一种Argonaute介导的DNAzyme串联平台检测耐药菌的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种Argonaute介导的DNAzyme串联生物传感平台同时超灵敏双靶点检测耐药菌的方法及应用，称为STAND，利用所述方法，mecA和nuc基因的靶标被巧妙地转换为FAM和ROX荧光信号，能够同时在一个反应中检测nuc和mecA基因。检测限低至1CFU/mL，动态范围为1至10<supgt;8</supgt;CFU/mL，该检测方法准确，检测范围较宽，方法简单快捷，易操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物检测，尤其是一种argonaute介导的dnazyme串联生物传感平台同时超灵敏双靶点检测耐药菌的方法及应用，命名为stand(simultaneous dual-gene and ultra-sensitive detection for methicillin-resistant staphylococcusaureus using argonaute-mediated dnazyme tandem detection platform)。

技术介绍

1、食源性疾病是指通过摄食进入人体的有毒或有害生物性病原体等致病因子所造成的疾病，其发病率居各类疾病总发病率的前列，是危害人类健康的重要公共卫生问题之一。据估计，全世界每年有数亿人因食用受污染的食物而患病，造成数十万人死亡，并在低收入和中等收入国家造成巨大的经济损失。食源性疾病主要由致病性微生物引起，尤其是大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌等食源性致病菌。此外，随着耐药型食源性病原体的出现，抗生素耐药的食源性感染给食品安全和公共卫生造成巨大威胁，并进一步加重了经济社会发展本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Argonaute介导的DNAzyme串联平台双靶点检测耐药菌的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PfAgo反应体系中，nuc和mecA基因引导DNAs各包括3条相应的引导DNA即guide DNA 1、guide DNA2、guide DNA3，三条guide DNA总浓度为0.5μM，三条guide DNA的摩尔浓度比为1:1:1；

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述荧光探针A为与DNAzyme互补的5’ROX和3’BHQ2双标记；所述荧光探针B为与DNAzyme互补的5’FAM和3...

【技术特征摘要】

1.一种argonaute介导的dnazyme串联平台双靶点检测耐药菌的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述pfago反应体系中，nuc和meca基因引导dnas各包括3条相应的引导dna即guide dna 1、guide dna2、guide dna3，三条guide dna总浓度为0.5μm，三条guide dna的摩尔浓度比为1:1:1；

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述荧光探针a为与dnazyme互补的5’rox和3’bhq2双标记；所述荧光探针b为与dnazyme互补的5’fam和3’bhq1双标记。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：马龙，李雅茹，满淑丽，唐小琴，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：