【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及干细胞培养，具体涉及iox4在人脐带间充质干细胞培养中的应用，尤其在抗人脐带间充质干细胞衰老中的应用，还涉及含有该添加因子的人脐带间充质干细胞培养基。
技术介绍
1、2000年，中国65岁及以上人口比重达到7％，根据联合国有关人口老龄化的定义，中国老年型人口结构初步形成，开始步入老龄化社会，人口老龄化的影响主要包括劳动力减少、基本养老保险支出总额增加和医疗问题。因此，激活衰老的干细胞是延缓个体衰老、预防神经退行性疾病、代谢性疾病和各种恶性肿瘤等衰老相关疾病的有效措施，能够最大限度地提升老龄人口的生命质量。
2、干细胞是一类具有自我更新能力与多向分化潜能的重要细胞群体，在阿尔茨海默症、帕金森症等研究领域干细胞转化医学的研究已经取得了丰硕的成果。其中人脐带间充质干细胞(mesnchymal stem cells，mscs)能分化成许多种组织细胞，脐带来源的间充质干细胞因易于获取、不对捐赠者造成额外创伤、自我再生能力强等特性，被广泛应用于组织修复与再生、免疫调控、抗肿瘤治疗等领域，因此，作为一种新型治疗用干细胞，脐带间充质干细胞具有广阔的临床应用前景。
3、但在临床应用中仍面临挑战，如治疗需要大量干细胞、干细胞质量不均一、移植后存活能力低，旁分泌能力下降等。因此干细胞疗法的首要任务是在体外培养生产获得足够数量和均一性的年轻态干细胞，同时迫切需要提供一种延缓mscs衰老的方法，以克服当前实际应用中的不足。
4、iox4是一种有效的、选择性的hif prolyl-hydroxylase 2
5、目前，关于iox4对人脐带间充质干细胞培养过程中延缓其衰老的作用尚未见相关报道。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于对iox4在延缓人脐带间充质干细胞衰老中的应用进行探索。实验结果证实iox4的添加可以延缓人脐带间充质干细胞的衰老，干细胞更容易分化为其他细胞。
2、本专利技术第一方面，提供了iox4在作为人脐带间充质干细胞衰老延缓剂中的应用。iox4被添加在人脐带间充质干细胞培养基中，终浓度为10～100μmol/l，优选为40～60μmol/l。
3、本专利技术第二方面，提供了一种人脐带间充质干细胞培养基，包括培养基主体以及添加因子iox4。其中，iox4的终浓度为40～60μmol/l。
4、其中，培养基主体可通过商业途径购买得到，包括体积比为89:10:1的dmem低糖基础培养基、人源原代细胞专用胎牛血清以及青-链霉素。
5、本专利技术第三方面，提供了一种人脐带间充质干细胞培养试剂盒，包含上述所述的人脐带间充质干细胞培养基。
6、本专利技术第四方面，提供了上述所述的人脐带间充质干细胞培养基在体外培养人脐带间充质干细胞中的应用。
7、本专利技术第五方面，提供了一种延缓人脐带间充质干细胞衰老的方法，其特征在于，在人脐带间充质干细胞中添加浓度为40～60μmol/l的iox4。
8、本专利技术第六方面，提供了人脐带间充质干细胞体外培养方法，采用上述所述的人脐带间充质干细胞培养基进行培养，培养时间为3～7天。
9、本专利技术第七方面，提供了一种人脐带间充质干细胞体外培养系统，包括：分离装置，用于从新鲜脐带中分离得到人脐带间充质干细胞并进行传代培养；培养装置，设置上述所述的人脐带间充质干细胞培养基，对人脐带间充质干细胞进行培养。
10、本专利技术第八方面，提供了一种体外延缓人脐带间充质干细胞衰老的方法，在人脐带间充质干细胞培养基中添加浓度为40～60μmol/l的iox4。同时，本专利技术还提供了采用该方法制备得到的人脐带间充质干细胞。
11、本专利技术的有益保障及效果：
12、本专利技术针对现有技术的不足和实际需求，提供了诱导剂iox4在干细胞体外培养中的应用。进行体外培养时，将iox4直接添加在培养基中即可。培养基配方简洁，成本低廉，可快速进行配制。
13、效果方面，iox4能够降低衰老因子p53、p21的相对表达量，将细胞的g2期和s期由9.4％增长至14.1％，同时更容易成骨或成脂的诱导分化，证实iox4的添加可以延缓人脐带间充质干细胞的衰老。
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1.IOX4在作为人脐带间充质干细胞衰老延缓剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：IOX4被添加在人脐带间充质干细胞培养基中，终浓度为10～100μmol/L。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述IOX4的终浓度为40～60μmol/L。
4.一种体外延缓人脐带间充质干细胞衰老的方法，其特征在于，在人脐带间充质干细胞培养基中添加浓度为40～60μmol/L的IOX4。
5.根据权利要求4所述的方法培养得到的人脐带间充质干细胞。
6.一种人脐带间充质干细胞培养基，其特征在于，包括培养基主体以及添加因子IOX4，
7.一种人脐带间充质干细胞培养试剂盒，其特征在于，包含权利要求6所述的人脐带间充质干细胞培养基。
8.人脐带间充质干细胞体外培养方法，其特征在于，采用权利要求6任一项所述的人脐带间充质干细胞培养基进行培养。
9.一种人脐带间充质干细胞体外培养系统，其特征在于，包括：
【技术特征摘要】
1.iox4在作为人脐带间充质干细胞衰老延缓剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：iox4被添加在人脐带间充质干细胞培养基中，终浓度为10～100μmol/l。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述iox4的终浓度为40～60μmol/l。
4.一种体外延缓人脐带间充质干细胞衰老的方法，其特征在于，在人脐带间充质干细胞培养基中添加浓度为40～60μmol/l的iox4。
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【专利技术属性】
技术研发人员：王宗起，袁亚林，陆品帆，叶凌涛，刘璐，孙丹丹，
申请(专利权)人：恒峰铭成生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：
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