一种核酸提取-扩增方法技术

本发明专利技术公开了一种核酸提取‑扩增方法，属于生物医药技术领域。本发明专利技术中的核酸提取‑扩增方法，包括以下步骤：步骤一：将待测核酸样品加入到所述混合有磁珠的裂解液中，混匀，室温静置5‑10分钟；将离心管放置在磁力架上，磁吸固定磁珠，除去裂解液；步骤二：将离心管从磁力架上取下，将洗涤液加入离心管中，震荡洗涤，再将其放回磁力架上，磁吸固定磁珠，除去洗涤液；步骤三：最后将PCR反应液加入离心管中，充分混匀，置于PCR仪器中，进行扩增反应。本发明专利技术中提取‑扩增的方法可以在一个容器中快速、高效地进行反应，有效地避免了交叉污染，极大地简化了整个提取流程，提高了检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及一种核酸提取-扩增方法。

技术介绍

1、核酸作为一种分子标志物已被广泛的用于疾病诊断，食品安全检测和环境监测领域。核酸检测过程包括了核酸样本的提取纯化、扩增以及检测信号的产生等主要步骤。常规的检测技术中这些步骤需要分别在独立的操作空间内完成，对检测场地和人员的要求较高，存在成本昂贵，耗时耗力等缺点。同时，在进行多个样本检测时，核酸提取和扩增步骤采取并行处理方式，容易引起不同样本之间的交叉污染、核酸扩增产物的逸散等，导致检测结果的偏差。

2、国内现有的磁珠法提取试剂，其磁珠的制备方法繁琐复杂，合成的磁珠在用于核酸提取时需要结合、孵育至少两次以上，才能用于下一步检测。磁珠往往因其影响后期反应的进行而不能跟随核酸样本进入扩增阶段，需要在此之前加入特定溶液洗脱使得目标核酸与磁珠脱离，并进一步清洗杂质，过程繁琐，程序复杂，并不能真正减少核酸提取过程的时间，且易造成交叉污染，影响后续检测。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种核酸提取-扩增方法，以解决核酸在提取、扩增本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，催化剂为二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3乙基碳二亚胺盐酸盐中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，步骤S1中4-醛基苯甲酸、4-二甲氨基吡啶、催化剂、壳聚糖/醋酸溶液和二氯甲烷的用量比为0.5g：0.1g：1.5g：15mL：30mL。

4.根据权利要求1所述的一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，步骤S2中FeCl 3·6H20、FeSO4·7H20、改性壳聚糖/乙酸溶液、...

【技术特征摘要】

1.一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，催化剂为二环己基碳二亚胺、n-羟基丁二酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3乙基碳二亚胺盐酸盐中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种核酸提取-扩增方法，其特征在于，步骤s1中4-醛基苯甲酸、4-二甲氨基吡啶、催化剂、壳聚糖/醋酸溶液和二氯甲烷的用量比为0.5g：0.1g...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宗文，雍金贵，刘奇，高恩，潘红，
申请(专利权)人：安徽瑞拜药业有限公司，
类型：发明
国别省市：