一种用于组织切片中游离半胱氨酸(Cys)的衍生质谱成像方法技术

本发明专利技术公开一种用于组织切片中游离半胱氨酸(Cys)的衍生质谱成像方法，包括：步骤(1)对待测组织学样品进行冷冻切片处理，得到多个组织学切片；步骤(2)将步骤(1)中所得的组织学切片立即通过超音速喷雾装置喷涂衍生试剂(2‑((2‑氰基苯并噻唑‑6‑)胺基)‑N,N,N‑三甲基‑2‑乙酰‑1‑氯化铵)；步骤(3)将步骤(2)的组织学切片放在甲醇的雾室中进行有效衍生反应；步骤(4)将步骤(3)的组织学切片使用三氯甲烷清洗；步骤(5)将步骤(4)的组织学切片进行解吸电喷雾质谱成像(DESI‑MSI)实验，并采集得到对应的MSI数据。本发明专利技术的方法原位衍生化，可以在生理条件下有效地在组织切片中原位衍生；通过衍生反应增强的检测性能显著提高Cys的质谱分析性能；实现Cys的准确检测；不干扰其他非衍生代谢产物的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及物质检测领域，特别涉及一种用于组织切片中游离半胱氨酸(cys)的衍生质谱成像方法。

技术介绍

1、生物体内的氧化还原平衡主导着生物体内的各种生理病理过程，是诱发一系列严重疾病的重要因素。cys是生物体内维持氧化还原平衡的重要活性分子。近些年来，越来越多的研究表明cys的水平变化发生在神经退行性疾病的早期阶段，例如阿尔茨海默症(ad)、帕金森病(pd)，和癫痫等疾病。当下，全球有约5000万阿尔茨海默症患者，有超过5000万人受到癫痫疾病的影响。然而，不同的大脑区域受到影响，它们表现出的生化和病理生理特征各不相同。代谢网络极其复杂，且动态多变，代谢途径中的多种代谢物具有连动效应，同时检测多种代谢物能够提供更多真实有效信息。因此，检测多种cys和相关代谢物在不同的脑区中的分布状态和浓度变化水平，能够为相关疾病提供更加精确的诊断证明和治疗方案，具有重要的科学价值。

2、为了更好的理解并研究复杂的脑部疾病生理和病理过程，脑组织中cys的原位检测和其他相关代谢物的原位检测，一直以来都是亟待解决的研究问题。但是，目前关于疾病中cys的研究多集本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于组织切片中游离半胱氨酸(Cys)的衍生质谱成像方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中组织学样品进行冷冻切片处理步骤包括：取出冷冻的脑组织在-16～-24℃低温恒温箱放置30-60min后，使用OCT包埋试剂将脑组织固定后，在-16～-24℃低温恒温器中切片，将脑组织切成10～20μm厚度的切片，粘附在粘性显微镜载玻片上解冻；优选地，所述步骤(1)中组织学样品进行冷冻切片处理步骤包括：取出冷冻的脑组织在-20℃低温恒温箱放置30-60min后，使用OCT包埋试剂将脑组织固定后，在-20℃低温恒温器中切片，将脑组织...

【技术特征摘要】

1.一种用于组织切片中游离半胱氨酸(cys)的衍生质谱成像方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中组织学样品进行冷冻切片处理步骤包括：取出冷冻的脑组织在-16～-24℃低温恒温箱放置30-60min后，使用oct包埋试剂将脑组织固定后，在-16～-24℃低温恒温器中切片，将脑组织切成10～20μm厚度的切片，粘附在粘性显微镜载玻片上解冻；优选地，所述步骤(1)中组织学样品进行冷冻切片处理步骤包括：取出冷冻的脑组织在-20℃低温恒温箱放置30-60min后，使用oct包埋试剂将脑组织固定后，在-20℃低温恒温器中切片，将脑组织切成15μm厚度的切片，粘附在粘性显微镜载玻片上解冻。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中喷雾装置喷涂衍生试剂的步骤包括：用注射器以1～10μl min-1，ncbt溶液浓度为0.1～10mm；n2...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄美慧，谢继安，刘柏林，丁刚，田双双，
申请(专利权)人：安徽省疾病预防控制中心省健康教育所省公共卫生研究院，
类型：发明
国别省市：