一种裂解细胞释放AAV病毒的方法技术

本发明专利技术公开了一种裂解细胞释放AAV病毒的方法，具体属于化学试剂领域；所述方法中利用裂解剂进行细胞裂解，裂解剂包括组分：MgCl<subgt;2</subgt;、吐温20、Tris缓冲液；或者为柠檬酸钠溶液。本发明专利技术提供的裂解剂对细胞的裂解性能与TritonX‑100裂解性能相当，同时对环境污染较少，能够替代TritonX‑100有毒成分，降低产品的安全风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于化学试剂领域，具体涉及一种裂解细胞释放aav病毒的方法。

技术介绍

1、目前行业内进行细胞裂解可以通过化学方法(例如去污剂或高渗溶液)或物理方法(例如多次冻融循环、微流化或超声)进行。虽然物理裂解方法在实验室规模中很常见有效，但这些方法通常需要专门的设备，且往往对与其规模有关的参数没有完全了解和表征，难以放大到cgmp工厂使用。这导致普遍使用化学裂解方法来扩大规模。

2、而在aav病毒生产中，常使用0.1％的tritonx-100对细胞进行裂解，从而释放细胞内的aav病毒。tritonx-100(曲拉通x-100)是一种非离子型表面活性剂和乳化剂，广泛用于在温和的非变性条件下增溶膜和回收膜成分。

3、虽然triton被广泛用于细胞裂解，但曲拉通x-100对人体具有一定毒性，操作不慎会引起严重的眼睛刺激和灼伤，可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害身体健康；且其降解产物对环境存在污染的影响；从而导致会被纳入欧盟禁止物质的化学品注册、评价、授权和限制清单，将限制其使用。

4、因此，本专利技术研究的重点在于提供能够代替t本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种裂解剂，其特征在于，包括组分：≥15mmol/L的MgCl2、体积分数为≥0.4％的吐温20、15-25mmol/L的Tris缓冲液；

2.根据权利要求1所述的裂解剂，其特征在于，包括组分：≥20mmol/L的MgCl2、体积分数为≥0.5％的吐温20、20mmol/L的Tris缓冲液；

3.根据权利要求1所述的裂解剂，其特征在于，若组分为≥15mmol/L的MgCl2、体积分数为≥0.4％的吐温20、15-25mmol/L的Tris缓冲液，裂解剂的pH为≥7.0；

4.权利要求1-3任一所述的裂解剂在裂解细胞中的应用。p>

5.一种A...

【技术特征摘要】

1.一种裂解剂，其特征在于，包括组分：≥15mmol/l的mgcl2、体积分数为≥0.4％的吐温20、15-25mmol/l的tris缓冲液；

2.根据权利要求1所述的裂解剂，其特征在于，包括组分：≥20mmol/l的mgcl2、体积分数为≥0.5％的吐温20、20mmol/l的tris缓冲液；

3.根据权利要求1所述的裂解剂，其特征在于，若组分为≥15mmol/l的mgcl2、体积分数为≥0.4％的吐温20、15-25mmol/l的tris缓冲液，裂解剂的ph为≥7.0；

4.权利要求1-3任一所述的裂解剂在裂解细胞中的应用。

5.一种aav病毒样本检测试剂，其特征在于，包含权利要求1-3任一所述的裂解...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄姗姗，曲和之，朱后顺，陈朝霞，蔡雨蒙，
申请(专利权)人：广东三生制药有限公司，
类型：发明
国别省市：