ccdc66突变体果蝇模型及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了ccdc66突变体果蝇模型及其构建方法和应用，具体公开一种用于敲除果蝇Ccdc66基因的gRNA组合物，其包括如SEQ ID NO.4序列所示的gRNA1和如SEQ ID NO.5序列所示的gRNA2。进一步公开ccdc66突变体果蝇模型的构建方法，通过构建gRNA1的表达载体和gRNA2的表达载体，之后借助显微注射技术和果蝇杂交技术获得ccdc66突变体果蝇模型。本发明专利技术ccdc66突变体果蝇模型具有个体小，易于大规模培养，成本低，世代周期短，遗传操作简单，遗传背景清晰，蛋白、细胞器和信号传导通路与人更为保守等优势，可为人视网膜色素变性病的诊断、机制解析和药物靶点的筛选提供材料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物学，具体涉及ccdc66突变体果蝇模型及其构建方法和应用。

技术介绍

1、黑腹果蝇是一种常用的无脊椎动物模式，具有生命周期短、易于大规模饲养、花费低、遗传背景清晰、遗传操作简单、与哺乳动物基因保守等优势，被越来越广泛地用于人类疾病致病诊疗、疾病机制研究和药物靶点的筛选。

2、视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,rp)是一种因视网膜退化和视力缺失而导致的人类视网膜病变(berger et al.,2010)。ccdc66是人视网膜色素变性的一个致病因子，通过影响中心体微卫星结构的组装和纤毛发生，参与光受体的发育和维持、组装和功能发挥等(dekomien et al.,2010；gupta et al.,2015；sharp et al.,2011)。不同物种参与眼建成和视觉传导的关键调控因子、调控网络和传输机制高度保守。ccdc66功能缺陷能引发视网膜退化，然而，ccdc66基因突变引发rp的作用机制未被解析。ccdc66为不明原因的视网膜退化提供一个可能的靶点(gerding et al.,2011)。c本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于敲除果蝇Ccdc66基因的gRNA组合物，其特征在于，所述gRNA组合物包括如SEQ ID NO.4序列所示的gRNA1和如SEQ ID NO.5序列所示的gRNA2。

2.一种ccdc66突变体果蝇模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述gRNA1的表达载体和gRNA2的表达载体分别为Peasy-Blunt-gRNA1质粒和Peasy-Blunt-gRNA2质粒；

4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述包含权利要求1所述gRNA序列和gRNA插入位点前、后质粒序...

【技术特征摘要】

1.一种用于敲除果蝇ccdc66基因的grna组合物，其特征在于，所述grna组合物包括如seq id no.4序列所示的grna1和如seq id no.5序列所示的grna2。

2.一种ccdc66突变体果蝇模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述grna1的表达载体和grna2的表达载体分别为peasy-blunt-grna1质粒和peasy-blunt-grna2质粒；

4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述包含权利要求1所述grna序列和grna插入位点前、后质粒序列的引物序列如下：

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【专利技术属性】
技术研发人员：侯亚男，卫青，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：