【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于慢病毒载体制备，尤其涉及一种慢病毒浓缩方法。
技术介绍
1、在慢病毒制备过程中，浓缩是重要步骤，在携带有外源基因的慢病毒质粒及辅助质粒共转染293t细胞后，需要收集上清液，作为慢病毒原液，需要对慢病毒原液进行浓缩，目前常规的慢病毒浓缩技术包括超速离心、超滤、peg浓缩和阴离子交换柱法。超速离心法需要购买昂贵的高速离心机，超滤和阴离子交换柱法都需要购买价格不菲的耗材，对于制备较多个数和较大体积的慢病毒液产生很大负担，而peg法在浓缩过程需要的时间比较长，也需要使用离心机(但速度较低)，对杂质的去除没有效果。
2、另一方面，在慢病毒原液中，容易残留宿主的核酸，在慢病毒制备过程中，需要额外单独加入核酸酶降解宿主核酸，难以和浓缩步骤同时进行，而在体系中引入核酸酶，一般需要使用高温灭酶，这会导致慢病毒的存活率降低，影响慢病毒后续的侵染能力。
3、因此，亟需提供一种低成本的慢病毒浓缩方法，既能提高慢病毒浓缩效率，又能兼顾慢病毒原液中宿主核酸的降解。
技术实现思路
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【技术保护点】
1.慢病毒的浓缩方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的慢病毒的浓缩方法，其特征在于，所述步骤1具体为：60-70g壳聚糖溶解在650-700mL 0.3mol/L的乙酸溶液中，20-25℃剧烈搅拌4-5h，粘稠状液体通过棉布过滤除去不溶性杂质，然后逐渐滴加1mmol/LNaOH，直至pH达到10.5以上，使壳聚糖脱乙酰化反应，在70-80℃条件下反应24-30h，离心分离使壳聚糖沉淀下来，双蒸水洗脱，真空冷冻干燥，在研钵中将其粉碎成粉末状，得到脱乙酰化的壳聚糖粉末。
3.根据权利要求2所述的慢病毒的浓缩方法，其特征在于，所述...
【技术特征摘要】
1.慢病毒的浓缩方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的慢病毒的浓缩方法，其特征在于，所述步骤1具体为：60-70g壳聚糖溶解在650-700ml 0.3mol/l的乙酸溶液中，20-25℃剧烈搅拌4-5h，粘稠状液体通过棉布过滤除去不溶性杂质，然后逐渐滴加1mmol/lnaoh，直至ph达到10.5以上，使壳聚糖脱乙酰化反应，在70-80℃条件下反应24-30h，离心分离使壳聚糖沉淀下来，双蒸水洗脱，真空冷冻干燥，在研钵中将其粉碎成粉末状，得到脱乙酰化的壳聚糖粉末。
3.根据权利要求2所述的慢病毒的浓缩方法，其特征在于，所述步骤2中，所述干燥方式为真空冷冻干燥、加热烘...
【专利技术属性】
技术研发人员：邱德辉，
申请(专利权)人：福州载基生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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