一种PRRSV弱毒株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种PRRSV弱毒株及其制备方法和应用。所述PRRSV弱毒株是将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV的非结构蛋白NSP4进行突变获得的，所述NSP4蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:1具有至少95％、或至少98％、或至少99％的序列一致性，所述突变是在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第76位、第111位、第115位、第155位、第173位、第183位进行单位点突变或多位点突变。本发明专利技术提供的PRRSV弱毒株能够促进β2M分子以及SLA‑1分子的表达,不仅能够诱导更好的细胞免疫，而且能够使其毒力进一步降至到更低的水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学,具体涉及一种prrsv弱毒株及其制备方法和应用。

技术介绍

1、猪繁殖与呼吸综合征(prrsv)自上世纪80年代从美国爆发以来,迅速席卷全球,90年代传染至我国,对养猪行业造成了重大的经济损失；并且至今为止,对其致病机制以及毒力的研究依然不是十分透彻,从而导致目前临床上使用的弱毒疫苗和灭活疫苗对此传染病的防控效果并不理想,疫情呈周期性反复爆发。

2、目前临床上,prrsv感染耐受猪存在长期病毒血症的现象,免疫系统难以有效的清除prrsv,导致病毒不断从细胞释放出来,通常造成猪体的隐性感染,并不断向外排毒从而成为新的传染源并感染其他猪。但其中的致病机制目前研究的并不十分清楚。

技术实现思路

1、已有研究对prrsv非结构蛋白nsp4的蛋白晶体结构进行了解析,这为研究nsp4的功能打下坚实的基础。另外,研究表明prrsv非结构蛋白nsp4的domain iii结构域能够抑制β2m的合成,从而降低了mhc-1分子在细胞表面的表达。

2、本专利技术的目的是,提供一种新型本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PRRSV弱毒株,其特征在于,所述弱毒株是将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV的非结构蛋白NSP4进行突变获得的，所述NSP4蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:1具有至少95％、或至少98％、或至少99％的序列一致性，所述突变是在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第76位、第111位、第115位、第155位、第173位、第183位进行单位点突变或多位点突变；所述突变方式为下列之一：

2.根据权利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述突变是包含第76位和第155位两个突变位点的多位点突变，其中，第76位的缬氨酸V突变为异亮氨酸I、精氨酸R或丙氨酸A；第155位的赖氨...

【技术特征摘要】

1.一种prrsv弱毒株,其特征在于,所述弱毒株是将猪繁殖与呼吸综合征病毒prrsv的非结构蛋白nsp4进行突变获得的，所述nsp4蛋白的氨基酸序列与seq id no:1具有至少95％、或至少98％、或至少99％的序列一致性，所述突变是在seq id no:1所示氨基酸序列的第76位、第111位、第115位、第155位、第173位、第183位进行单位点突变或多位点突变；所述突变方式为下列之一：

2.根据权利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述突变是包含第76位和第155位两个突变位点的多位点突变，其中，第76位的缬氨酸v突变为异亮氨酸i、精氨酸r或丙氨酸a；第155位的赖氨酸k突变为苏氨酸t或异亮氨酸i。

3.根据权利要求2所述的弱毒株，其特征在于，所述多位点突变为：k155t+v76i、k155t+v76i+c111a、k155t+v76a或k155i+v76r+c111a+i183a。

4.根据权利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述突变是包含第155位、以及第173位或183位突变位点的多位点突变，其中，第155位的赖氨酸k突变为精氨酸r、丙氨酸a或甘氨酸g；第173位的亮氨酸l突变为苏氨酸t或甘氨酸g；第183位的异亮氨酸i突变为丙氨酸a。

5.根据权利要求4所述的弱毒株，其特征在于，所述多位点突变为：k155r+l173g、k155a+l173t或k155g+i183a。

6.根据权利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述突变是包含第183位突变位点的多...

【专利技术属性】
技术研发人员：马志永，刘珂，康磊，齐鹏飞，李宗杰，邵东华，魏建超，邱亚峰，李蓓蓓，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心，
类型：发明
国别省市：