【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，具体涉及一种恢复子宫内膜损伤生殖力的水凝胶系统的制备方法及其应用。
技术介绍
1、子宫内膜损伤临床表现主要为月经量减少，甚至闭经，不孕和反复流产。在不孕女性中有高达6％是子宫内膜患者，其中刮宫导致的宫腔粘连女性患者中有37.6％后续会出现流产现象。
2、子宫内膜损伤引起的女性不孕和反复流产已经严重影响女性的生殖健康，并且目前没有有效的治疗方法，因此研发更为安全有效的修复子宫内膜损伤和改善不良妊娠结局的治疗手段迫在眉睫。
3、间充质干细胞(mesenchymal stem cells,mscs)治疗子宫内膜损伤是近些年研究的热点。mscs可以促进血管和腺体数量的恢复，并且还有利于纤维化面积的减少。骨髓、脂肪和脐带等都是mscs的常见来源，其中脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,hucmscs)具有无创性获取、来源充足和低免疫原性的特点，因此被考虑为子宫内膜损伤治疗的可观来源。然而，mscs体外培养随着传代次数的增加，增殖、迁移等细胞功能会逐渐减弱，这会削弱mscs体内的治疗效果。
技术实现思路
1、本专利技术提供的一种恢复子宫内膜损伤生殖力的水凝胶系统的制备方法及其应用，旨在解决上述
技术介绍
中存在的问题。
2、为了实现上述技术目的，本专利技术主要采用如下技术方案：
3、第一方面，本专利技术公开了一种负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucms
4、第二方面，本专利技术公开了白血病抑制因子lif在制备激活pi3k/akt信号通路药物中的应用，所述药物促进脐带间充质干细胞hucmscs迁移和增殖，用于修复受损子宫内膜。
5、第三方面，本专利技术公开了ha-gel水凝胶在制备能延长脐带间充质干细胞hucmscs在子宫滞留时间药物中的应用，所述药物为修复受损子宫内膜的药物。
6、在本专利技术的较佳实施方式中，所述受损子宫内膜为宫腔粘连。
7、第四方面，本专利技术公开了一种负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucmscs的ha-gel水凝胶的制备方法，包括如下步骤：
8、步骤1、将酰肼接枝明胶gel-adh和氧化透明质酸ha-cho分别溶解于pbs溶液中，分别得到gel-adh溶液和ha-cho溶液；
9、步骤2、在gel-adh溶液中加入lif和hucmscs，得到混合液；
10、步骤3、将混合液与ha-cho溶液混合均匀，即得负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucmscs的ha-gel水凝胶。
11、在本专利技术的较佳实施方式中，所述酰肼接枝明胶gel-adh采用如下方法制备：
12、将明胶溶解吗啉乙磺酸溶液中，然后向其中加入己二酸二酰肼，升温搅拌至反应完全，回到室温后，再向溶液中加入n-(3-二甲基氨基丙基)-n′-乙基碳二亚胺盐酸盐和1-羟基苯三唑，并搅拌过夜，将得到的溶液用去离子水透析，随后冻干，得到纯化的酰肼接枝明胶gel-adh。
13、在本专利技术的较佳实施方式中，所述氧化透明质酸ha-cho采用如下方法制备：
14、将透明质酸钠溶于去离子水中，然后加入naio4，在黑暗中搅拌该溶液过夜，所得溶液通过对去离子水的透析纯化，随后冻干，得到纯化的氧化透明质酸ha-cho。
15、在本专利技术的较佳实施方式中，步骤1中，所述酰肼接枝明胶gel-adh与氧化透明质酸ha-cho的质量比为1：40。
16、在本专利技术的较佳实施方式中，步骤2中，10-1000mggel-adh，加入1-100ng lif和1×103个-10×107个hucmscs。
17、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
18、1、本专利技术采用lif刺激hucmscs细胞，可以减少由于体外培养造成的增殖和迁移能力的减弱问题。
19、2、本专利技术利用ha-gel水凝胶作为lif和hucmscs的载体，使lif能够持续刺激hucmscs，并且保持hucmscs长期滞留在体内，有利于修复受损子宫内膜。
20、3、本专利技术利用ha-gel水凝胶作为lif和hucmscs的载体，采用的是由氧化透明质酸(ha-cho)和酰肼接枝明胶(gel-adh)制备的可注射水凝胶(ha-gel水凝胶)，其基础原料都是经过美国食品药物管理局批准可用于临床治疗的材料，具有可靠的安全性。
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1.负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶在制备修复受损子宫内膜药物中的应用。
2.白血病抑制因子LIF在制备激活PI3K/AKT信号通路药物中的应用，所述药物促进脐带间充质干细胞hUCMSCs迁移和增殖，用于修复受损子宫内膜。
3.HA-Gel水凝胶在制备能延长脐带间充质干细胞hUCMSCs在子宫滞留时间药物中的应用，所述药物为修复受损子宫内膜的药物。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述受损子宫内膜为宫腔粘连。
5.一种负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶的制备方法，其特征在于，所述酰肼接枝明胶Gel-ADH采用如下方法制备：
7.根据权利要求5所述的负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶的制备方法，其特征在于，所述氧化透明质酸HA-
8.根据权利要求5所述的负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤1中，所述酰肼接枝明胶Gel-ADH与氧化透明质酸HA-CHO的质量比为1:40。
9.根据权利要求5所述的负载白血病抑制因子LIF和脐带间充质干细胞hUCMSCs的HA-Gel水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤2中，10-1000mgGel-ADH，加入1-100ng LIF和1×103个-10×107个hUCMSCs。
...【技术特征摘要】
1.负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucmscs的ha-gel水凝胶在制备修复受损子宫内膜药物中的应用。
2.白血病抑制因子lif在制备激活pi3k/akt信号通路药物中的应用，所述药物促进脐带间充质干细胞hucmscs迁移和增殖，用于修复受损子宫内膜。
3.ha-gel水凝胶在制备能延长脐带间充质干细胞hucmscs在子宫滞留时间药物中的应用，所述药物为修复受损子宫内膜的药物。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述受损子宫内膜为宫腔粘连。
5.一种负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucmscs的ha-gel水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的负载白血病抑制因子lif和脐带间充质干细胞hucmscs的ha...
【专利技术属性】
技术研发人员：周倩，于永生，张东海，冯茜，周靖宜，丁传凤，
申请(专利权)人：上海市第一妇婴保健院，
类型：发明
国别省市：
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