【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测，具体涉及一种针对环境样品中大环内酯类抗生素抗性基因检测的dna银纳米簇荧光探针、制备方法及应用。
技术介绍
1、抗生素耐药性的发展以及随之而来的耐药细菌感染的出现是一个具有重要意义的公共卫生挑战。阿奇霉素是治疗人类疾病最常用的大环内酯类药物之一。在受污染的地表水和沉积物中发现了高水平的已知和新型大环内酯类抗生素抗性基因(msr、mph、mef、erm)，因此迫切需要探索用于可靠分析环境样品中大环内酯类抗生素抗性基因的方法，以监测和评估其在环境中的分布情况。
2、传统抗生素抗性基因检测方法主要依赖于基因测序和荧光定量聚合酶链式反应(pcr)，但这两种方法预处理工艺复杂、检测成本高、依赖精密设备和专业人员，因此需要开发更简单快捷的方法来对抗性基因作出可靠检测。
3、近年来，已开发出了一些不依赖于pcr扩增的抗性基因快速检测技术，例如光电、电化学、比色、荧光等传感检测方法，其中，chen等(2023)开发了一种基于dna-agncs的双通道荧光传感平台，可以实现四环素类抗生素抗性基因tet-a与...
【技术保护点】
1.一种检测大环内酯类抗生素抗性基因的荧光探针E4-AgNCs，其特征在于，该荧光探针E4-AgNCs的DNA序列部分包括银纳米簇合成模板、典型大环内酯类抗性基因ermB指纹特征序列的两段部分互补序列、富含鸟嘌呤的信号增强调谐序列以及2段3个核苷酸长度的荧光稳定间隔序列，分别位于目标基因与银纳米簇合成模板及调谐序列之间，探针的核苷酸序列为：
2.权利要求1所述的荧光探针E4-AgNCs的合成方法，其特征在于，步骤如下：将荧光探针E4-AgNCs的DNA序列加入到磷酸缓冲液中，经过加热后迅速冷却以获得单链DNA，再将硝酸银溶液加入混合体系中，在0～5℃环境下...
【技术特征摘要】
1.一种检测大环内酯类抗生素抗性基因的荧光探针e4-agncs，其特征在于，该荧光探针e4-agncs的dna序列部分包括银纳米簇合成模板、典型大环内酯类抗性基因ermb指纹特征序列的两段部分互补序列、富含鸟嘌呤的信号增强调谐序列以及2段3个核苷酸长度的荧光稳定间隔序列，分别位于目标基因与银纳米簇合成模板及调谐序列之间，探针的核苷酸序列为：
2.权利要求1所述的荧光探针e4-agncs的合成方法，其特征在于，步骤如下：将荧光探针e4-agncs的dna序列加入到磷酸缓冲液中，经过加热后迅速冷却以获得单链dna，再将硝酸银溶液加入混合体系中，在0～5℃环境下孵育，然后加入nabh4溶液，在室温条件下振荡至充分混匀以还原dna序列上的ag+，最后室温避光孵育，得到荧光探针e4-agncs溶液。
3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，其中，dna序列、硝酸银、nabh4的摩尔比为1:(6～24):(6～24...
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