【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及了病毒检测，尤其涉及一种快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒及病毒浓缩方法。
技术介绍
1、非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(英文名称：african swine fevervirus，简称：asfv)感染家猪和各种野猪而引起的一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织(oie)将其列为法定报告动物疫病。asfv是非洲猪瘟科非洲猪瘟病毒属的重要成员，病毒粒子的直径为175－215纳米，呈20面体对称，有囊膜。基因组为双股线状dna，在猪体内，非洲猪瘟病毒可在几种类型的细胞浆中，尤其是网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制。asfv能从被感染猪的血液、组织液、内脏、排泄物中检测出来。
2、通过猪养殖场的废水来检测asfv是一项全新技术，对于非洲猪瘟防治，减少疫情造成的损失，具有重要的实践价值。本专利技术公开一种专门用于从废水中浓缩富集asfv的试剂盒，其特点是快速、高效，目前市面上和文献中尚无公开同类产品。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒及病毒浓缩方法，。
2、本专利技术涉及的一种快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，包括预混剂和缓冲液，所述预混剂按重量百分比包括氨基聚乙二醇聚天冬氨酸苄酯5％、硫酸钾30％、聚氧乙烯聚氧丙烯醚50％和氯化镁15％；
3、所述缓冲液包括溶剂和溶质，所述溶质按重量百分比包括磷酸二氢钠5％、磷酸氢二钠15％、氯化钠80％，所述溶剂为水，所述缓冲液中溶
4、本专利技术还涉及一种非洲猪瘟病毒的浓缩方法，包括上述快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，包括以下步骤：
5、杂质去除，灭活后的污水样本在低温离心机中用10000xg条件离心30分钟，去除悬浮颗粒杂质，取上清液转移至预混试剂离心管中，充分混合，震荡摇匀，获得均匀上清液；
6、低温离心处理，设定低温离心机的温度为4±1℃，10000xg条件下离心150分钟，取出离心管去除溶液上清，继续在4±1℃，10000xg条件下离心10分钟，使用移液器小心移除全部上清，禁止接触底部沉淀物；
7、病毒浓缩，加入400μl缓冲液，溶解上一步离心所得沉淀物，完全溶解后，转移至1.5ml离心管中，得到养殖废水的非洲猪瘟病毒富集液。
8、进一步地，还包括样本采集与预处理，将现场采集的猪厂养殖废水取35ml-45ml置于50ml离心管，65℃下灭活加热15分钟，获得灭活的污水样本。
9、进一步地，所述低温离心机的离心温度为4℃。
10、进一步地，所述预混剂的装载量为1000mg。
11、进一步地，还包括提取非洲猪瘟病毒富集液中的核酸进行提取和扩增，然后进行pcr荧光反应检测。
12、进一步地，样本采集与预处理，将现场采集的猪厂养殖废水取40ml置于50ml离心管，65℃下灭活加热15分钟，获得灭活的污水样本。
13、本专利技术的有益之处在于：浓缩富集养猪废水中非洲猪瘟病毒，目前国内外尚无同类产品和文献，适用于养猪废水的高有机质、高腐殖质、高重金属的环境条件，能降低养猪废水中这些高含量物质对非洲猪瘟病毒检测的影响，实现对非洲猪瘟病毒的有效富集，提高对非洲猪瘟病毒检测检测的效率和检测精度。
14、为让本专利技术的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包括预混剂和缓冲液，所述预混剂按重量百分比包括氨基聚乙二醇聚天冬氨酸苄酯5％、硫酸钾30％、聚氧乙烯聚氧丙烯醚50％和氯化镁15％；
2.一种非洲猪瘟病毒的浓缩方法，包括权利要求1所述的快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：还包括样本采集与预处理，将现场采集的猪厂养殖废水取35mL-45mL置于50mL离心管，65℃下灭活加热15分钟，获得灭活的污水样本。
4.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：所述低温离心机的离心温度为4℃。
5.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：所述预混剂的装载量为1000mg。
6.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：还包括提取非洲猪瘟病毒富集液中的核酸进行提取和扩增，然后进行PCR荧光反应检测。
7.根据权利要求3所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：样本采集与预处理，将现场采集
...【技术特征摘要】
1.一种快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包括预混剂和缓冲液，所述预混剂按重量百分比包括氨基聚乙二醇聚天冬氨酸苄酯5％、硫酸钾30％、聚氧乙烯聚氧丙烯醚50％和氯化镁15％；
2.一种非洲猪瘟病毒的浓缩方法，包括权利要求1所述的快速浓缩废水中非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒的浓缩方法，其特征在于：还包括样本采集与预处理，将现场采集的猪厂养殖废水取35ml-45ml置于50ml离心管，65℃下灭活加热15分钟，获得灭活的污水样本。
4....
【专利技术属性】
技术研发人员：周波，宋明芳，胡志远，徐嘉逸，陈一波，张巍，
申请(专利权)人：苏州先进分子诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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