一种提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法技术

技术编号:40674940 阅读:40 留言:0更新日期:2024-03-18 19:12
本发明专利技术属于微生物学领域,一种提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法包括:将用于种子活化的种子培养基:酵母粉,甘油,MgSO4·7H2O,KH2PO4,K2HPO4,柠檬酸钠,硫酸铵;用于发酵培养的发酵培养基:20‑30g/L酵母粉,甘油,MgSO4·7H2O,KH2PO4,K2HPO4,柠檬酸钠,硫酸铵,消泡剂。本发明专利技术培养大肠杆菌发酵生产质粒的方法,仅利用现有技术中常规的大肠杆菌为发酵菌株,并通过对种子培养基以及发酵培养基的优化,有效提高了大肠杆菌的菌量,同时在无需对菌株进行基因工程改造的情况下,有效提高了发酵液中目的质粒的含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物学,尤其是提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法


技术介绍

1、质粒是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区dna原有的能够自主复制的较小的dna分子,常用作将目的dna片段送进受体细胞中去进行繁殖和表达的载体工具。而大肠杆菌是领域内最普遍使用的受体细胞。大肠杆菌结构简单,发酵周期短,且遗传背景较为清晰。为实现目的产物的大量生产,一方面需要利用分子生物学技术使外源基因成功表达;另一方面,则必须实现重组菌的高密度发酵。高密度发酵可提高菌体的发酵密度进而大幅度提高产量,降低生产成本。

2、然而,在现有的发酵过程中,通常采用的补料策略有反馈补料法、恒ph补料法、恒溶氧补料法、恒比生长速率补料法与指数流加法等方法,但这些补料策略在产业化也就是放大的过程中,当放大到一定程度后,往往会出现发酵水平不稳定、导致发酵后质粒产量偏低等现象。

3、可见,现有的大肠杆菌发酵过程中,通常的补料方法在产业化的过程中会出现发酵水平不稳定、发酵后质粒产量偏低的技术问题。

4、因此筛选一种既适合大肠杆菌菌体生长又能有利于提高质粒产量的发酵方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,步骤S1中,种子活化步骤的培养温度为35-37℃,控制摇床转速200-220rpm,培养时间为10-12h。

3.根据权利要求1所述的提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,步骤S2中,发酵培养步骤的培养温度为30-37℃,搅拌速度为200-900rpm,通气量为1.2-2.0vvm,培养时间为20-28h。

4.根据权利要求1所述的提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,步骤S2中,还包括在发酵过程中加入补料...

【技术特征摘要】

1.一种提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,步骤s1中,种子活化步骤的培养温度为35-37℃,控制摇床转速200-220rpm,培养时间为10-12h。

3.根据权利要求1所述的提高质粒产量的大肠杆菌发酵方法,其特征在于,步骤s2中,发酵培养步骤的培养温度为30-37℃,搅拌速度为200-900rpm,通气量为1.2-2.0vvm,培养时间为20-28h。

4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员:夏宇辰王海啸余涛
申请(专利权)人:浙江大学绍兴研究院
类型:发明
国别省市:

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