一种重组质粒、重组菌及其在制备用于递送mRNA的自组装病毒样颗粒中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种重组质粒、重组菌及其在制备用于递送mRNA的自组装病毒样颗粒中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术将噬菌体成熟酶基因序列、衣壳蛋白序列与编码目的基因片段构建到同一质粒载体上，通过原核或真核表达后即可得到内含特定基因的噬菌体病毒样颗粒。利用本发明专利技术的重组质粒表达得到的用于递送mRNA的自组装病毒样颗粒耐能够抵抗RNA酶和DNA酶的降解作用，且因其能实现体外自组装的功能可有效包装和递送核酸，生产成本低，具备高度稳定性。本发明专利技术基于自组装病毒样颗粒递送的mRNA核酸疫苗对于建立与优化核酸胞内递送系统具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学，具体涉及一种重组质粒、重组菌及其在制备用于递送mrna的自组装病毒样颗粒中的应用。

技术介绍

1、mrna疫苗是将含有编码抗原蛋白的mrna导入人体，直接进行翻译，形成相应的抗原蛋白，从而诱导机体产生特异性免疫应答，达到预防免疫的作用。mrna疫苗包含病毒的基因序列，不带有病毒成分，没有感染风险。与传统疫苗相比，mrna疫苗具有制造简单、反应快速、靶向多种病原体、能够诱导广泛的保护性免疫反应等优点。然而，核酸自身稳定性差且极易被降解，开发高效安全的递送系统对mrna疫苗至关重要。

2、使用脂质体纳米颗粒载体(lnps)递送mrna核酸类疫苗已实现商业化，成为目前临床上先进的核酸递送载体。lnps由四种成分组成：阳离子脂质分子、辅助脂质分子、胆固醇、peg脂质，组成成分具有高度生物相容性和生物可降解性。lnps原理是利用分子间相互作用而自发组织成纳米结构实体，可保护包封的mrna不被核酸酶降解，协助mrna的胞内递送，同时也可能影响固有免疫反应，为mrna疫苗提供协同佐剂作用。然而，lnps存在潜在的细胞毒性、表面功能化难本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组质粒，其特征在于，插入有逆转录病毒类噬菌体样颗粒的编码基因和融合基因；所述融合基因自5'到3'端顺次连接有IRES、目的mRNA的cDNA、3'UTR、包装序列和polyA。

2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述目的mRNA包括EGFP mRNA。

3.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述融合基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

4.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述逆转录病毒类噬菌体样颗粒的编码基因和融合基因的克隆位点不同。

5.一种重组菌，其特征在于，包含权利要求1～4任意一项所述...

【技术特征摘要】

1.一种重组质粒，其特征在于，插入有逆转录病毒类噬菌体样颗粒的编码基因和融合基因；所述融合基因自5'到3'端顺次连接有ires、目的mrna的cdna、3'utr、包装序列和polya。

2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述目的mrna包括egfp mrna。

3.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述融合基因的核苷酸序列如seq idno.3所示。

4.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述逆转录病毒类噬菌体样颗粒的编码基因和融合基因的克隆位点不同。

5.一种重组菌，其特征在于，包含权利要求1～4任意一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈泽良，张劲松，范首东，祁安东，
申请(专利权)人：东沃同泰凤城生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：