【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体为一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺。
技术介绍
1、微生物是国家的重要资源，涉及范围极广，包括食品、化妆品、水、卫生用品等领域，都与群众的日常生活息息相关。近年来，随着人体微生物菌群突破性研究，科学家正在打开治疗和预防人类疾病的一片新领域、一种新疗法。目前，调节肠道微生物菌群被视为一种非传统、个性化治疗癌症、神经退行性疾病，如阿兹海默病、帕金森病以及代谢疾病，如2型糖尿病等潜在创新疗法。基于人体肠道、皮肤和其他组织内的细菌、真菌等微生物菌群突破性研究，科学家正在开发个性化治疗和预防疾病的新方法。最初的治疗方法和设想是将小分子、生物制剂、噬菌体和工程细菌用于修饰微生物菌群和预防或影响人类疾病的进展。
2、毛螺菌科（lachnospiraceae）在人类肠道中普遍存在。毛螺菌科的所有成员都是严格厌氧的革兰氏染色阳性或阴性，可以发酵多种底物（如：纤维二糖和果糖），并产生包括短链脂肪酸（scfas）在内的多种代谢物。综合75项人类肠道宏基因组数据集的分析发现，毛螺菌科约占肠道总微生物群的10%。此外，在包括婴儿、青少年、青年和中年人和老年人等不同年龄组的受试者中均检测到毛螺菌科菌种。毛螺菌科的高流行率和高丰富度提示着毛螺菌科可能在生命全周期内的健康和疾病中发挥重要作用。事实上，已经有报道表明毛螺菌科对宿主健康的有益或有害作用。一些毛螺菌科的成员，如roseburia homins、blautiaproduct、roseburia intestinalis和anaerobutyricum hal
3、然而，许多重要的毛螺菌科既没有被成功培养，未培养毛螺菌科成员粘1468个most-wanted肠道微生物分类单元的10%。受限于可培养毛螺菌科菌种数量，毛螺菌科的代谢活性亦很少被广泛的表征，目前关注最多的是毛螺菌科部分成员可以产生scfas，维生素和吡嗪等物质，或产生有害的代谢物，如细胞毒性和遗传毒性的对甲酚。
4、而作为毛螺菌科（lachnospiraceae）之一的agathobacter rectalis（直肠真杆菌），已经研究发现其可抑制淋巴瘤发生并减轻hsv-1诱导的全身炎症。但实际研究中出现agathobacter rectalis（直肠真杆菌）培养十代以后死亡率高，菌株活性下降，出现菌株整体活性瓶颈的问题，而如何维持和提高agathobacter rectalis（直肠真杆菌）的活性，目前尚无研究或报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于解决上述提出的问题，本专利技术提供一种提高直肠真杆菌活性的制剂，采用本专利技术的制剂可以提高agathobacter rectalis（直肠真杆菌）成活率，并随时作为菌种接种至其他培养体系中。
2、本专利技术的具体方案为：一种提高直肠真杆菌活性的制剂，其制备方法为：1)在现有mrs培养基添加活性剂亚油酸有机酯；2）接种直肠真杆菌 m2193，接种量为1-2％(v/v)；3）在33-38℃温度和ph为6-7的条件下进行发酵培养36-50h，得到液体发酵产品；4）将3)所获得的液体发酵产品经过滤浓缩、加保护剂、混匀、冻干后即得提高直肠真杆菌活性的制剂。
3、直肠真杆菌 m2193，保藏生物材料名称：agathobacter rectalis m2193，保藏编号为：gdmcc no：62481，分类学名称为：agathobacter rectalis，专利技术人于2022年6月1日将其保存在广东省微生物菌种保藏中心，具体地址为：广州市越秀区先烈中路100号59号楼。广东省微生物菌种保藏中心于2022年6月1日检测为存活，并出具存活性报告书。
4、亚油酸有机酯占培养基总重量的0.5-2%。
5、优选地，步骤发酵方式为补料分批发酵。
6、优选地，补料分批发酵为闭环控制。
7、优选地，为了协助菌株从培养基中心向边缘扩散，对培养基进行旋转，转速为20-60r/min。
8、优选地，所述活性剂为一种亚油酸有机酯，原料包括虎杖苷和亚油酸，虎杖苷和亚油酸的物质的量比为1：3-6，发生化学反应如下：
9、+或或或。
10、优选地，所述反应步骤为：将虎杖苷结晶加入亚油酸中，搅拌均匀，形成虎杖苷的亚油酸溶液，在硫酸和紫外线的催化作用下进行酯化反应20-40min，反应结束后调节ph为6-7。
11、优选地，所述紫外线的强度为2800-3600lex。
12、优选地，硫酸在亚油酸有机酯反应体系中的浓度为0.5-1.2mol/l，
13、所述亚油酸有机酯的主要成分包括：
14、，该化合物占亚油酸酯的60-70%。
15、亚油酸有机酯中还包括亚油酸和虎杖苷。
16、本专利技术制备的一种提高直肠真杆菌活性的制剂，用于菌种培养、医药和保健食品。
17、本专利技术中涉及的菌株直肠真杆菌 m2193，专利技术人已经将其保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为：gdmcc no：62481。
18、与现有技术相比，本专利技术至少具有以下有益效果：
19、1、本专利技术工艺得到提高直肠真杆菌活性的制剂，用于直肠真杆菌培养，直肠真杆菌培养至10代乃至15代以后死亡率与2-3代接近，属于较低水平，菌株活性无明显下降。
20、2、通过紫外线和硫酸双重催化作用下制备的亚油酸有机酯是多种成分的混合物，该混合物可以有效提高agathobacter rectalis（直肠真杆菌）10代以后的成活率，而用其他多种物质尝试均没有成功，专利技术人推测紫外线为亚油酸有机酯的成分起到了特定选择的作用，经过光谱分析，一种亚油酸有机酯的成分远高于其他组分。
21、3、为提高菌种从培养基中心向外生长，将培养基进行旋转，提高了菌种的生长效果。
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1.一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺，其特征在于：具体步骤为：1)在现有MRS培养基添加活性剂亚油酸有机酯；2）接种直肠真杆菌 M2193，保藏编号为：GDMCC No：62481，分类学名称为：Agathobacter rectalis，接种量为1-2％(v/v)；3）在33-38℃温度和PH为6-7的条件下进行发酵培养36-50h，得到液体发酵产品；4）将3)所获得的液体发酵产品经过滤浓缩、加保护剂、混匀、冻干后即得提高直肠真杆菌活性的制剂，所述活性剂为一种亚油酸有机酯，所述亚油酸有机酯的原料包括虎杖苷和亚油酸，虎杖苷和亚油酸的物质的量比为1：3-6，亚油酸有机酯制备步骤为：将虎杖苷结晶加入亚油酸中，搅拌均匀，形成虎杖苷的亚油酸溶液，在硫酸和紫外线的催化作用下进行酯化反应20-40min，反应结束后调节PH为6-7。
2.根据权利要求1所述的一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺，其特征在于：亚油酸有机酯占培养基总重量的0.5-2%。
3.根据权利要求2所述的一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺，其特征在于：步骤发酵方式为补料分批发酵。
...【技术特征摘要】
1.一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺，其特征在于：具体步骤为：1)在现有mrs培养基添加活性剂亚油酸有机酯；2）接种直肠真杆菌 m2193，保藏编号为：gdmcc no：62481，分类学名称为：agathobacter rectalis，接种量为1-2％(v/v)；3）在33-38℃温度和ph为6-7的条件下进行发酵培养36-50h，得到液体发酵产品；4）将3)所获得的液体发酵产品经过滤浓缩、加保护剂、混匀、冻干后即得提高直肠真杆菌活性的制剂，所述活性剂为一种亚油酸有机酯，所述亚油酸有机酯的原料包括虎杖苷和亚油酸，虎杖苷和亚油酸的物质的量比为1：3-6，亚油酸有机酯制备步骤为：将虎杖苷结晶加入亚油酸中，搅拌均匀，形成虎杖苷的亚油酸溶液，在硫酸和紫外线的催化作用下进行酯化反应20-40min，反应结束后调节ph为6-7。
2.根据权利要求1所述的一种提高直肠真杆菌活性的制剂的制备工艺，其特征在于：亚油...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐晓强，王晓凯，夏炎，陈练佳，陈茜，马遥，
申请(专利权)人：深圳零一生命科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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