一种加州新小绥螨NAG酶活性检测的底物（VRA-NAG）配制及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种加州新小绥螨NAG酶活性检测的底物(VRA‑NAG)配制及其应用，属于农业领域，将为检测加州新小绥螨NAG酶的活性或非显微镜计数提供一种新方法，VRA‑NAG(5‑[4‑(3‑甲氧基‑苯甲烯‑绕丹宁)]‑3‑乙酸铵‑N‑乙酰氨基‑β‑D‑葡萄糖苷)在NAG酶的作用下会水解出VRA(5‑[4‑(3‑甲氧基‑苯甲烯‑绕丹宁)]‑3‑乙酸铵)。具体的检测步骤为：螨虫样品处理、NAG酶酶解VRA‑NAG、游离VRA的显色反应、测量OD值或者对比比色卡估算加州新小绥螨的数量等过程。将盆中麦麸混匀后,随机抽取3份按上述方法进行检测,从而确保产品质量。利用本发明专利技术方法可以快速检测加州新小绥螨并估算其数量，相较于传统的显微镜视镜计数检测方法，具有方便、精度高、高效、灵敏度高的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业，具体涉及一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用。

技术介绍

1、加州新小绥螨人工培养的检验实际操作中，一般分为飘浮法、直检法、分离法等。

2、飘浮法的操作步骤包括：将1g待测样品放在盛有饱和食盐水的扁形称量瓶或适宜的容器内，然后加30ml饱和食盐水至容器的三分之二处，搅拌均匀，吸取100ul待检液体放置在10倍放大镜或双筒实体显微镜下检视，并估算100ul待检液中螨虫的数量，从而计算出待测样品中的螨虫数量。

3、直检法的具体检测方法为：取a4纸放置在桌面上，用200目的网筛将1g待测样品筛选至a4纸上，在纸上筛15-20次；将a4纸上混有螨虫和麦麸粉的混合物轻敲转移至隔水平台的薄膜上，并迅速将a4纸上残留的少量螨虫用小毛笔挑出至筛出的a4纸上；在隔水平台薄膜上用小毛笔挑出肉眼可看到的爬动的螨虫，在检视镜下计算得到每1g麦麸混合物中螨虫的大约头数。

4、分离法的具体检测方法为：称取1g待测样品，旁边放置一新鲜配制的固体琼脂培养基，16小时后在显微镜下估算吸引到培养基上的螨虫本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种加州新小绥螨NAG酶活性检测的底物(VRA-NAG)配制及其应用，其特征在于，所说底物(VRA-NAG)可检测加州新小绥螨的NAG酶活并为其体内的NAG酶定量，从而间接推算加州新小绥螨的数量已达到替代显微镜镜下计数的目的。

2.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨NAG酶活性检测的底物(VRA-NAG)配制及其应用，其特征在于：所说检测NAG酶活性的底物(VRA-NAG)液配制方式为：VRA-NAG、蔗糖、乙二醇、EDTA-Na2、聚乙烯吡咯烷酮、防腐剂等混合制备而成，其中缓冲液为PH4.6的10mM柠檬酸缓冲液。

3.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨...

【技术特征摘要】

1.一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于，所说底物(vra-nag)可检测加州新小绥螨的nag酶活并为其体内的nag酶定量，从而间接推算加州新小绥螨的数量已达到替代显微镜镜下计数的目的。

2.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所说检测nag酶活性的底物(vra-nag)液配制方式为：vra-nag、蔗糖、乙二醇、edta-na2、聚乙烯吡咯烷酮、防腐剂等混合制备而成，其中缓冲液为ph4.6的10mm柠檬酸缓冲液。

3.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所说底物(vra-nag)在加州新小绥螨nag酶活性检测中的应用涉及一些检测试剂，包括：样品处理液、底物反应液、显色反应液。

4.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所说底物(vra-nag)在加州新小绥螨nag酶活性检测中应用时，检测试剂中具有螨虫样品处理液包括：p40、聚乙烯吡咯烷酮、bsa、蔗糖、防腐剂等混合制备而成，其中缓冲液为ph4.6的10mm柠檬酸缓冲液。

5.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所述底物(vra-nag)在加州新小绥螨nag酶活性检测中应用时，检测试剂中nag酶酶解vra-nag的底物反应液包括：vra-nag、蔗糖、乙二醇、edta-na2、聚乙烯吡咯烷酮、防腐剂等混合制备而成，其中缓冲液为ph4.6的10mm柠檬酸缓冲液。

6.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所说底物(vra-nag)在加州新小绥螨nag酶活性检测中应用时，检测试剂中让酶解游离出的vra显色物的显色液包括：tween-20和防腐剂等混合而成，其中缓冲液为2％的氢氧化钠溶液。

7.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-nag)配制及其应用，其特征在于：所述底物(vra-nag)在加州新小绥螨nag酶活性检测中应用的检测方法包括以下几个步骤：

8.根据权利要求1所述的一种加州新小绥螨nag酶活性检测的底物(vra-na...

【专利技术属性】
技术研发人员：郜安国，黄云坚，谭卓，
申请(专利权)人：安徽弘济生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：