一种海参美人鱼发光杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种海参美人鱼发光杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测试剂盒，属于水产养殖病原微生物诊断领域。所述试剂盒中包含用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针；所述用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针序列为：5'‑CGAAGATGAAGACGAAGA‑3'，5'‑CTGCTTGAAGATCTCAGA‑3'，5'‑FAM‑CAGCGACGACAGCGATGACA‑BHQ1‑3'。本发明专利技术根据美人鱼发光杆菌rpoD基因序列设计一对特异性引物和一条特异性荧光探针，利用TaqMan探针荧光定量PCR技术检测美人鱼发光杆菌，操作简单、检测准确度高、敏感性强。本发明专利技术为海参美人鱼发光杆菌诊断、流行监测以及防控提供了工具，具有很高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水产养殖病原微生物诊断领域，具体涉及一种海参美人鱼发光杆菌(photobacteriumdamselae)的taqman探针荧光定量pcr检测试剂盒。

技术介绍

1、海参参腐皮综合征，俗称化皮病，是当前养殖海参最主要疾病，死亡率可达90％以上，在保苗期和养成期均可发病。目前，关于海参腐皮综合征的流行病学研究较少，对其具体发病原因仍不清楚。已报到的致病病原主要包括细菌性病原，如弧菌属，希瓦氏菌属、发光杆菌属、葡萄球菌属、假交替单胞杆菌以及一些病毒性病原和寄生虫病原(后口虫和纤毛虫)等。同时，也有学者认为水温、饲料和盐度等非生物因子与海参腐皮综合征的发生相关。不管是何种因素引起的，其症状基本相同。首先，海参触手过度张开，接着口部肿大，分泌黏液增多，触手失去伸展活力，然后口部出现溃烂，开始是小的白斑，然后扩大到整个口部，溃烂处产生大量黏液，口与肛门处有白色絮状物粘连，直至全身溃烂直至死亡。

2、美人鱼发光杆菌(photobacteriumdamselae)是一种革兰氏阴性菌，直杆状，以1～3根鞭毛运动，有的不运动。其大小在0.8～1.3本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种海参美人鱼发光杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包含用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针；所述用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针序列如下所示：

2.根据权利要求1所述的试剂盒：其特征在于：所述试剂盒中还包含Premix Ex-Taq（Probe qPCR）、美人鱼发光杆菌阳性对照样品和美人鱼发光杆菌阴性对照样品。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的TaqMan探针荧光定量PCR扩增反应体系包括：0.4μL 10mM的Photobacterium damselae detection-F，0.4μL ...

【技术特征摘要】

1.一种海参美人鱼发光杆菌的taqman探针荧光定量pcr检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包含用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针；所述用于检测美人鱼发光杆菌的引物和探针序列如下所示：

2.根据权利要求1所述的试剂盒：其特征在于：所述试剂盒中还包含premix ex-taq（probe qpcr）、美人鱼发光杆菌阳性对照样品和美人鱼发光杆菌阴性对照样品。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的taqman探针荧光定量pcr扩增反应体系包括：0.4μl 10mm的photobacterium damselae detection-f，0.4μl 10mm的photobacterium damselae detection-r，0.4μl 10mm的photobacterium damselae detection-probe，10μl premix ex-taq（probe qpcr），7.8μl双蒸水，dna模板1μl。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的taqman探针荧光定量pcr...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈新华，覃盼，吴彤，杨求华，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：