信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途及其试剂盒制造技术

技术编号：40879121 阅读：2 留言：0更新日期：2024-04-08 16:49

本发明专利技术公开了信号肽‑CUB‑表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，并提供一种促进血管生成的试剂盒，包括有信号肽‑CUB‑表皮生长因子样结构域蛋白3，内皮细胞培养基、胎牛血清、双抗药，可作为促进内皮细胞成血管分化的生长因子，能够显著提高内皮细胞成血管分化的效率，为促进血管生成提供了新的研究方向。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物试剂应用领域，具体涉及信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3应用领域。

技术介绍

1、信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3(scube3)，是表皮生长因子超家族成员之一，拥有部分表皮生长因子超家族成员的共性，其结构包括1个氨基端的信号肽序列，9个串联排列的表皮生长因子样重复序列，1个氨基糖基化的间隔区，3个富含半胱氨酸的结构域和1个羧基端的cub样结构域，其具有膜栓型和分泌型两种形式，其双重信号功能反应了它的多种生物学作用及应用价值。现有技术只公开了在头发再生的研究内容。

2、现有专利申请号:cn202110866634.5，名称：信号肽相关序列及其在蛋白质合成中的应用，提供了具有提高蛋白表达效果的信号肽及其编码序列，将信号肽编码序列与外源蛋白的编码序列可操作的相连形成的核酸构建物，可显著提高外源蛋白合成的效率，并简化目标外源蛋白的表达与纯化过程，还提供基因工程细胞、试剂盒，从而能够应用于蛋白质合成中。但没有公开在促进血管生成领域的应用和制备相关试剂盒。

3、scube3可作为辅助受体也可作为配体，通过其特殊的cub样结构与多种受体结合形成蛋白复合物，激活或拮抗多条信号并发挥相应的生物学功能。在调控胚胎发育和生理病理过程中扮演重要角色。但目前现有技术没有公开信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3应用在血管生成领域，比如促进人脐静脉内皮细胞的血管生成。因此，探究如何诱导血管内皮细胞出芽从而实现原位血管生成有着重要的现实意义。

技术实现思路</p>

1、为说明信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成中的新应用领域前景，本专利技术公开了信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途及其试剂盒。具体说明信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子促进内皮细胞的血管生成，有独特显著的作用。

2、首先本专利技术公开信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，是信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子在血管生成领域应用。

3、具体的，所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子促进内皮细胞成血管分化，从而促进血管生成。

4、作为一种实施方式，所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为促进人脐静脉内皮细胞的血管生成的生长因子，促进血管内皮细胞出芽从而实现原位血管生成。

5、然后本专利技术还提供一种促进血管生成的试剂盒，包括有信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3，作为生长因子促进血管生成。作为一种实施方式，在试剂盒中，所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为促进内皮细胞的血管生成的生长因子。

6、优选的，所述试剂盒还包括有：内皮细胞培养基、胎牛血清。更优选的，还包括双抗药。

7、所述试剂盒具体包括有体积比的成分：

8、信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3 1-5‰

9、胎牛血清 5-10％

10、内皮细胞培养基 92-95％。

11、优选的，上述试剂盒还包括体积比的成分：

12、双抗药 1％。

13、作为一种实施方式，所述试剂盒包括有体积比的成分：

14、

15、优选的，所述内皮细胞培养基为ecm培养基；所述双抗药为青链霉素混合液，或者为抗生素、抗真菌药。

16、本专利技术还提供了一种促进血管生成的试剂盒的制备方法，将胎牛血清和信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3，加入内皮细胞培养基中，摇晃混匀后，用小孔径的过滤器过滤后，放在冰箱冷藏保存制得。

17、优选的，一种促进血管生成试剂盒的制备方法，按各成分的体积比逐一将5-10％胎牛血清，1％的双抗药，1-5‰的信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3，加入到92-95％的内皮细胞培养基中，摇晃混匀后，用小孔径的过滤器过滤后，放在冰箱冷藏保存制得。

18、本专利方案的优点在于：

19、(1)本专利技术人团队发现信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3(scube3)作为生长因子有促进血管生成作用，通过小鼠主动脉环出芽实验检测scube3对血管内皮细胞出芽能力的效果，发现了信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途。本专利技术方案的体外实验显示它能显著促进人脐静脉内皮细胞的成管能力，还促进血管相关分子及内皮细胞标志物基因和蛋白水平的表达以及增殖和迁移能力，从而促进血管生成。

20、(2)本专利技术提供的一种促进血管生成的试剂盒，包括有信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3，作为促进血管生成的生长因子，能够显著提高内皮细胞的血管生成的效率，能够显著促进血管出芽，对实现原位血管生成有着重要的现实意义。

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【技术保护点】

1.信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子在血管生成领域的应用。

2.根据权利要求1所述信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：所述信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子促进内皮细胞成血管分化，从而促进血管生成。

3.根据权利要求1或2所述信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：所述信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3作为促进人脐静脉内皮细胞的血管生成的生长因子，能够促进血管内皮细胞出芽。

4.一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：包括有信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3，作为生长因子促进血管生成。

5.根据权利要求4所述一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：还包括有：

6.根据权利要求4或5所述一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：包括有体积比的成分：

7.根据权利要求6所述一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：还包括体积比的成分：

8.根据权利要求7所述一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：包括有体积比的成分：

9.一种促进血管生成的试剂盒的制备方法，其特征在于：将胎牛血清和信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3，加入内皮细胞培养基中，摇晃混匀后，用小孔径的过滤器过滤后，放在冰箱冷藏保存制得。

10.根据权利要求9所述一种促进血管生成的试剂盒的制备方法，按各成分的体积比逐一将5-10％胎牛血清，1％的双抗药，1-5‰的信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白3，加入到92-95％的内皮细胞培养基中，摇晃混匀后，用小孔径的过滤器过滤后，放在冰箱冷藏保存制得。

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【技术特征摘要】

1.信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子在血管生成领域的应用。

2.根据权利要求1所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为生长因子促进内皮细胞成血管分化，从而促进血管生成。

3.根据权利要求1或2所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3在血管生成领域的新用途，其特征在于：所述信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3作为促进人脐静脉内皮细胞的血管生成的生长因子，能够促进血管内皮细胞出芽。

4.一种促进血管生成的试剂盒，其特征在于：包括有信号肽-cub-表皮生长因子样结构域蛋白3，作为生长因子促进血管生成。

5.根据权利要求4所述一种促进血管生成的试...

【专利技术属性】
技术研发人员：田智慧，刘习强，陈楚滢，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人