一种用于抗妇炎药物组合物的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种用于抗妇炎药物组合物的检测方法，采用HPLC波长转换法建立了抗妇炎药物组合物的指纹图谱，同时进行化学模式识别分析，并测定苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱的含量，为抗妇炎药物组合物的质量整体评价和质量控制标准提升提供参考。量整体评价和质量控制标准提升提供参考。

【技术实现步骤摘要】
一种用于抗妇炎药物组合物的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物检测
，具体涉及一种用于抗妇炎药物组合物的检测方法。

技术介绍

[0002]抗妇炎胶囊是源于苗族验方的贵州名优苗族药制剂，含苦参、杠板归、黄柏、连翘、益母草、赤豆、艾叶、当归、乌药等多味药，用于治疗湿热下注型盆腔炎、阴道炎、慢性宫颈炎，赤白带下、阴痒、出血、痛经等妇科炎症类疾病，疗效显著。方中君药苦参清热燥湿、杀虫利尿，所含苦参碱具有广谱的杀菌作用；君药杠板归清热解毒，所含芦丁具有消炎抑菌、抗氧化等药理作用；二者合用，有清热燥湿，解毒止带之功，针对下腹疼痛、带下、阴痒主证病机而设。臣药黄柏和连翘清热，益母草活血调经，黄柏中黄柏碱、小檗碱具有泻火解毒、退热除蒸的功效；连翘中连翘酯苷A具有解热、抗感染等药理活性三者合用，增强君药清热解毒，燥湿止带之功，并能祛瘀止痛、利水消肿。佐使药当归活血补血，乌药行气止痛，赤豆利水消肿、解毒排脓，艾叶散寒止痛、温中调经、四者合用，具有增强行气祛瘀止痛，利水消肿之功。当归、艾叶、乌药三者药性偏温，可佐制方中君臣药，以防凝滞气血。诸药寒温并用，并行不悖，诸症悉解。
[0003]抗妇炎胶囊为独家专利苗药制剂，已纳入国家医保用药目录，但现有质量标准仅有性状薄层色谱鉴别和苦参中苦参碱的定量测定，无法全面评价抗妇炎胶囊的整体质量。中药指纹图谱具有评价中药优劣、确保其质量稳定一致等优点，可作为评价中药整体质量的技术手段。化学模式识别中主成分分析能对数据进行快速及可视化识别；聚类分析能确定样品批次间的稳定性，与指纹图谱结合，有利于揭示中成药复杂成分间的规律。
[0004]针对以上现有技术的不足，专利技术团队经过了大量的实验，采用HPLC指纹图谱法测定抗妇炎药物组合物HPLC指纹图谱，同时进行化学模式识别分析，并测定苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱的含量，为抗妇炎药物组合物的质量整体评价和质量控制标准提升提供参考。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种抗妇炎药物组合物指纹图谱建立的方法。
[0006]本专利技术的另一目的是提供一种抗妇炎药物组合物的化学模式识别分析的方法。
[0007]本专利技术的另一目的是提供一种抗妇炎药物组合物含量测定的方法。
[0008]本专利技术所述抗妇炎药物组合物的处方为：苦参250g、杠板归250g、黄柏150g、连翘50g、益母草30g、赤豆30g、艾叶30g、当归30g、乌药30g。
[0009]本专利技术所述抗妇炎药物组合物的制备方法为：以上九味，取苦参160g、黄柏90g、赤豆15g、连翘15g，粉碎成细粉，过筛，备用；剩余苦参、黄柏、赤豆、连翘与其余益母草等五味，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在60～80℃为1.31～1.35的稠膏，加入上述细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，即得。
[0010]本专利技术所述检测方法包括指纹图谱建立、化学模式识别分析及含量测定。
[0011]所述指纹图谱建立的方法为：
[0012](1)供试品溶液的制备
[0013]取抗妇炎药物组合物0.2～0.8g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入60～80％甲醇5～15mL，称定质量，以功率为250W，频率为40KHz超声10～60min，放冷，再次称定质量，用60～80％甲醇补足减少的质量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
[0014](2)单饮片样品溶液的制备：按抗妇炎药物组合物处方配比，按供试品溶液的制备方法制备单饮片样品溶液；
[0015](3)阴性样品溶液的制备：按供试品溶液的制备方法，分别制备缺苦参、杠板归、黄柏、连翘的阴性样品溶液；
[0016](4)混合对照品溶液的制备
[0017]精密称取苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解稀释，制成质量浓度依次为3809.4μg/mL、84.5μg/mL、166.6μg/mL、420.0μg/mL、596.2μg/mL的混合对照品溶液；
[0018](5)色谱条件与系统适应性试验
[0019]色谱柱：ACE C
18
‑
AR，色谱柱规格：250mm
×
4.6mm，5μm；流动相：以0.05～0.15％磷酸为流动相A，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～4min，5％B；4～21min，5％B
→
10％B；21～35min，10％B
→
11％B；35～45min，11％B
→
15％B；45～65min，15％B
→
20％B；65～85min，20％B
→
35％B；85～95min，35％B
→
70％B；柱温：30℃，检测波长：0～80min，220nm；81～95min，254nm；流速：1ml/min；
[0020](6)测定法
[0021]分别精密吸取上述混合对照品溶液、供试品溶液、单饮片样品溶液、阴性样品溶液10μl注入高效液相色谱仪中测定，标定共有峰，即得抗妇炎药物组合物指纹图谱。
[0022]优选的，所述指纹图谱建立的方法为：
[0023](1)供试品溶液的制备
[0024]取抗妇炎药物组合物0.5g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10mL，称定质量，以功率为250W，频率为40KHz超声30min，放冷，再次称定质量，用70％甲醇补足减少的质量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
[0025](2)单饮片样品溶液的制备：按抗妇炎药物组合物处方配比，同供试品溶液的制备方法制备单饮片样品溶液；
[0026](3)阴性样品溶液的制备：同供试品溶液的制备方法，分别制备缺苦参、杠板归、黄柏、连翘的阴性样品溶液；
[0027](4)混合对照品溶液的制备
[0028]精密称取苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解稀释，制成质量浓度依次为3809.4μg/mL、84.5μg/mL、166.6μg/mL、420.0μg/mL、596.2μg/mL的混合对照品溶液；
[0029](5)色谱条件与系统适应性试验
[0030]色谱柱：ACE C
18
‑
AR，色谱柱规格：250mm
×
4.6mm，5μm；流动相：以0.1％磷酸为流动
相A，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～4min，5％B；4～21min，5％B
→
10％B；21～35min，10％B
→
11％B；35～45min，11％B
→
15％B；45～65min，15％B
→
20％B；65～85min，20％B
→
35％B；8本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于抗妇炎药物组合物的检测方法，所述抗妇炎药物组合物的处方为：苦参250g、杠板归250g、黄柏150g、连翘50g、益母草30g、赤豆30g、艾叶30g、当归30g、乌药30g；所述抗妇炎药物组合物的制备方法为：以上九味，取苦参160g、黄柏90g、赤豆15g、连翘15g，粉碎成细粉，过筛，备用；剩余苦参、黄柏、赤豆、连翘与其余益母草等五味，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在60～80℃为1.31～1.35的稠膏，加入上述细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，即得；其特征在于，所述检测方法包括指纹图谱建立、化学模式识别分析及含量测定。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述指纹图谱建立的方法为：(1)供试品溶液的制备取抗妇炎药物组合物0.2～0.8g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入60～80％甲醇5～15mL，称定质量，以功率为250W，频率为40KHz超声10～60min，放冷，再次称定质量，用60～80％甲醇补足减少的质量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；(2)单饮片样品溶液的制备：按抗妇炎药物组合物处方配比，按供试品溶液的制备方法制备单饮片样品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：按供试品溶液的制备方法，分别制备缺苦参、杠板归、黄柏、连翘的阴性样品溶液；(4)混合对照品溶液的制备精密称取苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解稀释，制成质量浓度依次为3809.4μg/mL、84.5μg/mL、166.6μg/mL、420.0μg/mL、596.2μg/mL的混合对照品溶液；(5)色谱条件与系统适应性试验色谱柱：ACE C
18
‑
AR，色谱柱规格：250mm
×
4.6mm，5μm；流动相：以0.05～0.15％磷酸为流动相A，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～4min，5％B；4～21min，5％B
→
10％B；21～35min，10％B
→
11％B；35～45min，11％B
→
15％B；45～65min，15％B
→
20％B；65～85min，20％B
→
35％B；85～95min，35％B
→
70％B；柱温：30℃，检测波长：0～80min，220nm；81～95min，254nm；流速：1ml/min；(6)测定法分别精密吸取上述混合对照品溶液、供试品溶液、单饮片样品溶液、阴性样品溶液10μl注入高效液相色谱仪中测定，标定共有峰，即得抗妇炎药物组合物指纹图谱。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述指纹图谱建立的方法为：(1)供试品溶液的制备取抗妇炎药物组合物0.5g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇10mL，称定质量，以功率为250W，频率为40KHz超声30min，放冷，再次称定质量，用70％甲醇补足减少的质量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；(2)单饮片样品溶液的制备：按抗妇炎药物组合物处方配比，同供试品溶液的制备方法制备单饮片样品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：同供试品溶液的制备方法，分别制备缺苦参、杠板归、黄柏、连翘的阴性样品溶液；(4)混合对照品溶液的制备
精密称取苦参碱、盐酸黄柏碱、芦丁、连翘酯苷A、盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解稀释，制成质量浓度依次为3809.4μg/mL、84.5μg/mL、166.6μg/mL、420.0μg/mL、596.2μg/mL的混合对照品溶液；(5)色谱条件与系统适应性试验色谱柱：ACE C
18
‑
AR，色谱柱规格：250mm
×
4.6mm，5μm；流动相：以0.1％磷酸为流动相A，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～4min，5％B；4～21min，5％B
→
10％B；21～35min，10％B
→
11％B；35～45min，11％B
→
15％B；45～65min，15％B
→
20％B；65～85min，20％B
→
35％B；85～95min，35％B
...

【专利技术属性】
技术研发人员：李莉，黄家宇，程贞翰，王铭菊，何瑾，吴军，杜秋莹，刘星村，
申请(专利权)人：贵州远程制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：