一种亚磷酰胺单体纯度检测方法技术

本发明专利技术公开了一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，属于色谱分析技术领域，该方法包括如下步骤：S1、制备供试品溶液；S2、色谱检测：流动相A为1.5mM氯化钠水溶液；流动相B为乙腈；进行梯度程序：0‑24.99min保持流动相A：流动相B＝60：40；25.00‑30.00min保持流动相A：流动相B＝5：95；30.1‑40min保持流动相A：流动相B＝60：40。本发明专利技术所提供的高效液相色谱法，用于亚磷酰胺单体有关物质和纯度检测。本发明专利技术使用的流动相中流动相A为1.5mM氯化钠水溶液；流动相B为乙腈检测成本低，并且检测流动性相对仪器损伤小，易于维护，且分离度满足要求，准确度高，检测效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于色谱分析，具体涉及一种亚磷酰胺单体纯度检测方法。

技术介绍

1、亚磷酰胺单体是合成基因的必需品，主要包括dna系列和rna系列以及他们的衍生物，现代的寡核苷酸合成主要采用可自动化的亚磷酰胺固相合成技术，每一步的合成产率极限可以达到99.6％。尽管如此，随着寡核苷酸链长的增加，杂质含量也会增加，产生的杂质主要来自合成及脱保护过程中产生的小分子、每一步偶联反应不完全造成的失败序列、盖帽不完全造成的缺失序列以及多重偶联造成的插入序列等，其中，失败序列是最主要的杂质；因此原料的纯度检测对于基因合成必需品的制备非常重要。现有技术中使用高效液相色谱的方法进行分析时，使用的流动相中加入了碳酸氢铵，检测成本高，且主峰和杂质后之间的分离度不好，准确度较低。亚磷酰胺单体的检测效果较差。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，以解决亚磷酰胺单体纯度检测准确性较差的问题。

2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，包括如下本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，进样量3μL，柱温30℃，流速1.0mL/min，波长255nm。

3.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，供试品溶液通过如下步骤配制：

4.根据权利要求3所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，10mg供试品稀释至10mL。

5.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，供试品包括2'-OMeC(Ac)-COA、2'-OMeG(iBu)-COA、2'-OMeU...

【技术特征摘要】

1.一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，进样量3μl，柱温30℃，流速1.0ml/min，波长255nm。

3.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，供试品溶液通过如下步骤配制：

4.根据权利要求3所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，10mg供试品稀释至10ml。

5.根据权利要求1所述的一种亚磷酰胺单体纯度检测方法，其特征在于，供试品包括2'-omec(ac)-coa、2'-omeg(ibu)-coa、2'-omeu-coa、2'-omea(...

【专利技术属性】
技术研发人员：雍金贵，刘宗文，刘奇，高恩，钱鑫，
申请(专利权)人：安徽瑞拜药业有限公司，
类型：发明
国别省市：