【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，具体涉及cscml28基因在黄瓜白粉病抗性中的应用。
技术介绍
1、黄瓜白粉病是由瓜白粉菌和瓜单囊壳白粉菌侵染所引起的，在生产上，白粉病与霜霉病、枯萎病并称为黄瓜三大病害。白粉病在我国各地均有发生，尤其在设施栽培条件下，作物种植密度大、通风透光不良、氮肥施用量增大以及高温高湿等条件促使白粉病危害加剧，通常在生长中后期发病重，造成叶片干枯甚至提前拉秧，病征为幼叶、嫩茎、花芽等处出现白粉状霉斑，逐渐扩大，厚密，不久连成一片，遮蔽植物绿色组织，严重影响黄瓜植株的光合作用，进而影响果实的品质和产量。传统生产中，人们主要通过喷洒农药或培育具有r基因的抗病品种防治白粉病。然而农药的过度施用会造成环境污染，故利用生物学技术研究白粉病的抗病机制，进行治疗指导，在抗病品种的选育具有重要意义。
2、抗病品种培育成为防治白粉病的首选方法。在黄瓜中，被报道且被应用的白粉病抗性基因并不多。
技术实现思路
1、本专利技术通过分析黄瓜中含有的抗病基因，通过vigs瞬时沉默cscml28基因，从而发现了与黄瓜白粉病相关的抗病基因。
2、本专利技术的目的之一在于保护cscml28基因在黄瓜白粉病抗性中的应用，所述cscml28基因为能够编码下述(a)或(b)蛋白质的核苷酸序列：
3、(a)由seq id no：2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
4、(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸序列且具有同样酶活性的由(a)衍生
5、进一步，所述cscml28基因的核苷酸序列选自下述(a)或(b)中的任一种：
6、(a)核苷酸序列如seq id no：1所示的dna序列；
7、(b)与(a)中的dna序列具有90％以上同源性，且编码权利要求1所述的蛋白质的核苷酸序列。
8、本专利技术的目的之二在于保护检测上述cscml28基因表达情况的定量检测引物在筛选黄瓜白粉病抗性品种中的应用。
9、进一步，所述定量检测引物的核苷酸序列如seq id no:6～7所示。
10、本专利技术的目的之三在于保护上述cscml28基因的沉默序列在改变黄瓜白粉病抗性中的应用，所述沉默序列的核苷酸序列如seq id no：3所示。
11、本专利技术的目的之四在于保护含有上述沉默序列的载体、工程菌在改变黄瓜白粉病抗性中的应用。
12、进一步，所述工程菌包括但不限于大肠杆菌、农杆菌。
13、进一步，所述载体为pv190载体。
14、本专利技术的目的之五在于保护一种改变黄瓜白粉病抗性的方法，所述方法包括以下步骤：
15、根据黄瓜cscml28基因在https://vigs.solgenomics.net/网站上设计该基因的沉默序列，并根据沉默序列设计并合成构建该载体所需的引物；
16、利用所述引物对所述cscml28沉默序列进行pcr扩增，并把扩增产物进行回收和酶切链接，从而在载体质粒的多克隆位点间插入所述cscml28沉默序列并构建vigs基因沉默载体；
17、然后将构建的vigs基因沉默载体侵染黄瓜种子、组织，培养并移栽即得。
18、进一步，所述沉默序列的核苷酸序列如seq id no：3所示，构建载体所需引物的序列如seq id no:4～5所示。
19、本专利技术通过分析黄瓜中含有的抗病基因，通过vigs瞬时沉默，发现并确定了与黄瓜白粉病相关的新的基因，这对于解析黄瓜白粉病抗性的分子机制，培育具有白粉病抗性的黄瓜具有重要意义。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.CsCML28基因在黄瓜白粉病抗性中的应用，其特征在于，所述CsCML28基因为能够编码下述(a)或(b)蛋白质的核苷酸序列：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CsCML28基因的核苷酸序列选自下述(a)或(b)中的任一种：
3.检测权利要求1所述的CsCML28基因表达情况的定量检测引物在筛选黄瓜白粉病抗性品种中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述定量检测引物的核苷酸序列如SEQ IDNO:6～7所示。
5.CsCML28基因的沉默序列在改变黄瓜白粉病抗性中的应用，其特征在于，所述沉默序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
6.含有权利要求5所述的沉默序列的载体、工程菌在改变黄瓜白粉病抗性中的应用。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述工程菌包括但不限于大肠杆菌、农杆菌。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述载体为pV190载体。
9.一种改变黄瓜白粉病抗性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
10.
...【技术特征摘要】
1.cscml28基因在黄瓜白粉病抗性中的应用，其特征在于，所述cscml28基因为能够编码下述(a)或(b)蛋白质的核苷酸序列：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述cscml28基因的核苷酸序列选自下述(a)或(b)中的任一种：
3.检测权利要求1所述的cscml28基因表达情况的定量检测引物在筛选黄瓜白粉病抗性品种中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述定量检测引物的核苷酸序列如seq idno:6～7所示。
5.cscml28基因的沉默序列在改变黄瓜白粉病抗性中的应用，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨丽，何秋雨，马明茹，蔡如深，李太彬，肖莉，王丹，陆柳蓉，别之龙，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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