【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及干细胞培养，涉及iox4在人脐带间充质干细胞培养中的应用，具体涉及iox4处理的人脐带间充质干细胞来源的外泌体，以及该外泌体在延缓细胞衰老中的应用。
技术介绍
1、人类皮肤的衰老经历一个复杂的过程，主要是由内在机制和外在影响的相互作用导致。皮肤衰老是从表皮层到真皮层的衰老，比如角质形成细胞增殖能力减退、成纤维细胞功能异常、乳头层变平、细胞外基质成分及含量的变化等是内外源性皮肤老化共同的病理生理改变。内源性老化表现为皮肤干燥、出现细纹、胶原纤维和弹性纤维减少以及皮下脂肪变薄，这是正常皮肤老化，随着年龄增长自然发生；外源性老化表现为皮肤干燥、出现大皱纹、皮肤松弛、弹性下降、粗糙、色素不均匀，这归因于环境因素，尤其是紫外线。简而言之，整个皮肤衰老的原因通常归于基因变异，端粒异常，蛋白质和细胞损伤增加，炎症，细胞衰老，内源性干细胞耗尽等问题。
2、随着社会的发展，护肤品和消费者都在不断的进步，而变老却是每个人不可避免的过程，工作生活等各方面的压力，环境、饮食因素等导致脸上过早出现细纹松弛等问题。从理论机制上讲，实现抗皮肤老化的可能途径有促进角质形成细胞的迁移和增殖、促进成纤维细胞增殖、抑制基质金属蛋白酶(mmps)活性和减少皮肤氧化应激反应等。
3、外泌体(exosome,exo)是一类直径为40-100nm的细微囊泡，能够将脂质、糖分、蛋白、mrna、mirna和dna等生物分子从一个细胞传送到另一个细胞，进而互换遗传物质、重程序编写寄主细胞，开展细胞间通信。干细胞外泌体是来自干细胞的一种细胞分泌
4、外泌体不仅参与皮肤生理、病理过程，如调节皮肤微环境中促炎细胞因子分泌，促进皮肤缺损处血管新生及胶原沉积，以及调节皮肤成纤维细胞增殖分化，同时还在皮肤微环境发生病变时发挥特异性信息传递作用。此外，外泌体并不是成熟细胞，进入人体后不会面临排斥的风险。外泌体美容操作简单，通过微针、仪器导入，将外泌体送达皮肤真皮层，就能起到淡斑，除皱，美白，舒敏，抗衰老的作用。
5、iox4是一种选择性phd2抑制剂，能够抑制细胞内hif-1α的降解，继而使细胞核内很多下游基因(如epo、vegf、ang1和glut-1等)的转录和表达增高，继而发挥其抗凋亡、促生存和促血管新生等保护性作用。本专利通过在脐带间充质干细胞培养基中添加iox4，改善了外泌体抗衰的作用。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于对iox4改善外泌体抗衰的作用进行探索。实验结果证实，添加iox4并未对获取的外泌体的形态产生影响同时增加了外泌体的生成量；培养基中添加iox4收获的外泌体，p16和p21的相对表达量更低，在细胞衰老模型中缓解细胞衰老效果更佳。
2、为了实现该目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、本专利技术第一方面，提供了一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体，该人脐带间充质干细胞的培养基中添加有iox4。
4、其中，iox4的终浓度为10～100μmol/l，优选40～60μmol/l；培养基包括体积比为89:10:1的dmem低糖基础培养基、人源原代细胞专用胎牛血清以及青-链霉素。
5、本专利技术第二方面，提供了iox4在作为人脐带间充质干细胞来源的外泌体生成促进剂中的应用。添加iox4作为培养基成分培养细胞后收获的外泌体数量远多于传统组培养细胞后收取外泌体的数量。
6、本专利技术第三方面，提供了人脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备细胞抗衰剂中的用途。实验结果证实，培养基中添加iox4收获的外泌体，在细胞衰老模型中，缓解细胞衰老效果更佳，提示培养基中添加iox4收获的外泌体可以改善过氧化氢诱导细胞衰老效果。
7、本专利技术第四方面，提供了一种细胞抗衰剂，包括活性组分以及化妆品学上可接受的辅料，所述活性组分包含上述任一项所述的外泌体。将其制成产品，缓解细胞衰老。
8、本专利技术第五方面，提供了一种生成人脐带间充质干细胞来源的外泌体的方法，具有如下技术特征：在人脐带间充质干细胞培养基中添加浓度为40～60μmol/l的iox4。
9、本专利技术第六方面，提供了一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体生成试剂盒，包含上述所述的人脐带间充质干细胞培养基以及外泌体的扩增培养基。该试剂盒内还可包含细胞培养过程中所用的其他试剂及用品。
10、本专利技术的有益保障及效果：
11、本专利技术针对现有技术的不足和实际需求，提供了一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体及其制备方法，进行体外培养时，将iox4直接添加在干细胞培养基中即可。培养基配方简洁，成本低廉，可快速进行配制。
12、效果方面，添加iox4并未对获取的外泌体的形态产生影响同时增加了外泌体的生成量；培养基中添加iox4收获的外泌体，其p16和p21的相对表达量较传统组更低，在细胞衰老模型中缓解细胞衰老效果也更佳。
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1.一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体，其特征在于，该人脐带间充质干细胞的培养基中添加有IOX4。
2.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：IOX4的终浓度为10～100μmol/L。
3.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：所述IOX4的终浓度为40～60μmol/L。
4.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：
5.IOX4在作为人脐带间充质干细胞来源的外泌体生成促进剂中的应用。
6.权利要求1所述的人脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备细胞抗衰剂中的用途。
7.一种细胞抗衰剂，其特征在于，包括活性组分以及化妆品学上可接受的辅料，所述活性组分包含权利要求1～4任一项所述的外泌体。
8.一种生成人脐带间充质干细胞来源的外泌体的方法，其特征在于，在人脐带间充质干细胞培养基中添加浓度为40～60μmol/L的IOX4。
9.一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体生成试剂盒，其特征在于，包含权利要求4所述的人脐带间充质干细胞培养基以及外泌体扩增培养基。
【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体，其特征在于，该人脐带间充质干细胞的培养基中添加有iox4。
2.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：iox4的终浓度为10～100μmol/l。
3.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：所述iox4的终浓度为40～60μmol/l。
4.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：
5.iox4在作为人脐带间充质干细胞来源的外泌体生成促进剂中的应用。
6.权利要求1所述的人...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜玉芳，张瑷麟，袁亚林，刘璐，叶凌涛，孙丹丹，
申请(专利权)人：恒峰铭成生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：
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