一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法技术

本发明专利技术涉及一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法，属于生物技术领域。本发明专利技术挖掘解脂耶氏酵母中天麻素降解相关基因，对解脂耶氏酵母中的20种葡萄糖苷酶进行了表征，探究敲除不同的葡萄糖苷酶基因对天麻素产量的影响，发现敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g后天麻素降解解除。本发明专利技术还构建了一株天麻素降解解除的重组解脂耶氏酵母菌株YliGT6，对解脂耶氏酵母出发菌株进行构建天麻素代谢通路，增强UDP‑葡萄糖供给等操作，最后敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g，所得重组菌株YliGT6天麻素滴度达到6.0g/L。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其是指一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法。

技术介绍

1、天麻素，也称4-羟甲基苯基-β-d-吡喃葡萄糖苷，是我国著名中药材天麻的主要生物活性成分，具有较好的镇静和安眠作用，能缓解神经衰弱、失眠、头痛等症状，被广泛用于临床治疗。同时，天麻素还具有改善记忆、抗炎、抗氧化等功能，具有良好的市场和应用前景。目前，工业上天麻素的生产方法主要有化学合成法和植物提取法。化学合成法是以葡萄糖、对甲酚、醋酸酐等为前体通过一系列化学反应合成天麻素，然而该方法存在环境污染严重、难纯化、成本高等问题。植物提取法是从天麻根茎中萃取获得天麻素，但是天麻根茎中天麻素含量极低(小于0.7％)，且植物提取法具有不可持续、资源有限、受季节等环境因素影响大等缺陷，同时当前的农业育种和种植技术也不足以增加天麻的供应。

2、微生物由于生长迅速，培养条件简单，具备强大的生产能力，能够利用可再生的资源高效转化生产高价值化学品和各种天然产物。此外，经过理性设计的工程菌株能合成单一目标产物，减少了多种结构类似物的合成，可以避免植物提取过程中目标产物分离纯化困难的问本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产天麻素的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：出发菌株为解耶氏酵母po1f。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述解脂耶氏酵母酵母po1f敲除Ku70基因。

4.一种高产天麻素的重组解脂耶氏酵母，其特征在于：由权利要求1-2任一方法制备得到。

5.一种包含权利要求4所述重组解脂耶氏酵母的微生物制剂。

6.一种产天麻素的方法，其特征在于：将如权利要求4所述的重组解脂耶氏酵母或权利要求5所述的微生物制剂加入发酵体系中。>

7.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种高产天麻素的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：出发菌株为解耶氏酵母po1f。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述解脂耶氏酵母酵母po1f敲除ku70基因。

4.一种高产天麻素的重组解脂耶氏酵母，其特征在于：由权利要求1-2任一方法制备得到。

5.一种包含权利要求4所述重组解脂耶氏酵母的微生物制剂。

6.一种产天麻素的方法，其特征在于：将如权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾洋，江雅儒，胡梦晨，王心驰，薛锋，黄和，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：