【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于干细胞增殖领域，尤其涉及一种骨髓间充质干细胞的增殖方法。
技术介绍
1、骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，bmscs)是传统干细胞的一种，在骨髓中含量最多，具有自我更新、多向分化的特点，免疫排斥反应弱；骨髓间充质干细胞可向成骨细胞、成软骨细胞等多种细胞分化，因而被广泛用于细胞介导的抗肿瘤基因治疗、造血干细胞移植、组织损伤修复和自身免疫性疾病等多个领域。
2、我国作为核桃生产大国，种植面积、产量均居世界第一。我国核桃的主要栽培区域为云贵地区、西北地区和华北地区，核桃壳中含有多类有效的活性成分，但对其生物活性的利用却甚少，在细胞增殖方面的研究甚少，尤其是在干细胞培养方面还未见报道。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术旨在提出一种骨髓间充质干细胞的增殖方法。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
2、一种骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，所述增殖方法包括在基础培养基中加入核桃壳提取物。
3、进一步的，所述核桃壳提取物的添加量为50mg/l-200mg/l。
4、进一步的，所述核桃壳提取物的添加量为150mg/l。
5、进一步的，所述增殖方法包括：
6、1)制备大鼠骨髓间充质干细胞，在5％的co2条件下，36℃～37℃恒温培养，然后传代；
7、2)取第3代大鼠骨髓间充质干细胞，调整细胞浓度为1×107个/l，然后加入终浓度为5
8、3)然后再加入cck-8试剂，于co2孵箱中避光孵育3h，检测大鼠骨髓间充质干细胞的增殖情况。
9、进一步的，步骤2)所述核桃壳提取物是用含体积分数为10％胎牛血清的α-mem培养液进行稀释。
10、一种核桃壳提取物在骨髓间充质干细胞增殖中的应用。
11、相对于现有技术，本专利技术所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，具有以下优势：
12、核桃壳提取物对于大鼠骨髓间充质干细胞有增殖作用，核桃壳取材成本低，提取物的大规模生产简单易操作，为骨髓间充质干细胞的体外增殖提供了新途径。
13、核桃果实主要包括果皮、核桃壳、果仁及核桃隔膜。其中，果皮为核桃的未成熟外果皮，具有显著的抗肿瘤活性，已被制成中药复方制剂在临床上用于治疗胃癌等疾病；核桃壳是核桃取仁后的坚硬外壳，民间用于治疗口腔溃疡，胃溃疡等；核桃仁具有抗氧化、抗衰老、健脑益智的功效；核桃隔膜具有补肾涩精功效，临床上主要用于治疗肾虚遗精、遗尿、淋病、带下等多种疾病。
14、在核桃壳提取的化学成分中，黄酮类化合物是一类具有c6-c3-c6结构的化合物，具有抗氧化、抗炎、抗菌及抗病毒活性等多种活性。
15、有研究显示现核桃壳提取物对绿脓杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌和白色念珠菌均有抑制作用。
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1.一种骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述增殖方法包括在基础培养基中加入核桃壳提取物。
2.根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述核桃壳提取物的添加量为50mg/L-200mg/L。
3.根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述核桃壳提取物的添加量为150mg/L。
4.根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于，所述增殖方法包括：
5.根据权利要求4所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于，步骤2)所述核桃壳提取物是用含体积分数为10％胎牛血清的α-MEM培养液进行稀释。
6.一种核桃壳提取物在骨髓间充质干细胞增殖中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述增殖方法包括在基础培养基中加入核桃壳提取物。
2.根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述核桃壳提取物的添加量为50mg/l-200mg/l。
3.根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞的体外增殖方法，其特征在于：所述核桃壳提取物的添加量为...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋芸娟，
申请(专利权)人：奥启深圳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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