【技术实现步骤摘要】
本申请属于酶工程，尤其涉及一种胺脱氢酶突变体及其应用。
技术介绍
1、手性纯胺是当前药物生产中重要的前体物质，目前α-手性胺约占商品化的单一对映体旋光药物的40％，这些胺的主要生产方式是通过预先形成的n-取代亚胺等进行不对称氢化反应合成。然而，这种策略因需要多个化学步骤而缺乏效率，尽管近年来在有机金属催化(例如，使用铱、钌或钯催化剂)和有机催化中，含羰基化合物的不对称还原胺化已取得了重大进展，但许多酶促途径提供了更高效的原子效率方法，特别是用于合成纯净形式对映体的活性药物成分(api)。
2、胺脱氢酶(amdhs)能够催化酮的不对称还原胺化反应，且反应副产物为水，无需担心痕量有毒重金属的存在，因此，其在手性胺的酶催化合成中受到了广泛关注。大多数的野生型胺脱氢酶由于对酮类及羰基底物的还原胺化活性均不高，其酶结构并未得到测定。ye等人以红球菌属的苯丙氨酸脱氢酶(phedh)为起点，根据对酶结构特点的研究最终构建了两种具有高催化活性的胺脱氢酶，k66q/n262c(dm_phedh)和k66q/s149g/n262c(tm_phedh)，从而成为当前酮的不对称还原胺化反应中催化活性较高的胺脱氢酶。
3、(r)-1-甲基-3-苯丙胺是生产治疗高血压药物拉贝洛尔、地瓦洛尔等的中间体，是药物化学中重要的中间体成分。其当前主要的工业生产方式及实验室制备是通过水解酶进行动力学拆分或通过单胺氧化酶进行脱硝，使用外消旋体生产手性纯胺，但其理论上的最大产出率仅为50％。
技术实现思路
...【技术保护点】
1.一种胺脱氢酶突变体，其特征在于，所述胺脱氢酶突变体的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因编码如权利要求1所述的胺脱氢酶突变体。
3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因含有编码所述胺脱氢酶突变体的核苷酸序列，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体表达权利要求1所述的胺脱氢酶突变体。
5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为重组质粒，所述重组质粒含有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
6.一种含有权利要求4-5任一项所述的重组表达载体的转化体。
7.一种生产α-手性胺的方法，其特征在于，利用权利要求1所述胺脱氢酶突变体催化酮基底物进行不对称还原胺化反应，得到α-手性胺。
8.如权利要求7所述的生产α-手性胺的方法，其特征在于，所述胺脱氢酶突变体在所述不对称还原胺化反应中的添加量为90～110mg/L；和/或，
9.如权利要求7所述的
10.如权利要求1所述的胺脱氢酶突变体、如权利要求2或3所述的编码基因、如权利要求4或5所述的重组表达载体、或如权利要求6所述的转化体的下述任一应用：
...【技术特征摘要】
1.一种胺脱氢酶突变体，其特征在于，所述胺脱氢酶突变体的氨基酸序列如seq idno.1所示。
2.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因编码如权利要求1所述的胺脱氢酶突变体。
3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因含有编码所述胺脱氢酶突变体的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq id no.2所示。
4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体表达权利要求1所述的胺脱氢酶突变体。
5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为重组质粒，所述重组质粒含有如seq id no.2所示的核苷酸序列。
6.一种含...
【专利技术属性】
技术研发人员：李智，杨海泉，陈献忠，曲金丰，
申请(专利权)人：新加坡国立大学，
类型：发明
国别省市：
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