【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物医学的板层组织工程角膜支架，尤其是涉及一种用于治疗角 膜外伤、肿瘤、化学烧伤(碱烧伤)、血管化严重干眼症、角膜缘干细胞缺乏、免疫性疾病如 Stevens-Johnson综合征(SJS)、眼部类天疱疮、单纯疱疹病毒性角膜白斑、角膜移植排斥 反应等致盲性眼病的板层角膜组织工程材料及其制备方法与应用。
技术介绍
据世界卫生组织报告，角膜病是引起视力丧失的第二位主要病因，每年因角膜溃 疡、眼外伤等造成的新增角膜盲为150万至200万，儿童盲的主要病因是麻疹导致的角膜 白斑。治疗角膜盲的唯一有效方法是角膜移植术。但是由于宗教信仰、风俗习惯的影响， 身故后捐献角膜者甚少；加上人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙肝病毒、狂犬病毒、克雅氏病毒 可以通过植片传播、角膜屈光手术、人口老龄化等原因使角膜供体材料严重不足，极大地限 制了角膜盲患者脱盲。随着人们对视觉质量要求的日益提高，角膜移植技术也得到不断改 进和更新，而目前供体来源不足、免疫排斥反应、角膜移植并发症等又限制了此项技术的 开展。随着角膜外伤、肿瘤、化学烧伤(碱烧伤)、血管化严重干眼症、角膜缘干细胞缺乏、...
【技术保护点】
一种板层组织工程角膜支架，其特征在于为动物源性脱细胞板层角膜基质片，不含细胞成分，胶原纤维排列整齐，间隙规则，角膜透光率为８０％～９５％，拉伸强度为２～５Ｎ／ｍｍ↑［２］。
【技术特征摘要】
一种板层组织工程角膜支架，其特征在于为动物源性脱细胞板层角膜基质片，不含细胞成分，胶原纤维排列整齐，间隙规则，角膜透光率为80％～95％，拉伸强度为2～5N/mm2。2.如权利要求1所述的一种板层组织工程角膜支架，其特征在于所述板层组织工程角 膜支架包括未干燥板层角膜支架、干燥板层角膜支架或复水板层角膜支架；所述未干燥板 层角膜支架的含水量和膨胀率为75% 90%;所述干燥板层角膜支架是以未干燥板层角膜 支架为基础，经过干燥处理的板层角膜支架，所述干燥处理为真空冻干，真空晾干，干燥无 水CaCl2真空干燥，自然晾干，吹干，30 60°C恒温箱内烘干中的至少一种；所述复水板层 角膜支架是以干燥板层角膜支架为基础，经过复水过程处理的板层角膜支架，所述复水过 程处理所用的复水剂选自林格氏液，平衡液，IXPBS溶液，DMEM培养液，短、中期角膜保存 液中的至少一种，含水量和膨胀率为75% 90%。3.如权利要求1所述的一种板层组织工程角膜支架的制作方法，其特征在于包括以下 步骤1)将新鲜动物眼球经过碘伏浸泡，或用含抗菌素的PBS浸泡后，冲洗；2)消毒后用滤纸覆盖于角膜表面或直接浸泡，然后擦除上皮细胞层；3)在手术显微镜下作角膜缘切口，伸入虹膜恢复器分离前层角膜，分离完全后用角膜 剪剪下前层角膜，或直接用板层角膜分离刀分离前板层角膜；4)将分离的前板层角膜放于角膜枕上，前弹力层面朝下，然后用角膜环钻取3 IOmm 直径的板层角膜基质片；将去上皮后的新鲜板层角膜基质片直接放于密闭无菌的冻存管内 给予反复冻融复温处理，冷冻时间为1 5min，复温时间为3 15min，循环次数为1 5 次；5)将冻融的板层角膜基质片放置于低渗液中浸泡20 120min；6)将经过步骤5)处理过的板层角膜基质片放于30 40°C恒温箱中，先后于DNA酶孵 育60 180min，RNA酶中孵育60 180min，同时在各自的缓冲液中加入0. 5 2. 5ug/ml 的蛋白酶抑制剂，每毫克角膜基质干重含1. 10 士 0.25yg DNA，角膜基质含水量为50% 80% ；7)将经过酶消化的板层角膜基质片放置于电泳液TA液中(作好角膜的电泳方向标 记)，然后将整个电泳槽放于密闭消毒盒内，0 10°C恒温冰箱内进行冰浴电泳；8)将电泳完毕的板层角膜基质片进行梯度脱水，即得到未干燥板层组织工程角膜支 架，采用环氧乙烷灭菌处理，保存备用；9)将未干燥角膜基质片放于24孔板内进行干燥处理，即得到干燥板层组织工程角膜 支架；10)将干燥板层组织工程角膜支架进行钴60消毒，...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘祖国，李炜，邵毅，许传超，梁凌毅，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]
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