用于检测新型冠状病毒的LAMP检测引物和探针组合、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供一种用于检测新型冠状病毒的LAMP检测引物和探针组合，在检测新型冠状病毒时无需增加额外试剂，特异性好，灵敏度高，操作简单，成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及采用环介导等温扩增技术检测新型冠状病毒。

技术介绍

1、环介导恒温扩增技术(1oop mediated isothermal amplification，lamp)是一种新型恒温核酸扩增方法，针对靶基因的6个区域设计4-6条特异引物，利用一种链置换dna聚合酶(bst dna polymerase)在60-65℃反应15-60分钟即可实现109～1010倍的核酸扩增，具有快速、简便、敏感性高、特异性强等特点，已在食品安全、微生物检验、临床诊断等方面得到了广泛应用。

2、lamp结果判读主要采用观测焦磷酸镁白色沉淀、hnb染料颜色、钙黄绿素荧光等方法，可通过目测或仪器直接判定检测结果。在这些方法中，阳性检测结果只能表明实验过程中发生了lamp反应，但无法区分真正的由引物和目标dna之间杂交形成的阳性扩增结果，以及由引物之间、引物与样本dna之间误杂交、误扩增导致的假阳性扩增结果，给临床检测等造成了不便。

3、近些年，lamp检测演化出多种探针法，实现方式为高保真酶酶切、核酸酶酶切和茎环结构(分子信本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测新型冠状病毒的LAMP检测引物和探针组合，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的组合在制备用于检测新型冠状病毒的试剂盒中的应用。

3.一种用于检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于，含有如权利要求1所述的组合。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有Bst DNA聚合酶、耐热反转录酶。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有缓冲液、KCl、(NH4)2SO4、MgSO4、dNTPs、Tween 20、双蒸水。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有阳性对照和阴性对照，所...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测新型冠状病毒的lamp检测引物和探针组合，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的组合在制备用于检测新型冠状病毒的试剂盒中的应用。

3.一种用于检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于，含有如权利要求1所述的组合。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有bst dna聚合酶、耐热反转录酶。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有缓冲液、kcl、(nh4)2so4、mgso4、dntps、tween 20、双蒸水。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有阳性对照和阴性对照，所述阳性对照为新型冠状病毒n基因的假病毒核酸，所述阴性对照为双蒸水。

7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，进一步含有核酸提取试剂。

8.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，含有独立包装的缓冲液混合物，其含有50-250mm tris-hcl(ph 8.8)缓冲液、50-400mm kcl、25-100mm(nh4)2so4、25-50mm mgso4、2.5-12.5mm dntps、0.05-5％tween 20、0.5-3μm的正向外引物f3、0.5-3μm的反向外引物b3、4-10μm的正向内引物fip、4-10μm的正向内引物bip、2.5-12μm的正向环引物lf、2.5-12μm的反向环引物lb和0.2-4μm...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟钰玉，张花景，谢子珂，杜珍奇，
申请(专利权)人：友康生物科技北京股份有限公司，
类型：发明
国别省市：