一种人-羊轮状病毒重组质粒和人-羊轮状病毒重配病毒株及其构建方法和应用技术

技术编号:40984938 阅读:28 留言:0更新日期:2024-04-18 21:29
本发明专利技术提供了一种人‑羊轮状病毒重组质粒和人‑羊轮状病毒重配病毒株及其构建方法和应用,属于轮状病毒疫苗技术领域。本发明专利技术的8个人轮状病毒感染性克隆质粒的序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:8所示,利用上述8个人轮状病毒质粒和11个羊轮状病毒感染性克隆质粒通过反向遗传学病毒拯救系统成功制备得到了8株人‑羊轮状病毒重配毒株,弥补了我国现有轮状病毒疫苗株的主要抗原与我国主要流行株不匹配的空白。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及轮状病毒疫苗,尤其涉及一种人-羊轮状病毒重组质粒和人-羊轮状病毒重配病毒株及其构建方法和应用


技术介绍

1、轮状病毒(rotavirus,rv)属于呼肠孤病毒科,轮状病毒属;已被确认为引起全世界婴幼儿急性胃肠炎最常见的病原。轮状病毒感染每年导致全球约1.25亿婴幼儿发生腹泻,轮状病毒腹泻每年造成全球90万5岁以下婴幼儿死亡,严重影响了婴幼儿的健康并给全球带来巨大的疾病负担。轮状病毒引起的腹泻至今尚无特效药物进行治疗,疫苗是目前证实唯一最有效的预防方法。

2、轮状病毒基因组由11个不连续的双链rna节段组成,分别编码病毒的6个结构蛋白(vp1~vp4、vp6、vp7)和6个非结构蛋白(nsp1-6)。vp6占病毒蛋白量的51%,以三聚体形式构成病毒的中壳,是轮状病毒组共同抗原和亚组特异性抗原。vp4、vp7构成rv的外壳,具有中和抗原活性,能刺激机体产生中和抗体。其中vp7为糖蛋白,vp4为蛋白酶敏感蛋白,是外壳刺突蛋白,约占病毒蛋白总量15%。vp6是轮状病毒组共同抗原和亚组特异性抗原。根据vp6抗原性的不同,rv可分为7个组(本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种人轮状病毒感染性克隆质粒,其特征在于来源于我国主要流行基因型,其序列特征如下:

2.一种羊轮状病毒感染性克隆质粒,其特征在于,用权利要求1中的任意一个人轮状病毒感染性克隆质粒单独替换羊轮状病毒感染性克隆质粒组中对应的羊轮状病毒感染性克隆质粒;

3.一种人-羊轮状病毒的反向遗传病毒拯救系统,其特征在于,包括权利要求2所述的人-羊轮状病毒感染性克隆质粒组、辅助质粒pCMV-868CP、MA104或MA104 N*V工程细胞株和BHK-T7/9细胞。

4.根据权利要求3所述的人-羊轮状病毒的反向遗传病毒拯救系统,其特征在于,辅助质粒pCMV-868C...

【技术特征摘要】

1.一种人轮状病毒感染性克隆质粒,其特征在于来源于我国主要流行基因型,其序列特征如下:

2.一种羊轮状病毒感染性克隆质粒,其特征在于,用权利要求1中的任意一个人轮状病毒感染性克隆质粒单独替换羊轮状病毒感染性克隆质粒组中对应的羊轮状病毒感染性克隆质粒;

3.一种人-羊轮状病毒的反向遗传病毒拯救系统,其特征在于,包括权利要求2所述的人-羊轮状病毒感染性克隆质粒组、辅助质粒pcmv-868cp、ma104或ma104 n*v工程细胞株和bhk-t7/9细胞。

4.根据权利要求3所述的人-羊轮状病毒的反向遗传病毒拯救系统,其特征在于,辅助质粒pcmv-868cp以cmv为启动子,以(g4s)4为连接肽,融合表达非洲猪瘟病毒加帽酶np868r和t7 rnap。

5.根据权利要求3所述的人-羊轮状病毒的反向遗传病毒拯救系统,其特征在于,将bvdv的n蛋白和piv5的...

【专利技术属性】
技术研发人员:段招军刘夏飞
申请(专利权)人:伊诺维康北京生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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