【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物分离纯化设备，具体涉及一种多价噬菌体分离纯化设备及分离纯化方法。
技术介绍
1、噬菌体疗法为修复上述污染土壤提供了一种全新途径，细菌噬菌体是一类较为专属捕食活体宿主细菌而存活的生物体，在土壤、水、空气乃至人、动物体表或肠道内均广泛分布了大量噬菌体，据估算其总量达到1031数量级；噬菌体疗法是指通过分离、筛选、纯化和富集宿主细菌的专属噬菌体之后，向污染土壤中添加特定噬菌体菌液，定向侵染灭活抗性细菌的修复方式。国外学者已成功将噬菌体疗法应用在灭活辣椒、番茄、葡萄等果蔬的植物病害细菌或人畜共患抗性细菌的食品安全保障领域。
2、农田土壤中各种病原菌的残留和繁殖将给人类健康和生态环境带来重大安全隐患，开展针对性的修复技术研究迫在眉睫。噬菌体疗法靶向灭活土壤中的病原菌，为修复这类污染土壤提供了新的途径。
3、然而，现有技术中使用噬菌体疗法来削减土壤中抗性细菌的生物修复技术研究则相对较少；此外，缺少一种土壤中多价噬菌体的分离纯化设备。
技术实现思路
1、针对上述存在的技术问题，本专利技术提供了一种多价噬菌体分离纯化设备及分离纯化方法。
2、本专利技术的技术方案为：一种多价噬菌体分离纯化设备，包括内底部一侧设置有电气箱、侧壁上铰接有箱门的设备箱、设置在设备箱内部且位于电气箱上端的土壤处理组件、设置在设备箱内部另一侧的分离组件和纯化组件、设置在设备箱内部且位于土壤处理组件和分离组件之间的转移组件和设置在电气箱内部的超声振荡器；
3、
4、分离组件包括通过第一安装板设置在设备箱内部一侧上端的转换盘、设置在第一安装板下底面且与转换盘连接的转换电机、数个等距分布在转换盘上的过滤盒、活动卡接在各个过滤盒上端的过滤盘和与过滤盘转动卡接且与设备箱内顶部固定连接的第二电动杆；过滤盘上与各个过滤盒位置对应处均设置有过滤板；
5、纯化组件设置有数个，且数个纯化组件依次设置在第一安装板下端，纯化组件包括通过第二安装板与设备箱固定连接的第二电机、设置第二安装板上且与第二电机连接的第二离心盘和活动卡接在第二离心盘上的纯化盒；
6、转移组件用于对混合筒、过滤盒和纯化盒内部物料进行转移；超声振荡器的输出端电性连接有数个超声振子，各个超声振子分别一一对应设置在第一离心盘、第二离心盘上端面。
7、进一步地，转移组件包括通过支撑架与设备箱内底部连接的旋转柱、设置在支撑架内部且与旋转柱连接的旋转电机、滑动卡接在旋转柱上的移动臂、转动卡接在移动臂端部的切换座和数个等距分布在切换座上的吸管；旋转柱一侧设置有齿条，移动臂上设置有第三电机、第四电机和微型吸泵；第三电机的输出轴上设置有与齿条啮合连接的驱动齿轮；第四电机的输出轴与切换座连接；微型吸泵的输出端分别通过导管与各个吸管一一对应连接；
8、说明：使用时，利用旋转电机带动旋转柱旋转，利用第三电机上的驱动齿轮与齿条的啮合作用带动移动臂沿旋转柱上下移动，利用第四电机带动切换座旋转，从而能够利用不同的吸管进行滤液的转移，避免了滤液间相互接触而影响多价噬菌体的分离纯化效果。
9、进一步地，还包括分别与第一电机、第一电动杆、转换电机、第二电动杆和超声振荡器电性连接的plc控制器；
10、说明：通过设置plc控制器有利于提高设备的工作效率，同时避免人工接触试样而造成试样污染，提高了多价噬菌体分离纯化的可靠性。
11、进一步地，第一离心盘、转换盘和第二离心盘上均设置有夹持组件；夹持组件包括数个等距分布在第一离心盘上，且与第一离心盘滑动卡接的夹持块、转动卡接在第一离心盘内部且与各个夹持块位置对应处均设置有楔形顶块的驱动圈和设置在第一离心盘上且为驱动圈提供动力的夹持电机；夹持电机的输出轴贯穿第一离心盘且设置有小齿轮，驱动圈的外壁上设置有与小齿轮啮合连接的齿牙；
12、说明：使用时，利用夹持电机带动小齿轮旋转，利用小齿轮与齿牙的啮合作用带动驱动圈旋转，利用驱动圈上的楔形顶块推动各个夹持块在第一离心盘上移动并相互靠近，从而能够提高混合筒、过滤盒和纯化盒旋转过程中的稳定性。
13、进一步地，密封盖与混合筒连接处设置有密封套，密封盖内顶部设置有与混合筒抵接的辅助转轮；
14、说明：通过设置密封套能够避免混合筒旋转过程中土壤溶液溢出混合筒；通过设置辅助转轮有利于提高混合筒旋转时的流畅性。
15、进一步地，各个吸管内部均设置有液位传感器；
16、说明：通过在吸管内部设置液位传感器，能够实现滤液的定量抽取，从而有利于多价噬菌体分离纯化过程中各物质投加量的精准定量、
17、进一步地，密封盖下底面设置有土样破碎板；
18、说明：混合筒旋转过程中，利用土样破碎板能够对土壤样本进行充分破碎，从而有利于土壤中多价噬菌体的高效分离。
19、进一步地，各个夹持块相对的一侧均设置有防护齿；
20、说明：通过在夹持块上设置防护齿，有利于提高夹持块对混合筒、过滤盒和纯化盒夹持效果的稳定性。
21、进一步地，电气箱内部设置有输出端贯穿电气箱的电加热器，设备箱内部设置有温度传感器；
22、说明：通过设置电加热器和温度传感器，有利于对设备箱内部温度进行精准控制，从而为多价噬菌体的分离和纯化提供适宜的温蒂条件。
23、本专利技术还提供了一种多价噬菌体分离纯化方法，包括以下步骤：
24、s1、分别将第一电机、第一电动杆、转换电机、第二电动杆和超声振荡器与外部电源连接；
25、s2、打开箱门，向混合筒内部加入5g新鲜土壤样品和50ml无菌水；然后开启超声振荡器和第一电动杆，利用第一电动杆推动密封盖与混合筒顶端扣合，然后利用第一离心盘上的超声振子以150rpm的转速振荡培养土壤样品5h；最后开启第一电机，以10000rpm的转速离心处理土壤样品5min；
26、s3、二次启动第一电动杆，使密封盖与混合筒脱离，利用转移组件将步骤s2中混合筒内部上清液转移至过滤盘中，上清液经过滤板过滤后进入任意一个过滤盒内部；然后取9ml滤液并转移至其中一个纯化盒内部，并向纯化盒内部加入1ml生长到对数期的宿主菌悬液和40ml lb液体培养基，最后向纯化盒内部加入加氯化钙固体至溶液终浓度为1mmol/l；开启第二电机，使纯化盒内部物料以150rpm的转速培养12h，所得培养液以10 000rpm的转速离心5min；开启转换电机，利用转换电机带动转换盘旋转，然后利用转移组件将培养液转移至过滤盘中，过滤后的培养液转进入另外一个过滤盒内部，得到含有噬菌体的原液；
27、s4、利用转移组件吸取步骤s3的含有噬菌体的原液100μl并转移至另外一个纯化盒内部，然后向纯化盒内部加入100μl的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，包括内底部一侧设置有电气箱(10)、侧壁上铰接有箱门(11)的设备箱(1)、设置在所述设备箱(1)内部且位于所述电气箱(10)上端的土壤处理组件(2)、设置在设备箱(1)内部另一侧的分离组件(3)和纯化组件(4)、设置在设备箱(1)内部且位于土壤处理组件(2)和分离组件(3)之间的转移组件(5)和设置在所述电气箱(10)内部的超声振荡器(6)；
2.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述转移组件(5)包括通过支撑架(500)与设备箱(1)内底部连接的旋转柱(50)、设置在所述支撑架(500)内部且与所述旋转柱(50)连接的旋转电机(51)、滑动卡接在所述旋转柱(50)上的移动臂(52)、转动卡接在所述移动臂(52)端部的切换座(53)和数个等距分布在所述切换座(53)上的吸管(54)；所述旋转柱(50)一侧设置有齿条(501)，所述移动臂(52)上设置有第三电机(55)、第四电机(56)和微型吸泵(57)；所述第三电机(55)的输出轴上设置有与所述齿条(501)啮合连接的驱动齿轮(550)；所述第四
3.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，还包括分别与第一电机(21)、第一电动杆(230)、转换电机(31)、第二电动杆(34)和超声振荡器(6)电性连接的PLC控制器。
4.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述第一离心盘(20)、转换盘(30)和第二离心盘(41)上均设置有夹持组件(7)；所述夹持组件(7)包括数个等距分布在第一离心盘(20)上，且与第一离心盘(20)滑动卡接的夹持块(70)、转动卡接在第一离心盘(20)内部且与各个所述夹持块(70)位置对应处均设置有楔形顶块(710)的驱动圈(71)和设置在第一离心盘(20)上且为所述驱动圈(71)提供动力的夹持电机(72)；所述夹持电机(72)的输出轴贯穿第一离心盘(20)且设置有小齿轮(720)，所述驱动圈(71)的外壁上设置有与所述小齿轮(720)啮合连接的齿牙。
5.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述密封盖(23)与混合筒(22)连接处设置有密封套(231)，密封盖(23)内顶部设置有与混合筒(22)抵接的辅助转轮(232)。
6.根据权利要求2所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，各个所述吸管(54)内部均设置有液位传感器。
7.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述密封盖(23)下底面设置有土样破碎板(24)。
8.根据权利要求4所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，各个所述夹持块(70)相对的一侧均设置有防护齿。
9.应用权利要求1-8任一所述的设备进行多价噬菌体分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：
10.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述密封盖(23)下底面设置有土样破碎装置(24)。
...【技术特征摘要】
1.一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，包括内底部一侧设置有电气箱(10)、侧壁上铰接有箱门(11)的设备箱(1)、设置在所述设备箱(1)内部且位于所述电气箱(10)上端的土壤处理组件(2)、设置在设备箱(1)内部另一侧的分离组件(3)和纯化组件(4)、设置在设备箱(1)内部且位于土壤处理组件(2)和分离组件(3)之间的转移组件(5)和设置在所述电气箱(10)内部的超声振荡器(6)；
2.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，所述转移组件(5)包括通过支撑架(500)与设备箱(1)内底部连接的旋转柱(50)、设置在所述支撑架(500)内部且与所述旋转柱(50)连接的旋转电机(51)、滑动卡接在所述旋转柱(50)上的移动臂(52)、转动卡接在所述移动臂(52)端部的切换座(53)和数个等距分布在所述切换座(53)上的吸管(54)；所述旋转柱(50)一侧设置有齿条(501)，所述移动臂(52)上设置有第三电机(55)、第四电机(56)和微型吸泵(57)；所述第三电机(55)的输出轴上设置有与所述齿条(501)啮合连接的驱动齿轮(550)；所述第四电机(56)的输出轴与切换座(53)连接；所述微型吸泵(57)的输出端分别通过导管与各个吸管(54)一一对应连接。
3.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离纯化设备，其特征在于，还包括分别与第一电机(21)、第一电动杆(230)、转换电机(31)、第二电动杆(34)和超声振荡器(6)电性连接的plc控制器。
4.根据权利要求1所述的一种多价噬菌体分离...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵远超，李群，万金忠，张胜田，周艳，范婷婷，王祥，
申请(专利权)人：生态环境部南京环境科学研究所，
类型：发明
国别省市：
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