【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物制剂含量测定，尤其涉及一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法。
技术介绍
1、癃清胶囊为国家改良型新药，源于《临床路径治疗药物释义》[1]，由败酱草、白花蛇舌草、金银花、黄连、黄柏、牡丹皮、赤芍、仙鹤草等10味中药组成，具有清热解毒，凉血通淋之功效，主要用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、腰痛等。
2、当前主要以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱等生物碱作为其质量控制指标[2][3]，而中医治疗是源于辨证论治和中药的性味归经，方中君药败酱草中主要成分咖啡酸具有清热解毒的作用[4][8]；臣药白花蛇舌草中芦丁、山柰酚具有利水渗湿的作用[9][10]；黄连黄柏中盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱具有清热解毒，败火的功效[16][17]；金银花中绿原酸具有解毒抗炎作用[11]-[14]；佐药中赤芍其成分芍药苷具有活血化瘀、解热解痉的作用[15][21]；牡丹皮主要成分丹皮酚具有止血化瘀的作用[18][19]；仙鹤草其成分木犀草素具有消炎解毒的作用[20][23]，以上各指标成分均与方中君臣佐使药主治功效相吻合，为了进一步体现君药主病，臣药助君药清热通淋，佐药既助君臣药力，又治兼症，实现诸药合用，共奏清热解毒，凉血通淋之功。
3、如：中国专利号cn202111667325.1，专利名称为：“一种改进的癃清胶囊质量检测方法”，该方法采用高效液相色谱法分别测定盐酸黄柏碱、23-乙酰泽泻醇b和23-乙酰泽泻醇c，可以用于测定该三种成分的含量。但该方法只能检测出有限3种成分，且需采用2种不同的测定方法，不能同时测
4、故本专利技术利用hplc法同时对癃清胶囊中芍药苷、丹皮酚、绿原酸、咖啡酸、盐酸小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、没食子酸、芦丁、山柰酚、木犀草素、盐酸黄柏碱等12种皂苷、黄酮、生物碱、有机酸等多类型多指标成分进行测定，为进一步完善癃清胶囊的质量控制方法提供依据。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法。
2、本专利技术是通过采用以下技术方案实现的：
3、本专利技术所得的一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，包括同时测定癃清胶囊中芍药苷、丹皮酚、绿原酸、咖啡酸、盐酸小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、没食子酸、芦丁、山柰酚、木犀草素、盐酸黄柏碱的含量测定方法，具体包括如下步骤：
4、(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以0.1％磷酸作为流动相a，以甲醇溶液作为流动相b，进行梯度洗脱；柱温：35℃；检测波长为270nm；体积流量为1.0ml/min；进样量10μl；
5、(2)对照品溶液的制备：精密称取对照品适量，加甲醇制成分别含芍药苷0.174mg/ml、丹皮酚0.007mg/ml、绿原酸0.160mg/ml、咖啡酸0.037mg/ml、盐酸小檗碱0.166mg/ml、黄连碱0.028mg/ml、盐酸药根碱0.027mg/ml、没食子酸0.069mg/ml、芦丁0.029mg/ml、山柰酚0.004mg/ml、木犀草素0.006mg/ml、盐酸黄柏碱0.110mg/ml的混合对照品溶液；
6、(3)供试品溶液的制备：取癃清胶囊适量，研细，取0.5-1.5g，精密称定，置于具塞的锥形瓶中，准确加入甲醇50-150ml，称定重量，超声30-60min，冷却，用甲醇补重，摇匀，过滤，即得；
7、(4)测定法：分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
8、本专利技术步骤(1)中所述的色谱柱为：shimnex cs c18色谱柱。
9、本专利技术所述shimnex cs c18色谱柱的规格为：4.6mm×250mm，5μm。
10、本专利技术所述梯度洗脱的程序如下：
11、
12、本专利技术所述的检测波长还可以为：230nm。
13、本专利技术所述的检测波长还可以为：250nm。
14、优选的，本专利技术所述供试品溶液的制备为：取癃清胶囊适量，研细，取1g，精密称定，置于具塞的锥形瓶中，准确加入甲醇100ml，称定重量，超声30min，冷却，用甲醇补重，摇匀，过滤，即得。
15、本专利技术所述超声条件为：功率为200-300w，频率为30-50khz。
16、优选的，本专利技术所述超声条件为：功率为250w，频率为40khz。
17、本专利技术所述过滤为采用0.22μm的微孔滤膜过滤。
18、本专利技术具有的有益效果：
19、1.本专利技术建立的hplc含量测定方法可同时测定癃清胶囊中芍药苷、丹皮酚、绿原酸、咖啡酸、盐酸小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、没食子酸、芦丁、山柰酚、木犀草素、盐酸黄柏碱12种指标成分的含量，从而建立癃清胶囊的多指标质量控制方法，可对癃清胶囊构建其基于中医药理论的质量标准及控制体系具有参考价值。
20、2.本专利技术采用高效液相色谱，以c18为色谱柱；柱温：35℃；波长为270nm；甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相，进行梯度洗脱。结果：癃清胶囊12个成分在考察范围内呈良好线性关系(r≥0.9995)，精密度rsd 0.47～1.48％，重复性rsd 0.60～1.60％，稳定性rsd0.34～1.43％，平均加样回收率97.83％～100.52％，rsd 0.9％～2.1％。表明该方法专属性强，灵敏度高、重复性好、简单易行稳定可靠。
21、3.本专利技术对色谱条件进行筛选考察，得到：甲醇-0.1％磷酸溶液的基线比较平稳，有机相甲醇洗脱后对化合物峰的分离度最好，而且无机相加入磷酸，酸化后待测组分峰减少拖尾，故本专利技术选择甲醇-0.1％磷酸溶液作为流动相。由于各组分在反相色谱中的保留时间差异很大，查阅文献后采用梯度洗脱的方式，使待测组分的峰与相邻的其他杂质峰能达到较好的分离效果，并保证了基线的平稳。
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1.一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，包括同时测定癃清胶囊中芍药苷、丹皮酚、绿原酸、咖啡酸、盐酸小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、没食子酸、芦丁、山柰酚、木犀草素、盐酸黄柏碱的含量测定方法，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述的色谱柱为：ShimNex CS C18色谱柱。
3.根据权利要求2所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，所述ShimNex CS C18色谱柱的规格为：4.6mm×250mm，5μm。
4.根据权利要求1所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述梯度洗脱的程序如下：
5.根据权利要求1所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述的检测波长还可以为：230nm。
6.根据权利要求1所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，
7.根据权利要求1所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(3)中所述供试品溶液的制备为：取癃清胶囊适量，研细，取1g，精密称定，置于具塞的锥形瓶中，准确加入甲醇100ml，称定重量，超声30min，冷却，用甲醇补重，摇匀，过滤，即得。
8.根据权利要求1或7任一项所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，所述超声条件为：功率为200-300W，频率为30-50kHz。
9.根据权利要求8所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，所述超声条件为：功率为250W，频率为40kHz。
10.根据权利要求1或7任一项所述的一种采用HPLC同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，所述过滤为采用0.22μm的微孔滤膜过滤。
...【技术特征摘要】
1.一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，包括同时测定癃清胶囊中芍药苷、丹皮酚、绿原酸、咖啡酸、盐酸小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、没食子酸、芦丁、山柰酚、木犀草素、盐酸黄柏碱的含量测定方法，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述的色谱柱为：shimnex cs c18色谱柱。
3.根据权利要求2所述的一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，所述shimnex cs c18色谱柱的规格为：4.6mm×250mm，5μm。
4.根据权利要求1所述的一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述梯度洗脱的程序如下：
5.根据权利要求1所述的一种采用hplc同时测定癃清胶囊中12个成分的含量方法，其特征在于，步骤(1)中所述的检测波长还可以为：230nm。
6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：伍庆，程贞翰，林一飞，鲁杰，左雅敏，王富友，张煜，张宝虎，
申请(专利权)人：贵州远程制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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