雪胆细胞色素氧化酶转基因酵母工程菌在制备葫芦素中间体中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因，所述基因的序列如SEQNO：1所示。本发明专利技术构建了共转染雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19和HcCYP81Q58的转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16a,20,25‑tetrol(6)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16α,20,25‑tetrol(6b)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑16α,20,25‑triol‑3‑one(6a)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑16α,20,23‑triol‑3‑one(6c)，为葫芦素生产提供了来源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术，具体涉及一种雪胆细胞色素氧化酶hccyp87d19基因及其转基因工程菌在制备葫芦素中间体中的应用。

技术介绍

1、葫芦素是一种高度氧化、以葫芦烷为基本骨架的四环三萜类化合物，药用价值很高，尤其是在抗肿瘤方面。尽管其具有高效的抗肿瘤活性，低治疗指数和非特异性，但毒性极大地阻碍了葫芦素的临床应用和生物学研究，且三萜类成分的结构相对复杂,在植物中含量较低且常以多种结构相近的成分混合存在，难以通过提取分离或化学合成方法获得。只有少部分的葫芦素被开发为药物(cub、雪胆甲素等)，更重要的是，通过对其骨架修饰合成葫芦素三萜的完整生物合成途径仍然是不清楚的，这种生产途径的缺乏限制了这一高度氧化化合物的临床候选药物的效用和生物学研究。研究表明葫芦素制剂中的杂质可能是导致毒性的原因。因此，基于阐明生物合成途径的合成生物学策略似乎是一种更有前途、可持续和替代的方法。

2、合成生物学在生产药效单体中发挥着重要的作用，利用合成生物学实现葫芦素单体的异源合成是最重要的策略之一。近年来，越来越多的药用活性成分在在微生物中成功实现了生物合成，如紫杉醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因，其特征在于，所述基因的序列如SEQ NO：1所示。

2.如权利要求1所述的雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因在制备葫芦素中间体中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用为将雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因和HCCYP81Q58基因共转染到基因工程菌中。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述葫芦素中间体包括11-Carbonyl-cucurbita-5,23-diene-3β,16a,20,25-tetrol(6)、11-Carbonyl-cucurbita-...

【技术特征摘要】

1.一种雪胆细胞色素氧化酶hccyp87d19基因，其特征在于，所述基因的序列如seq no：1所示。

2.如权利要求1所述的雪胆细胞色素氧化酶hccyp87d19基因在制备葫芦素中间体中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用为将雪胆细胞色素氧化酶hccyp87d19基因和hccyp81q58基因共转染到基因工程菌中。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述葫芦素中间体包括11-carbonyl-cucurbita-5,23-diene-3β,16a,20,25-tetrol(6)、11-carbonyl-cucurbita-5,23-diene-3β,16α,20,25-tetrol(6b)、11-carbonyl-cucurbita-5,23-diene-16α,20,25-triol-3-one(6a)、11-carbonyl-cucurbita-5,24-diene-16α,20,23...

【专利技术属性】
技术研发人员：张广辉，黄春丽，杨生超，郝冰，陈庚，舒彦宇，李志远，冯孝林，和四梅，卢迎春，马骁，马飞飞，郭振宇，马迪娜，张建丽，贺雪颖，刘勤勤，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：