【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于从核酸中降低内毒素水平或去除内毒素的方法。为此，在使用基于膜或单块的吸附剂进行核酸的阴离子交换色谱纯化期间添加非离子洗涤剂。
技术介绍
1、由于用于外源性表达或治疗性应用的重组dna的渐增的重要性，对用于从生物来源获得高纯度核酸(例如质粒dna)的快速和有效方法的需求在不断增加。特别地，对还可以以较大规模进行的纯化方法的需求也在增加。高纯度质粒dna的使用在诸如转基因的聚合酶链式反应(pcr)扩增、dna测序、体外mrna合成和亚克隆的各种应用中都是关键的。因此，以高产率和质量生成质粒dna的方案已得到认真关注。
2、用于纯化，特别是相对大量的核酸(例如质粒dna)的许多已知方法包括色谱纯化步骤。这个步骤的效率通常也决定了制造方法的效率和有效性。
3、纯化尤其是质粒dna的另一个问题是由待将质粒dna与其分离的杂质引起的。这些首先是基因组dna和rna。纯化核酸时的另一种杂质是内毒素。内毒素是位于革兰氏阴性宿主细胞(例如大肠杆菌)的外膜上的脂多糖(lps)。在细胞的裂解期间，除了质粒dna外，还...
【技术保护点】
1.一种用于从核酸中耗尽或去除内毒素的方法，其包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤b)包括：
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于在步骤b)之前使所述样品与所述非离子洗涤剂接触。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，进行色谱分离的样品包含0.01％和10％(w/v)之间的非离子洗涤剂。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于通过用包含非离子洗涤剂的洗涤缓冲液洗涤所述膜或单块，使核酸与非离子洗涤剂接触。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于包含非离子洗涤剂...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于从核酸中耗尽或去除内毒素的方法，其包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤b)包括：
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于在步骤b)之前使所述样品与所述非离子洗涤剂接触。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，进行色谱分离的样品包含0.01％和10％(w/v)之间的非离子洗涤剂。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于通过用包含非离子洗涤剂的洗涤缓冲液洗涤所述膜或单块，使核酸与非离子洗涤剂接触。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于包含非离子洗涤剂的所述洗涤缓冲液包含在0.01％和10％(w/v)之间的非离子洗涤剂。
7.根据权利要求1至6中的一项或多项所述的方法，其特征在于所述非离子洗涤剂是烷基糖苷。
8.根据权利要求1至7中的一项或多项所述的方法，其特征在于所述核酸包含质粒dna或由质粒dna组成。
9.根据权利要求1至8中的一项或多项所述的方法，其特征在于使所...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·海宁克罗伊齐格，A·基塞韦特，A·斯坦，A·古普塔，
申请(专利权)人：默克专利股份公司，
类型：发明
国别省市：
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