通路中发挥重要的治疗作用，包括炎症
4、然而，用于治疗所需的evs的数量通常较高。基于此，在临床应用中使用evs的一大挑战是mscs体外扩增的寿命有限，进而导致其产生的evs数量有限。体外培养过程中，尽管mscs在培养初期具有良好的增殖率，但其细胞增殖能力显著下降，并发生复制性衰老。针对间充质干细胞有限扩增问题的解决方案是通过基因操作使细胞永生化。然而，关于永生化间充质干细胞外囊泡的研究却很少。
技术实现思路
1、本申请提供一种永生化间充质干细胞外囊泡及其应用。
2、第一方面，本申请提供一种永生化间充质干细胞外囊泡，采用如下的技术方案：
3、一种永生化间充质干细胞外囊泡，所述永生化间充质干细胞外囊泡是利用导入永生化基因的永生化间充质干细胞产生的；所述永生化基因为tert基因。
4、可选地，所述永生化基因为htert基因。
5、可选地，所述永生化间充质干细胞为永生化人脐带间充质干细胞。
6、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡表达cd9、cd63、cd81、tsg101。
7、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡的平均粒径为120-140nm。
8、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够被软骨细胞摄取。
9、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够缓解il-1β抑制的软骨细胞活力。
10、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够抑制软骨细胞凋亡。
11、可选地，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够能够促进细胞迁移。
12、可选地，在il-1β存在的情况下，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够诱导oa软骨细胞中合成代谢基因的表达，抑制分解代谢基因和il-6的表达。
13、第二方面，本申请提供上述永生化间充质干细胞外囊泡在制备用于骨关节炎修复的药物中的应用。
14、综上所述，本申请具有以下有益效果：
15、本申请tert永生化的间充质干细胞能够保持其分化能力以及间充质干细胞相关细胞表面标志物的表达。从含有tert基因的永生化hucmscs中获取的evs(细胞外囊泡)能够诱导oa软骨细胞中合成代谢基因的表达，抑制分解代谢基因和il-6的表达，具有骨关节炎的治疗潜力。
16、tert永生化的hucmscs能够维持一些主要的msc特征，并避免复制限制。tert-evs通过增强ii型胶原和acan的合成，抑制基质降解酶如mmp-13和adamts-5，以及减轻炎症来改善oa。tert-evs的抗炎作用通过对软骨细胞的直接调控来确定。表明tert-evs具有治疗oa的潜力。
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1.一种永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡是利用导入永生化基因的永生化间充质干细胞产生的；所述永生化基因为TERT基因。
2.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化基因为hTERT基因。
3.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞为永生化人脐带间充质干细胞。
4.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡表达CD9、CD63、CD81、TSG101。
5.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡的平均粒径为120-140nm。
6.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够被软骨细胞摄取。
7.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够缓解IL-1β抑制的软骨细胞活力。
8.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞
9.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，在IL-1β存在的情况下，所述永生化间充质干细胞外囊泡能够诱导OA软骨细胞中合成代谢基因的表达，抑制分解代谢基因和IL-6的表达。
10.一种利用权利要求1-9中任一项所述的永生化间充质干细胞外囊泡在制备用于骨关节炎修复的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡是利用导入永生化基因的永生化间充质干细胞产生的；所述永生化基因为tert基因。
2.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化基因为htert基因。
3.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞为永生化人脐带间充质干细胞。
4.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡表达cd9、cd63、cd81、tsg101。
5.根据权利要求1所述的永生化间充质干细胞外囊泡，其特征在于，所述永生化间充质干细胞外囊泡的平均粒径为120-140nm。
6.根据...
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