一种单个细胞外囊泡水凝胶液滴的制备方法及其应用技术

本申请提供一种单个细胞外囊泡水凝胶液滴的制备方法及其应用，涉及生物医药技术领域。该制备方法，包括以下步骤：将含有细胞外囊泡的水相溶液注入尖端毛细管，所述尖端毛细管在振动下在其管口形成水相液滴；所述水相液滴滴入盛有油相的容器中，形成油包水液滴；所述油包水液滴凝胶化，形成单个细胞外囊泡水凝胶液滴；其中，水相溶液包括四臂‑聚乙二醇‑丙烯酸酯和双巯基聚乙二醇，油相包括有机硅类乳化剂和矿物油。该制备方法可以精确分析单个细胞外囊泡的DNA货物，具有单分子灵敏度和绝对DNA定量的能力，能够评估不同EV种群中EV‑DNA的含量、结构和性质，实现在单个细胞外囊泡层面深入表征EV‑DNA的生物物理特性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，特别涉及一种单个细胞外囊泡水凝胶液滴的制备方法及其应用。

技术介绍

1、细胞外囊泡(extracellular vesicle，evs)是一种直径从40nm到1000nm不等的异质性膜封闭囊泡。无论在正常生理或病理状态下，几乎所有类型的活细胞都会主动脱落evs，并大量存在于所有的体液中。evs携带多种成分，例如蛋白质、脂质、rna和dna等，通过从亲代细胞转移这些生物活性分子到受体细胞，evs成为细胞间通讯的重要媒介。然而，evs的高度异质性阻碍了对其生物发生、分子组成、生物分布和功能的了解。解决evs的异质性问题对于阐明其机理以及设计诊断和治疗工具至关重要。目前多数研究都关注在evs相关蛋白质和evs-rna的检测分析上，但对evs中的dna货物的研究较少。

2、evs携带了不同类型的dna，包括染色体dna和线粒体dna。多个研究已经证实了evs相关dna既附着在evs的膜表面，也被包裹在evs的管腔中。ev-dna在维持细胞稳态、调节免疫反应和肿瘤发展中发挥着至关重要的作用。肿瘤来源的evs携带的dna片段覆盖了亲本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种单个细胞外囊泡水凝胶液滴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述单个细胞外囊泡水凝胶液滴的直径介于20μm～40μm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯与所述双巯基聚乙二醇的摩尔比为1：(1～4)。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水相溶液中，所述四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯和所述双巯基聚乙二醇的含量介于3％(w/v)～10％(w/v)。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有机硅类乳化剂为Gransurf 90。...

【技术特征摘要】

1.一种单个细胞外囊泡水凝胶液滴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述单个细胞外囊泡水凝胶液滴的直径介于20μm～40μm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯与所述双巯基聚乙二醇的摩尔比为1：(1～4)。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水相溶液中，所述四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯和所述双巯基聚乙二醇的含量介于3％(w/v)～10％(w/v)。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有机硅类乳化剂为gransurf 90。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述细胞外囊泡在加入水相溶液之前包括纯化的步骤，所述纯化的方式选自超速离心、超滤和尺寸排阻色谱法中的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘武，焦玉凤，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：