辛弗林合成方法及其合成辛弗林的工程菌技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，公开了辛弗林合成方法及其合成辛弗林的工程菌，该方法以酪氨酸为底物，通过酪氨酸脱羧酶、多巴胺β单加氧酶以及苯乙醇胺N‑甲基转移酶三个酶的催化下合成辛弗林，还可以将酪氨酸脱羧酶、多巴胺β单加氧酶以及苯乙醇胺N‑甲基转移酶的编码基因在合成酪氨酸的微生物中外源表达，获得以葡萄糖从头合成辛弗林的工程菌，实现生物合成辛弗林的技术路线。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及发酵工程领域，具体涉及辛弗林合成方法，还涉及合成辛弗林的工程菌。

技术介绍

1、辛弗林作为我国传统中药材枳实(fructus aurantii immatures，fai)中含量最高、最活跃的生物碱，是枳实中起主要药理作用的有效成分，具有升高血压、促进心血管兴奋等作用，因而常用于治疗低血压等病症。由于结构与肾上腺素、去甲肾上腺素以及麻黄碱相似，辛弗林还被发现能够加快心率，促进血液循环，氧化脂肪，增加能量水平，从而药理作用表现为肾上腺素α受体、心脏β受体兴奋剂，可代替麻黄碱作为一种中枢神经兴奋药使用并用于临床急救。同时研究表明辛弗林具有一定的抗氧化、降血糖、减肥功效作用。

2、目前，辛弗林的生产主要为化学合成法和物理提取法，由于辛弗林在枳实等作物中含量很低，采用提取方法存在提取成本高、含量低、污染大等问题；如中国专利cn115043889b报道从代代花中提取辛弗林，辛弗林含量仅为0.6％；中国专利cn105399787a公开了一种从柑橘皮、果中提取新橙皮苷、橙皮苷和辛弗林的方法，辛弗林含量收率也仅为2.5％，产品纯度和收率均很低。化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.辛弗林合成方法，其特征在于：以酪氨酸为底物，依次在酪氨酸脱羧酶、多巴胺-β-单加氧酶和苯乙醇胺-N-甲基转移酶催化下合成辛弗林。

2.酪氨酸脱羧酶、多巴胺-β-单加氧酶和苯乙醇胺-N-甲基转移酶联合在产酪氨酸菌中重建辛弗林代谢途径中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述酪氨酸脱羧酶的氨基酸如SEQ IDNo.1所示；所述多巴胺-β-单加氧酶的氨基酸如SEQ ID No.2所示；所述苯乙醇胺-N-甲基转移酶的氨基酸如SEQ ID No.3所示。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：编码表达所述酪氨酸脱羧酶的核苷酸如SEQ ID...

【技术特征摘要】

1.辛弗林合成方法，其特征在于：以酪氨酸为底物，依次在酪氨酸脱羧酶、多巴胺-β-单加氧酶和苯乙醇胺-n-甲基转移酶催化下合成辛弗林。

2.酪氨酸脱羧酶、多巴胺-β-单加氧酶和苯乙醇胺-n-甲基转移酶联合在产酪氨酸菌中重建辛弗林代谢途径中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述酪氨酸脱羧酶的氨基酸如seq idno.1所示；所述多巴胺-β-单加氧酶的氨基酸如seq id no.2所示；所述苯乙醇胺-n-甲基转移酶的氨基酸如seq id no.3所示。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：编码表达所述酪氨酸脱羧酶的核苷酸如seq id no.5所示；编码表达所述多巴胺-β-单加氧酶的核苷酸如seq id no.6所示；编码表达所述苯乙醇胺-n-甲基转移酶的核苷酸如seq id no.7所示。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述产酪氨酸菌选自酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌或大肠杆菌。

6.一种合成辛弗林的工程菌，其特征在于：所述工程菌以产酪氨酸菌株作为底盘菌，在底盘菌中同时表达酪氨酸脱羧酶、多巴胺-β-单加氧酶和苯乙醇胺-n-甲基转移...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹祥，何越雯，李福林，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：