血红素加氧酶突变体及其在胆绿素合成中的应用制造技术

技术编号:41072890 阅读:12 留言:0更新日期:2024-04-24 11:29
本发明专利技术公开了血红素加氧酶突变体及其在胆绿素合成中的应用,属于基因工程技术领域。本发明专利技术实现了胆绿素合成关键酶来源筛选和理性改造,解决了之前胆绿素产量低的问题。通过从10种不同动物、植物、微生物来源的HO中筛选出最适合胆绿素大肠杆菌合成的关键限速酶,并在此基础上理性改造,可实现摇瓶水平胆绿素在大肠杆菌中的高效合成。在摇瓶水平,胆绿素产量可达13.41mg/L,该结果为胆绿素在食品、医药、化妆品领域的应用奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及血红素加氧酶突变体及其在胆绿素合成中的应用,属于生物工程。


技术介绍

1、血红素衍生物胆绿素(biliverdin,bv)天然存在于动物胆汁中,以其抗氧化、抗炎、抗凋亡的特性而闻名,在食品、药品和化妆品领域均有着广泛应用,在疾病治疗方面,胆绿素被广泛应用于艾滋病毒、hcv、hbv、登革热、埃博拉病毒、肠病毒等治疗。因此,国内外市场对胆绿素的需求量也在不断增加。

2、目前,胆绿素通常从猪胆汁中提取。该方法与从动物血液中提取血红素的方法一样,存在着诸多问题,例如原料短缺、价格昂贵、浪费能源、不可持续、不易纯化等。因此,需要寻求其他更加高效、环保、经济的方法生产胆绿素。与化学合成法相比,微生物法合成具有低成本、低合成难度、高纯度、高天然性和高安全性等优势,更能被人们所接受,是其能在工业上得到广泛利用的重要前提。与此同时,在各种微生物宿主菌株中,大肠杆菌是遗传和代谢信息研究最充分的生物体,作为微生物细胞工厂具有多种优势,是天然产物生产中最受欢迎的微生物宿主之一。因此,应用大肠杆菌来合成胆绿素是最佳的选择。

3、利用重组大肠杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.血红素加氧酶突变体,其特征在于,以SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列为出发序列,进行了如下任一种改进:

2.编码权利要求1所述血红素加氧酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.根据权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述质粒为pRSFDuet-1。

5.表达权利要求1所述血红素加氧酶突变体的重组微生物。

6.根据权利要求5所述的重组微生物,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。

7.根据权利要求6所述的重组微生物,其特征在于,所述大肠杆菌包括但不限于BL21(DE3),C41(DE3)或C43...

【技术特征摘要】

1.血红素加氧酶突变体,其特征在于,以seq id no.1所示的氨基酸序列为出发序列,进行了如下任一种改进:

2.编码权利要求1所述血红素加氧酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.根据权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述质粒为prsfduet-1。

5.表达权利要求1所述血红素加氧酶突变体的重组微生物。

6.根据权利要求5所述的重组微生物,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。

7.根据权利要求6所述的重组微生物,其特征在于,所述大...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵鑫锐王紫微周景文李江华堵国成陈坚王一墨任兆龙仲伟潭王福聚
申请(专利权)人:北京泛球生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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