一种基于DNA四面体纳米结构和产物诱导催化扩增的微小RNA-21检测方法技术

本发明专利技术基于DNA四面体纳米结构，开发了一种用于微小RNA‑21检测的产物诱导催化扩增方法。微小RNA‑21可以与核酸发卡序列的茎部杂交，引起核酸发卡结构的打开。打开的核酸发卡上的酶链可以切割DNA四面体结构中的底物链，产生DNA片段并恢复淬灭的荧光。该DNA片段又可以打开核酸发卡结构，然后连续催化DNA酶切割反应产生更多的DNA片段，使荧光强度显著恢复。最后，将荧光强度用于微小RNA‑21的定量分析。检测限可达到7pM，线性范围为20pM至5nM。重要的是，产物诱导催化扩增策略将反应时间大大缩短至30分钟。此外，还研究了产物诱导催化扩增策略的扩增效率。对血清样品的实际应用也显示出满意的结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于dna四面体纳米结构的微小rna-21检测方法。

技术介绍

1、结直肠癌癌症是全球最常见的癌症，是过去几年癌症发病率和死亡率的主要原因。在大多数情况下，结直肠癌癌症可以通过早期检测和清除癌前病变来治愈，这可以防止进展为癌症并降低发病率。因此，早期诊断和治疗对提高结直肠癌癌症患者的生存率具有至关重要的意义。目前，症状、结肠镜检查或粪便潜血检测几乎只用于大多数患者的结直肠癌癌症筛查。然而，结直肠癌癌症的症状与胃肠道疾病相似；结肠镜检查和采样过程具有侵入性且不方便。此外，粪便潜血检测具有较高的假阳性率。因此，开发新的诊断方法是可取的。

2、微小rna是一类小的单链非编码rna，约有19至23个核苷酸。它参与了多种生物过程和各种人类疾病的发展，如肌肉分化、干细胞分裂、神经元基因表达和大脑形态发生。许多研究已经充分调查并报道了微小rna的上调或下调在许多人类癌症中存在。微小rna已被视为癌症筛查和早期检测以及生存预测的潜在诊断生物标志物。即，微小rna的检测结果与其他临床检测学结果、医生临床经验相结合，有可能进行结直肠癌早期筛查以及本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于DNA四面体纳米结构和产物诱导催化扩增的微小RNA-21检测方法，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1)具体为：将微小RNA-21样品加入10nM核酸发卡，并在缓冲液(20mM tris-HCl(pH 7.5)、50mM NaCl和50mM MgCl2)中孵育20分钟。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于步骤2)具体为：将四条定制的单链寡核苷酸链Y1、Y2、Y3和S1以1:1:1:3的摩尔比混合在缓冲液(20mM tris-HCl(pH 7.5)、50mM NaCl和50mM MgCl2)中，其中Y1、Y2和Y3的最终浓度均...

【技术特征摘要】

1.一种基于dna四面体纳米结构和产物诱导催化扩增的微小rna-21检测方法，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1)具体为：将微小rna-21样品加入10nm核酸发卡，并在缓冲液(20mm tris-hcl(ph 7.5)、50mm nacl和50mm mgcl2)中孵育20分钟。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于步骤2)具体为：将四条定制的单链寡核苷酸链y1、y2、y3和s1以1:1:1:3的摩尔比混合在缓冲液(20mm...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小军，韩建军，贾利，何君，高飞，陈娟娟，
申请(专利权)人：绵阳市第三人民医院，
类型：发明
国别省市：