一种酪氨酸解氨酶突变体及其应用制造技术

技术编号:40960259 阅读:39 留言:0更新日期:2024-04-18 20:38
本发明专利技术公开了一种酪氨酸解氨酶突变体及其应用,通过对酪氨酸解氨酶的第458位的氨基酸进行突变,获得了能够提高和生产性能的酪氨酸解氨酶突变体,将得到的突变体在大肠杆菌中表达并进行发酵生产,能够使得咖啡酸含量较亲本的501.0mg/L提高至604.4mg/L,提高了20.6%,进一步的在15L发酵罐中放大生产,最终获得了产量为6.36g/L,时空产率为0.18g/L/h的咖啡酸。因而本发明专利技术获得的酪氨酸解氨酶突变体具备广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程,具体涉及一种酪氨酸解氨酶突变体及其应用


技术介绍

1、咖啡酸,又名3,4-二羟基肉桂酸,属于羟基肉桂酸类化合物,存在于多种中草药植物中。咖啡酸具有较强的抗氧化、抗衰老以及抗肿瘤等药理活性,在医药和化妆品行业已经获得了广泛应用。目前主要通过植物提取或者化学合成获得,受制于含量低、提取方法不成熟、成本高以及环境污染等问题。随着合成生物学近年来迅速发展,利用微生物细胞工厂合成植物天然产物已成为研究热点。2012年,lin等利用4-羟基苯乙酸-3-羟化酶和酪氨酸解氨酶以实现从酪氨酸到咖啡酸的合成,并通过加强酪氨酸的生物合成,在摇瓶中获得了50.2mg/l的咖啡酸(biosynthesis of caffeic acid in escherichia coli using itsendogenous hydroxylase complex,microbial cell factories,2012)。2017年,kawaguchi等为了利用硫酸盐浆同步糖化发酵生产咖啡酸,有研究者表达了来源于pseudomonas aeruginosa的4-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酪氨酸解氨酶突变体,其特征在于,氨基酸序列为SEQ ID NO.1的酶为亲本,将亲本第458位的氨基酸进行突变。

2.根据权利要求1所述的一种酪氨酸解氨酶突变体,其特征在于,所述突变体是将氨基酸序列为SEQ ID NO.1的亲本第458位氨基酸突变为苯丙氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述的突变体或含有权利要求3所述基因的微生物细胞。

6.一种微生物细胞,其特征在于,在权利要求5所述的微生物细胞中表达酪氨酸解氨酶。

7.一种发酵法...

【技术特征摘要】

1.一种酪氨酸解氨酶突变体,其特征在于,氨基酸序列为seq id no.1的酶为亲本,将亲本第458位的氨基酸进行突变。

2.根据权利要求1所述的一种酪氨酸解氨酶突变体,其特征在于,所述突变体是将氨基酸序列为seq id no.1的亲本第458位氨基酸突变为苯丙氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述的突变体或含有权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员:储消和张振宇吴杰群柳鹏福黄书生
申请(专利权)人:浙江工业大学
类型:发明
国别省市:

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