【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及kdm5b在肾纤维化辅助诊断中的应用。
技术介绍
1、肾纤维化是由多种致病因素引起的肾脏固有细胞受损的慢性和进行性的病理生理过程，与潜在病因无关。肾纤维化以细胞外基质(ecm)的异常沉积为主要特征，是肾功能从正常到慢性肾脏疾病(ckd)，再到终末期肾脏疾病(esrd)的关键病理阶段，被认为是肾功能下降的最佳组织学预测因子，也是影响肾移植患者预后的主要因素之一。肾纤维化影响着一半70岁以上的成年人和10％的世界人口，给社会带来了极大的经济负担，然而目前尚无靶向药物来治疗肾纤维化。因此，深入探索肾纤维的发病机制和新靶点，并以该靶点进行新药研发具有重要的研究意义和临床价值。
2、肾纤维化是一个多因素、多种信号通路共同参与的复杂病理生理过程，其发病机制至今尚未完全阐明。研究表明，表观遗传组蛋白修饰对调节tgfβ1诱导的肾纤维化和ecm基因表达及其下游促纤维化基因具有显著调控作用。组蛋白赖氨酸去甲基化酶5b(kdm5b)能特异性的去除组蛋白3(h3)第4位赖氨酸(k4)的双甲基和三甲基(h3k4me2/me3)，进而抑制靶基因的表达。kdm5b的异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。证据显示，kdm5b是早期小鼠胚胎植入前阶段发育中h3k4-甲基化组的关键调节因子。kdm5b在许多癌症类型中也过表达、扩增或突变。在癌细胞中，kdm5b通过介导h3k4甲基化水平来调控促癌基因和肿瘤抑制因子的表达。此外，kdm5b被发现可与激活转录因子3(atf3)的启动子结合，并通过去甲基化激活的h3k4me2/
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题和不足，本专利技术的目的旨在提供kdm5b在肾纤维化辅助诊断中的应用。
2、为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、本专利技术第一方面提供了一种可用于肾纤维化辅助诊断的生物标志物，所述生物标志物为kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段。
4、通过western blot检测经tgfβ1诱导发生纤维化改变的人肾小管上皮细胞(hk-2)中kdm5b的表达情况，发现kdm5b在tgfβ1诱导发生纤维化改变的hk-2细胞中表达水平显著高于正常hk-2细胞，且差异具有统计学意义；另外，通过western blot和免疫组织化学染色检测kdm5b在uuo(单侧输尿管梗阻)小鼠纤维化的肾脏组织中表达水平显著高于假手术小鼠，且差异具有统计学意义。
5、本专利技术第二方面提供了kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的检测试剂在制备肾纤维化辅助诊断的产品中的应用。
6、根据上述的应用，优选地，所述产品通过rt-pcr、实时定量pcr、原位杂交、northern blot、western blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的表达水平。
7、根据上述的应用，优选地，所述产品含有与kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增kdm5b基因或的kdm5b mrna引物，或含有特异性检测kdm5b基因或kdm5b mrna的探针。
8、根据上述的应用，优选地，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
9、根据上述的应用，优选地，所述产品的检测样本为细胞、组织或血清。
10、根据上述的应用，优选地，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
11、根据上述的应用，优选地，所述肾纤维化为各种肾脏疾病引起的肾纤维化。
12、本专利技术第三方面提供了一种用于肾纤维化辅助诊断的试剂盒，所述试剂盒中含有kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的检测试剂。
13、根据上述的试剂盒，优选地，所述检测试剂为通过rt-pcr、实时定量pcr、原位杂交、northern blot、western blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的表达水平的试剂。
14、根据上述的试剂盒，优选地，所述检测试剂为与kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段特异性结合的抗体，或特异性扩增kdm5b基因或的kdm5b mrna引物，或特异性检测kdm5b基因或kdm5b mrna的探针。
15、根据上述的试剂盒，优选地，所述检测样本为细胞、组织或血清。
16、根据上述的试剂盒，优选地，所述肾纤维化为各种肾脏疾病引起的肾纤维化。
17、与现有技术相比，本专利技术取得的积极有益效果如下：
18、(1)本专利技术首次发现kdm5b在纤维化的人肾小管上皮细胞中表达上调，且kdm5b在小鼠纤维化的肾脏组织中表达水平上调，因此，kdm5b可作为肾纤维化的辅助诊断指标，来辅助诊断肾纤维化。而且，本专利技术采用kdm5b诊断区分肾纤维化小鼠和正常对照小鼠的roc曲线auc能够达到0.882，表明kdm5b用于肾纤维化的辅助诊断具有较高的诊断价值。
19、(2)本专利技术采用kdm5b特异性小干扰rna(si-kdm5b)以及其特异性抑制剂tk-129抑制kdm5b表达或活性，可显著减轻、缓解肾纤维化，因此，kdm5b可以作为药物、药物靶点或基因治疗中的靶基因，应用于肾纤维化的预防、缓解或/和治疗，能够为肾纤维化的防治提供新的策略，同时，也将为进一步的研究肾纤维化的病因和相应的防治策略提供新的方向。
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1.KDM5B基因或KDM5B mRNA或KDM5B蛋白或KDM5B蛋白的肽段的检测试剂在制备肾纤维化辅助诊断产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过RT-PCR、实时定量PCR、原位杂交、Northern Blot、Western Blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中KDM5B基因或KDM5B mRNA或KDM5B蛋白或KDM5B蛋白的肽段的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品含有与KDM5B蛋白或KDM5B蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增KDM5B基因或的KDM5B mRNA引物，或含有特异性检测KDM5B基因或KDM5B mRNA的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述产品的检测样本为细胞、组织或血清。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
7.一种用于肾纤维
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述检测试剂为通过RT-PCR、实时定量PCR、原位杂交、Northern Blot、Western Blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中KDM5B基因或KDM5B mRNA或KDM5B蛋白或KDM5B蛋白的肽段的表达水平的试剂。
9.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述检测试剂为与KDM5B蛋白或KDM5B蛋白的肽段特异性结合的抗体，或特异性扩增KDM5B基因或的KDM5B mRNA引物，或特异性检测KDM5B基因或KDM5B mRNA的探针。
...【技术特征摘要】
1.kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的检测试剂在制备肾纤维化辅助诊断产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过rt-pcr、实时定量pcr、原位杂交、northern blot、western blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中kdm5b基因或kdm5b mrna或kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品含有与kdm5b蛋白或kdm5b蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增kdm5b基因或的kdm5b mrna引物，或含有特异性检测kdm5b基因或kdm5b mrna的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述产...
【专利技术属性】
技术研发人员：霍金玲，刘章锁，刘东伟，吴鹏，潘少康，高钟秀子，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：
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