一种快速区分鸡白痢沙门菌标准型/变异型菌株的荧光定量PCR检测试剂盒制造技术

技术编号:40947368 阅读:34 留言:0更新日期:2024-04-18 20:20
本发明专利技术公开了一种快速区分鸡白痢沙门菌标准型/变异型菌株的荧光定量PCR检测试剂盒,根据鸡白痢沙门菌标准型和变异型菌株转变关键酶SPUL_2404基因表达量的差异,设计并筛选出该基因的特异性荧光定量PCR引物,依据被检菌株SPUL_2404基因表达量与标准型菌株标准品SPUL_2404基因表达量的比值来判断被检菌株为标准型或变异型。该试剂盒检测反应灵敏度高、准确性强,摆脱了传统血清学鉴定方法敏感性低、主观性强的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于兽医微生物,具体涉及一种快速区分鸡白痢沙门菌标准型/变异型菌株的荧光定量pcr检测试剂盒。


技术介绍

1、鸡白痢是由鸡白痢沙门菌引起的一种急性传染病,以败血症和慢性隐性感染为主要特征,属于二类动物疫病。其多发于2-3周龄内的雏鸡,严重影响雏鸡的成活率,也是成年鸡减产的重要隐患之一。垂直传播和水平传播在鸡白痢的流行过程中均发挥着重要作用。感染鸡白痢沙门菌的种鸡所产的蛋带菌率高达33%,对种鸡及其所产的蛋有计划地进行检测、淘汰,切断垂直传播途径,是控制该病的关键所在。

2、鸡白痢沙门菌主要包含标准型和变异型这两种血清亚型,在开展鸡白痢诊断试剂研制或疫苗研究时,需要对鸡白痢沙门菌进行不同亚型的鉴别。目前鉴别鸡白痢沙门菌不同亚型的方法包括血清学分型、硫酸铵盐析分型和菌落形态特征分型。血清学分型方法操作相对简易,但该方法判断的主观性强,且需要消耗大量的o122、o123单因子血清,而血清的制备过程繁琐、质量不稳定且价格昂贵。硫酸铵盐析分型方法的结果判定采用肉眼观察浑浊度,其结果容易出现误差。菌落形态特征分型法通过观察菌落在特定培养基上的形态本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种快速区分鸡白痢沙门菌标准型/变异型菌株的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有SPUL_2404基因的荧光定量PCR引物和内参基因gapA的荧光定量PCR引物,鸡白痢沙门菌标准型菌株标准品和鸡白痢沙门菌变异型菌株标准品,阴性对照;所述SPUL_2404基因的荧光定量PCR引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示,所述内参基因gapA的荧光定量PCR引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和4所示,所述鸡白痢沙门菌标准型菌株标准品为CVCC519,所述鸡白痢沙门菌变异型菌株标准品为CVCC529,所述阴性对照为无菌水。

2.根据权利要求1所述的荧光...

【技术特征摘要】

1.一种快速区分鸡白痢沙门菌标准型/变异型菌株的荧光定量pcr检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有spul_2404基因的荧光定量pcr引物和内参基因gapa的荧光定量pcr引物,鸡白痢沙门菌标准型菌株标准品和鸡白痢沙门菌变异型菌株标准品,阴性对照;所述spul_2404基因的荧光定量pcr引物的核苷酸序列如seq id no.1和2所示,所述内参基因gapa的荧光定量pcr引物的核苷酸序列如seq id no.3和4所示,所述鸡白痢沙门菌标准型菌株标准品为cvcc519,所述鸡白痢沙门菌变异型菌株标准品为cvcc529,所述阴性对照为无菌水。

2.根据权利要求1所述的荧光定量pcr...

【专利技术属性】
技术研发人员:张文婷张腾飞程伊洛罗青平温国元卢琴汪宏才张蓉蓉郭云清商雨曾哲胡巧姚伦邵华斌
申请(专利权)人:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
类型:发明
国别省市:

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