【技术实现步骤摘要】
(一)本专利技术涉及一种芽孢杆菌(bacillus sp.)及其在老芒麦促生方面的应用。
技术介绍
0、(二)
技术介绍
1、老芒麦(elymus sibiricus l.)是是禾本科(gramineae)披碱草属(elymus spp.)的一种丛生多年生草本植物，在我国青海、西藏、四川、新疆、内蒙古、甘肃等地均有分布。老芒麦具有营养价值高、适口性好、抗逆性强等优点，同时老芒麦适应性强、根系发达、耐寒抗旱，是高寒草甸草原群落中的优势种，因此被广泛应用于青藏高原地区的草地建植与恢复改良，对畜牧业和生态建设起着重要作用。
2、老芒麦具有作为牲畜饲料与水土保持的双重作用。老芒麦是一种牲畜喜食、适口性好的优良牧草，其叶量丰富且草质柔软，叶片部位蛋白质、淀粉含量较高，营养丰富，是牲畜摄食的主要部分。老芒麦的生产中，提高其地上部分的长度与鲜重，能够有效提升青饲料产出，缓解当地畜牧业面临的饲料不足。根系是老芒麦吸收水分、吸取无机盐、固定植株的重要器官。较长、表面积较大的根系有利于老芒麦在干旱条件下吸收土壤深层水分，提高其耐旱性。同时，发达的根系可起到固定土壤、减少水土流失的作用，对于青藏高原的生态环境保护具有重要意义。因此，促进老芒麦根系发育、提高其地上部的生物量，可以提高产量及品质，增强老芒麦耐旱等抗逆性。
3、微生物在植物与其生长环境也中占据一定的生态位，形成“植物-环境-微生物”三者的互作关系。微生物可分布在植物叶表、根表、根际、组织内等微生态中，现已被认为是植物第二基因组。微生物通过在植物根际等部位的
技术实现思路
0、(三)
技术实现思路
1、本专利技术目的是提供一种老芒麦根际促生菌--芽孢杆菌mq-3及应用，本专利技术分离自青海高原土的菌株mq-3能够促进老芒麦地上部长度、提高生物量、促进根长，同时还能提高老芒麦对高盐的耐受性，应用于老芒麦栽培，能够提高产量、改良草地、提高耐盐性等，提高经济效益，获得生态效益。
2、本专利技术采用的技术方案是：
3、本专利技术提供一株老芒麦根际促生新菌株--芽孢杆菌(bacillus sp.)mq-3，保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏日期为：2023年7月10日，保藏编号为：cctcc no：m20231243，地址：中国武汉，武汉大学，邮政编码：430072。
4、本专利技术所述芽孢杆菌mq-3划线接种于lb固体培养基，30℃培养24h，观察到白色半透明圆形菌落，菌落表面及边缘粗糙。
5、本专利技术还提供一种芽孢杆菌mq-3制备的老芒麦产量提高制剂，所述老芒麦产量提高制剂为芽孢杆菌mq-3经发酵培养获得的发酵液，离心，收集菌体用无菌水混悬的菌液。
6、优选的，所述老芒麦产量提高制剂按如下方法制备：将芽孢杆菌mq-3划线接种于lb固体培养基，30℃培养24h，获得活化菌株；将活化后的菌株接种于lb液体培养基，30℃、180rpm摇床培养48h，获得mq-3菌株培养液；吸取培养液离心(优选6000rpm离心10min)，弃去上清液，收集菌体用无菌水混悬，即为所述的促生剂。所述lb固体培养基组成为：10g/lnacl、10g/l胰蛋白胨、5g/l酵母提取物，琼脂20g/l，溶剂为水；所述lb液体培养基组成为：10g/l nacl、10g/l胰蛋白胨、5g/l酵母提取物，溶剂为水。
7、优选的，所述菌液的od600为0.5-1.5，更优选1.0。
8、本专利技术还提供一种利用芽孢杆菌mq-3提高老芒麦生物量的方法，所述的方法为：将老芒麦种子加入芽孢杆菌mq-3的菌液中，室温浸泡20-50min(优选30min)，然后播种于土壤中，在25-32℃、每日10-14h光照条件下培养5-10d(优选在28℃、每日12h光照条件下培养7d，每日加入蒸馏水维持土壤水分)，接着向土壤中加入ms液体培养基后，继续在相同条件下培养5-10d(优选7d，每日加入蒸馏水维持土壤水分)，获得生物量提高(即生长加快、地上部分和根部长度增加、重量提高、抗逆性提高、盐胁迫缓解)的老芒麦；所述芽孢杆菌mq-3的菌液为芽孢杆菌mq-3经发酵培养获得的发酵液，离心，收集菌体用无菌水混悬的菌液。
9、优选的，所述ms液体培养液组成为：1.9g/l硝酸钾，1.65g/l硝酸铵，170mg/l磷酸二氢钾，370mg/l硫酸镁，440mg/l氯化钙，0.83mg/l碘化钾，6.2mg/l硼酸，22.3mg/l硫酸锰，8.6mg/l硫酸锌，0.25mg/l钼酸钠，0.025mg/l硫酸铜，0.025mg/l氯化钴，37.3mg/l乙二胺四乙酸二钠，27.8mg/l feso4，100mg/l肌醇，2mg/l甘氨酸，0.1mg/l盐酸硫胺素，0.5mg/l盐酸吡哆醇，0.5mg/l烟酸，溶剂为水，ph值为5.7±0.1。
10、优选的，所述ms液体培养基加入土壤中的量以土壤体积计为0.01-0.1ml/g(优选0.02ml/g)。
11、优选的，所述土壤为河沙。
12、本专利技术还提供一种利用所述芽孢杆菌mq-3培育耐盐老芒麦的方法，所述方法为：将老芒麦种子播种于土壤中，在25-32℃、每日10-14h光照条件下培养5-10d(优选在28℃、每日12h光照条件下培养7d，每日加入蒸馏水维持土壤水分)，接着向土壤中加入ms液体培养基、菌液和nacl水溶液后，继续在相同条件下培养5-10d(优选7d，每日加入蒸馏水维持土壤水分)，获得耐盐的老芒麦；所述菌液为芽孢杆菌mq-3经发酵培养获得的发酵液，离心，取沉淀用无菌水混悬的菌液。所述菌液的od600均为0.5-1.5，更优选1.0。
13、优选的，ms液体培养基加入量以土壤质量计为0.01-0.1ml/g(更优选0.02ml/g)，加入土壤中的菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.老芒麦根际促生芽孢杆菌(Bacillus sp.)MQ-3，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为：2023年7月10日，保藏编号为：CCTCC NO：M 20231243，地址：中国武汉，武汉大学，邮政编码：430072。
2.一种权利要求1所述芽孢杆菌MQ-3制备的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述产量提高制剂为芽孢杆菌MQ-3经发酵培养获得的发酵液，离心，收集菌体用无菌水混悬的菌液。
3.如权利要求2所述的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述制剂按如下方法制备：将芽孢杆菌MQ-3划线接种于LB固体培养基，30℃培养24h，获得活化菌株；将活化后的菌株接种于LB液体培养基，30℃、180rpm摇床培养48h，获得MQ-3菌株培养液；吸取培养液离心，弃去上清液，收集菌体用无菌水混悬，获得的菌液即为所述的制剂。
4.如权利要求3所述的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述菌液的OD600为0.5-1.5。
5.一种利用权利要求1所述芽孢杆菌MQ-3提高老芒麦生物量的方法，其特征在于，所述的方法为：将老芒麦种子加入芽孢杆菌MQ-
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述MS液体培养液组成为：1.9g/L硝酸钾，1.65g/L硝酸铵，170mg/L磷酸二氢钾，370mg/L硫酸镁，440mg/L氯化钙，0.83mg/L碘化钾，6.2mg/L硼酸，22.3mg/L硫酸锰，8.6mg/L硫酸锌，0.25mg/L钼酸钠，0.025mg/L硫酸铜，0.025mg/L氯化钴，37.3mg/L乙二胺四乙酸二钠，27.8mg/L FeSO4，100mg/L肌醇，2mg/L甘氨酸，0.1mg/L盐酸硫胺素，0.5mg/L盐酸吡哆醇，0.5mg/L烟酸，溶剂为水，pH值为5.7±0.1。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述MS液体培养基加入土壤中的量以土壤体积计为0.01-0.1mL/g。
8.一种利用权利要求1所述芽孢杆菌MQ-3培育耐盐老芒麦的方法，其特征在于，所述方法为：将老芒麦种子播种于土壤中，在25-32℃、每日10-14h光照条件下培养5-10d，接着向土壤中加入MS液体培养基、菌液和NaCl水溶液后，继续在相同条件下培养5-10d，获得耐盐的老芒麦；所述菌液为芽孢杆菌MQ-3经发酵培养获得的发酵液，离心，取沉淀用无菌水混悬的菌液。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述菌液的OD600均为0.5-1.5＝。
10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，MS液体培养基加入量以土壤质量计为0.01-0.1mL/g，加入土壤中的菌液量以土壤质量计为0.05-1mL/g；所述NaCl水溶液浓度为5-20g/L，所述NaCl水溶液加入量使得土壤质量含盐量为0.1-1％。
...【技术特征摘要】
1.老芒麦根际促生芽孢杆菌(bacillus sp.)mq-3，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为：2023年7月10日，保藏编号为：cctcc no：m 20231243，地址：中国武汉，武汉大学，邮政编码：430072。
2.一种权利要求1所述芽孢杆菌mq-3制备的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述产量提高制剂为芽孢杆菌mq-3经发酵培养获得的发酵液，离心，收集菌体用无菌水混悬的菌液。
3.如权利要求2所述的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述制剂按如下方法制备：将芽孢杆菌mq-3划线接种于lb固体培养基，30℃培养24h，获得活化菌株；将活化后的菌株接种于lb液体培养基，30℃、180rpm摇床培养48h，获得mq-3菌株培养液；吸取培养液离心，弃去上清液，收集菌体用无菌水混悬，获得的菌液即为所述的制剂。
4.如权利要求3所述的老芒麦产量提高制剂，其特征在于，所述菌液的od600为0.5-1.5。
5.一种利用权利要求1所述芽孢杆菌mq-3提高老芒麦生物量的方法，其特征在于，所述的方法为：将老芒麦种子加入芽孢杆菌mq-3的菌液中，室温浸泡20-50min，然后播种于土壤中，在25-32℃、每日10-14h光照条件下培养5-10d，接着向土壤中加入ms液体培养基后，继续在相同条件下培养5-10d，获得生物量提高的老芒麦；所述芽孢杆菌mq-3的菌液为芽孢杆菌mq-3经发酵培养获得的发酵液，离心，收集菌体用无菌水混悬的菌液。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述ms液体...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁瑞琦，黄泽耀，钟莉，曹龙雨，郑何紫阁，汪琨，朱廷恒，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：
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