【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，尤其涉及一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法。
技术介绍
1、随着世界经济发展的需要，水路运输已成为现代重要交通运输体系之一，根据相关数据显示：水路运输完成了世界80%以上的贸易总量，是当今最为经济、节能的运输方式。然而，由船舶运输而产生的船上生活污水及船舶靠岸卸载的含油废水对海洋生态环境和公众健康都造成了巨大的危害。
2、目前国内外船舶污水污染防治工作仍然面临着一些弊端及迫切需要解决的问题：比如船舶靠岸卸载的含油压载水/洗舱油污水/舱底油污水含油种多，乳化程度高，常规技术除油效果不稳定、抗冲击能力弱、去除范围窄、并且处理后的水质难以满足日益严格的环保要求等问题。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，本专利技术方法获得菌群对船舶中含油废水具有较好的去除能力，去油能力稳定，并且除油的方法和处理后的水质满足环保的要求。
2、本专利技术提供了一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，包括如下步骤：
3、s1：收集石油污染的污泥，稀释，培养，获得第一菌群；
4、s2：将第一菌群在油作为唯一的碳源的选择培养基中，进行培养，获得第二菌群；
5、s3：将第二菌群在磁作用下转移至选择培养基中培养，将培养后的菌群转移至含有nacl（氯化钠）的高盐培养基中进行培养，冷冻处理，获得目标菌群。
6、进一步的，所述s1中稀释采用无菌水。
7、进
8、进一步的，所述s1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5ml，在30℃-35℃下培养48h。
9、进一步的，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/l-1.1g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.2g/l-0.4g/l): (0.2g/l-0.4g/l):(0.5g/l-0.6g/l)。
10、进一步的，所述无机盐培养基的ph值范围为7-8。
11、进一步的，所述无机盐培养基中还包括氢氧化钠。
12、进一步的，所述油包括ifo180燃油、ifo380燃油中的一种或多种。
13、进一步的，所述s2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/l-2g/l):(0.9g/l-1.1g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.2g/l-0.4g/l):(0.2g/l-0.4g/l):(0.5g/l-0.6g/l)。
14、进一步的，所述s2中第一菌群的接种量为5ml，选择培养基的体积为1l。
15、进一步的，所述s2中选择培养基的ph值为7-8。
16、进一步的，所述s2中选择培养基中还包括氢氧化钠。
17、进一步的，所述s2中培养的条件为在30℃-35℃下培养48h。
18、进一步的，所述s3中第二菌群的接种量为5ml，选择培养基的体积为1l。
19、进一步的，所述s3中磁作用的条件为：磁场强度为10mt-20mt；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止3h-4h。
20、进一步的，所述s3中对未接种的选择性培养中的油含量进行测试，在磁作用过程中，每隔4h对接种后的选择性培养中的油含量进行测试，比较两次相邻的测试结果，直至选择培养中的油含量的下降速度趋于平缓，则停止继续在选择培养基中培养。
21、进一步的，所述s3中高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(15g/l-20g/l):(1g/l-2g/l):(0.9g/l-1.1g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.2g/l-0.4g/l):(0.2g/l-0.4g/l): (0.5g/l-0.6g/l)。
22、进一步的，所述s3中高盐培养基的ph值为7-8。
23、进一步的，所述s3中高盐培养基中还包括氢氧化钠。
24、进一步的，所述s3中高盐培养基中的接种量为5ml，高盐培养基的体积为1l。
25、进一步的，所述s3中高盐培养基的培养条件为在30℃-35℃下培养48h。
26、进一步的，所述s3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5ml菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻10min-15min，在30℃-35℃水域下进行解冻。
27、本专利技术还提供了所述基于磁生物技术的微生物菌群制备方法获得菌群在去除船舶含油污水中的应用。
28、本专利技术实施例具有以下技术效果：
29、1.本专利技术方法简单方便容易实现，且获得目标菌群能对船舶含油废水有高达90%以上的除油率。
30、2.专利技术的方法中采用了磁作用、高盐培养基和冷冻处理，磁作用不仅能有利于提升目标菌群的代谢能力，还有利于目标菌群的富集，为目标菌群进一步在高盐培养基和冷冻处理做准备；高盐培养基一方面能减少目标菌群细胞内的水分，防止目标菌群在冷冻处理时的死亡，另一方面能一定程度增大目标菌群的膜通透性，从而有利于提升目标菌群对油的代谢能力；最后将高盐培养基培养后的目标菌群进行冷冻处理，提升目标菌群对油的代谢能力。
31、3. 本专利技术方法获得菌群对船舶中含油废水具有较好的去除能力，去油能力稳定，并且除油的方法和处理后的水质满足环保的要求。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中稀释的具体步骤为：称取10g石油污染的污泥放入带玻璃珠的90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10mL第一次菌群稀释液，转移至具有90mL瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5mL，在30℃-35℃下培养48h，所述无机盐培养基的pH值范围为7-8。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.5g/L-0.6g/L)；
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中磁作用的条件为：磁场强度为10mT-20mT；磁作用方式，采用间接式刺激方式，磁作用每隔10h，磁作用停止3h-4h。
7. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中高盐培养基包括氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述氯化钠、油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(15g/L-20g/L):(1g/L-2g/L):(0.9g/L-1.1g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.4g/L-0.6g/L):(0.2g/L-0.4g/L):(0.2g/L-0.4g/L): (0.5g/L-0.6g/L)。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述高盐培养基的pH值为7-8；高盐培养基的培养条件为在30℃-35℃下培养48h。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中冷冻处理的具体步骤为：移取高盐培养基中培养后的0.5mL菌液置于装有甘油的离心管中，然后在-80℃下冷冻10min-15min，在30℃-35℃水域下进行解冻。
10.权利要求1-权利要求9任一项所述的基于磁生物技术的微生物菌群制备方法获得菌群在去除船舶含油污水中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种基于磁生物技术的微生物菌群制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s1中稀释的具体步骤为：称取10g石油污染的污泥放入带玻璃珠的90ml瓶装无菌水中，手摇震荡，使石油污染污泥分散，获得第一次菌群稀释液；吸取10ml第一次菌群稀释液，转移至具有90ml瓶装无菌水中，手摇震荡，获得第二次菌群稀释液，重复操作，直至获得第五次菌群稀释液。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s1中的培养的具体步骤包括：制备无机盐培养基，吸取稀释后的含有污泥的菌液5ml，在30℃-35℃下培养48h，所述无机盐培养基的ph值范围为7-8。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述无机盐培养基包括硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(0.9g/l-1.1g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.4g/l-0.6g/l):(0.2g/l-0.4g/l): (0.2g/l-0.4g/l):(0.5g/l-0.6g/l)。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s2中选择培养基包括油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵；所述油、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、无水氨化钙、硝酸铵的浓度比为(1g/l-2g/l):(0.9g/l-1.1g/l):(0.4g/l-0....
【专利技术属性】
技术研发人员：李广涛，吴世红，许刚，王志明，李皑菁，姚海波，葛丽燕，冯志强，李美玲，罗小凤，
申请(专利权)人：天科院环境科技发展天津有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。