【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体地本专利技术涉及hla-a*1101限制性靶向巨细胞病毒pp65的特异性tcr、表达其的t细胞及应用。
技术介绍
1、巨细胞病毒(cytomegalovirus,cmv)归属于人疱疹病毒科β亚科，具有明显的宿主种属特异性，是人疱疹病毒科中最大、结构也最复杂的病毒；cmv在人群中感染非常广泛，通常呈隐性感染，多数感染者无临床症状，但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。近年来cmv感染的诊治取得了长足进步，使得移植后cmv感染的发病率有了明显下降，但cmv感染在异基因干细胞移植(allo-hsct)患者中仍然保持了较高的发生率，其导致的间接效应，如继发性植入功能不良、gvhd、全因死亡率等对患者的预后仍产生巨大的影响。而现有抗cmv药物也存在诸多不足，如剂型单一、靶点相似、可导致粒细胞缺乏/肾损害等。当前抗病毒药物，如acyclovir，ganciclovir等常常引起严重的副作用，如骨髓抑制等。
2、人巨细胞病毒(hcmv)含有约20-25种蛋白质，其中在介导hcmv感染和病毒复制中有3种蛋白作用最为重要，即由orf ul83编码的pp65蛋白、orf ul82编码的磷蛋白pp71和orf ul69编码的pul69蛋白。上述3种蛋白共同的特点是启动hcmv对宿主细胞的感染和病毒的复制，同时在逃逸t淋巴细胞介导的细胞毒性作用中也具有重要作用。研究表明，上述3种蛋白中又以pp65蛋白引起移植物血管病变和排斥反应的作用最为严重。因allo-hsct引起的免疫受损，会使潜伏的hcmv再激活，从
3、allo-hsct患者由于免疫功能低下，不能有效清除cmv，易发生原发性cmv感染或潜伏的cmv再激活。hsct患者的cmv感染/再激活发生后，可引起cmv相关发热直至器官累及的系列相关性疾病，与疾病复发和受试者生存密切相关，且当前常规药物治疗效果较差。因此，将cmv-tcr-t细胞疗法应用于治疗和预防hsct或其他器官移植后的cmv感染领域，极具临床价值和应用前景。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种hhla-a*1101限制性靶向巨细胞病毒pp65的特异性tcr、表达其的t细胞及应用。
2、本专利技术的第一方面，提供了一种t细胞受体(tcr)，所述tcr包含tcrα链可变域和tcrβ链可变域，所述tcrα链可变域的cdr3的氨基酸序列为cagppwgklif(seq id no.13)；和/或
3、所述tcrβ链可变域的cdr3的氨基酸序列为casslggteysnqpqhf(seq id no.21)。
4、在另一优选例中，所述tcr特异性结合atvqgqnlk-hla-a*1101复合物。
5、在另一优选例中，所述tcrα链可变域的3个互补决定区(cdr)为：
6、α-cdr1：ttlsn(seq id no.9)，
7、α-cdr2：lvksgev(seq id no.11)，
8、α-cdr3：cagppwgklif(seq id no.13)。
9、在另一优选例中，所述tcrβ链可变域的3个互补决定区为：
10、β-cdr 1：sghns(seq id no.17)，
11、β-cdr 2：fnnnvp(seq id no.19)，
12、β-cdr 3：casslggteysnqpqhf(seq id no.21)。
13、在另一优选例中，所述tcr包含tcrα链可变域和tcrβ链可变域，所述tcrα链可变域为与seq id no.7具有至少90％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述tcrβ链可变域为与seq id no.15具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。
14、在另一优选例中，所述tcr包含α链可变域氨基酸序列seq id no.7。
15、在另一优选例中，所述tcr包含β链可变域氨基酸序列seq id no.15。
16、在另一优选例中，所述tcr为αβ异质二聚体，其包含tcrα链恒定区trac*01和tcrβ链恒定区trbc1*01或trbc2*01。
17、在另一优选例中，所述tcr的α链氨基酸序列为seq id no.3。
18、在另一优选例中，所述tcr的β链氨基酸序列为seq id no.5。
19、在另一优选例中，所述tcr的α链与β链之间含有人工链间二硫键。
20、在另一优选例中，所述tcr的氨基酸序列如seq id no.1所示。
21、本专利技术的第二方面，提供了一种多价tcr复合物，其包含至少两个tcr分子，并且其中的至少一个tcr分子为本专利技术第一方面所述的tcr。
22、本专利技术的第三方面，提供了一种核酸分子，所述核酸分子包含编码本专利技术第一方面所述的tcr分子的核酸序列或其互补序列。
23、在另一优选例中，所述核酸分子包含编码tcrα链可变域的核苷酸序列seq idno.8。
24、在另一优选例中，所述的核酸分子包含编码tcrβ链可变域的核苷酸序列seq idno.16。
25、在另一优选例中，所述核酸分子包含编码tcrα链的核苷酸序列seq id no.4。
26、在另一优选例中，所述核酸分子包含编码tcrβ链的核苷酸序列seq id no.6。
27、在另一优选例中，所述核酸分子包含核苷酸序列seq id no.2。
28、本专利技术的第四方面，提供了一种载体，所述的载体含有本专利技术第三方面所述的核酸分子；优选地，所述的载体为病毒载体；更优选地，所述的载体为慢病毒载体。
29、本专利技术的第五方面，提供了一种分离的宿主细胞，所述的宿主细胞中含有本专利技术第四方面所述的载体或基因组中整合有外源的本专利技术第三方面所述的核酸分子。
30、本专利技术的第六方面，提供了一种细胞，所述细胞转导本专利技术第三方面所述的核酸分子或本专利技术第四方面所述的载体；优选地，所述细胞为t细本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种T细胞受体(TCR)，其特征在于，所述T细胞受体包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域的CDR3的氨基酸序列为CAGPPWGKLIF(SEQ ID NO.13)；和/或
2.如权利要求1所述的TCR，其特征在于，其包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域为与SEQ ID NO.7具有至少90％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述TCRβ链可变域为与SEQ ID NO.15具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。
3.如权利要求1所述的TCR，其特征在于，所述TCR的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.一种多价TCR复合物，其特征在于，包含至少两个TCR分子，并且其中的至少一个TCR分子为上述权利要求中任一项所述的TCR。
5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含编码上述任一权利要求所述的TCR分子的核酸序列或其互补序列；
6.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求5所述的核酸分子；优选地，所述的载体为病毒载体；更优选地，所述的载体为慢病毒载体。
<...【技术特征摘要】
1.一种t细胞受体(tcr)，其特征在于，所述t细胞受体包含tcrα链可变域和tcrβ链可变域，所述tcrα链可变域的cdr3的氨基酸序列为cagppwgklif(seq id no.13)；和/或
2.如权利要求1所述的tcr，其特征在于，其包含tcrα链可变域和tcrβ链可变域，所述tcrα链可变域为与seq id no.7具有至少90％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述tcrβ链可变域为与seq id no.15具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。
3.如权利要求1所述的tcr，其特征在于，所述tcr的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4.一种多价tcr复合物，其特征在于，包含至少两个tcr分子，并且其中的至少一个tcr分子为上述权利要求中任一项所述的tcr。
5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含编码上述任一权利要求所述的tcr分子...
【专利技术属性】
技术研发人员：沈良华，王鹏然，张岩，宋献民，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：
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