【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物，具体涉及一种生物有机水溶肥及其制备方法与应用。
技术介绍
1、随着生物技术及水肥一体化技术的快速发展，生物肥料的应用越来越广泛，对可随水滴灌或冲施、集微生物和可溶性有机质于一体，具有改良土壤、促生抗病等多种功能的新型生物肥料的需求越来越大，开发适用于“水肥一体化”的生物有机水溶肥也成为一个研究热点。
2、目前，生物有机水溶肥主要采用水溶性有机原料进行生产，黄腐酸、氨基酸、腐殖酸、糖蜜、木醋液等可溶性有机物是最常用的生产原料，但受原料来源和价格限制，难以大规模推广应用。采用发酵法和酶解法，将不溶性有机原料转化为水溶性物质，再用于生产生物有机水溶肥，是具发展潜力的生产方法，但目前研究较少，仅有制革下脚料、低值鱼下脚料等原料用于制备水溶性有机肥的报道。
3、卡那霉素发酵废渣是抗生素发酵工业产生的发酵废渣，富含蛋白质、氨基酸、碳水化合物、中微量元素以及残余的菌丝体等物质，资源丰富，价格便宜，是采用发酵法和酶法生产水溶性生物有机肥的良好原料。但卡那霉素发酵废渣含有残留的卡那霉素，这为其综合利用带来了很多困难。采用酶法进行水解时，因卡那霉素无法被降解，会残留在酶解物中，存在风险因素。采用发酵法进行水解时，因卡那霉素对发酵微生物具有抑制作用，会导致发酵困难，且卡那霉素如果不能被微生物降解，也会残留到产品中去，因此必须选用能降解卡那霉素的微生物进行发酵。
4、申请人之前获得了一株淤泥大洋芽孢杆菌papm-a1(cn202211697422x)，其保藏编号为：cgmcc no.25969
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种生物有机水溶肥及其制备方法与应用，该生物有机水溶肥是以堆肥芽孢杆菌(bacillus stercoris)papm-y1-2为有效菌株发酵和酶解卡那霉素发酵废渣获得发酵液，并复配低值鱼酶解物干粉制备而成，具有改良土壤、促进作物生长、防治番茄软腐病等作用。
2、本专利技术首先自卡那霉素发酵废渣堆肥中分离到一株堆肥芽孢杆菌(bacillusstercoris)papm-y1-2，该菌株已经于2023年6月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：cgmcc no.27681。该菌株具有降解卡那霉素、解蛋白、产iaa、拮抗番茄软腐病致病菌等作用。
3、本专利技术还提供了上述堆肥芽孢杆菌papm-y1-2菌株的发酵方法，包括菌种活化、三角瓶种子制备、液体种子罐菌种制备和液态发酵罐发酵等步骤。其中，菌种活化采用lb培养基试管斜面，培养温度为35-37℃，培养时间为20-24h；三角瓶种子制备和液体种子罐菌种制备均采用lb液体培养基，培养温度为32-37℃，震荡或搅拌转速180-220rpm，培养时间为18-30h；液态发酵罐发酵的接种量为2％-4％(体积比)，于32-37℃培养36-48h，即获得堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液。
4、上述液态发酵罐发酵采用复合培养基，其配方为：卡那霉素发酵废渣干粉100-150g/l、磷酸二氢钾0.3-0.8g/l、硫酸镁0.3-0.8g/l、中性蛋白酶0.8-1.2g/l，于50-55℃酶解60-90min后灭菌，初始ph6.5-7.5。优选为：卡那霉素发酵废渣干粉120g/l、磷酸二氢钾0.5g/l、硫酸镁0.5g/l、中性蛋白酶1.0g/l，初始ph6.5-7.5。
5、本专利技术还提供了一种以上述堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液为主要成分的生物有机水溶肥，其组成为：以质量份数计，堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液60-80份、低值鱼酶解物干粉19.85-39.95份、卡松0.05-0.15份。优选的，以质量份数计，堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液70份、低值鱼酶解物干粉29.9份、卡松0.1份。
6、上述生物有机水溶肥，其制备方法为：将低值鱼酶解物干粉与卡松慢慢加入发酵液，边添加边搅拌，至均匀无块状颗粒为止，即为本专利技术所述生物有机水溶肥，其有效成分含量为：堆肥芽孢杆菌papm-y1-2活菌数≥2×109cfu/ml、有机质含量≥300g/l。
7、所述低值鱼酶解物干粉的制备方法为：将低值鱼粉配制成底物浓度为8-12％的料液，加热使蛋白质适度变性；溶液冷却后，加入复合蛋白酶，加酶量为2.5-3.5％(占底物百分比)，于50-60℃酶解5-8h，然后升温灭酶，再迅速冷却至50℃以下；采用板框过滤机进行固液分离，得到澄清滤液；滤液真空浓缩后喷雾干燥。所述复合蛋白酶中碱性蛋白酶酶活≥5万u/g，中性蛋白酶酶活≥3万u/g。
8、本专利技术还公开了上述生物有机水溶肥的使用方法，其特征是，用于作物栽培时，以重量份数计，用水稀释100-1000倍后冲施，每亩每次用量5-10kg，作物全生育期施用1-3次。
9、本专利技术的优势是：
10、1、本专利技术的堆肥芽孢杆菌papm-y1-2具有降解卡那霉素、解蛋白、产iaa、拮抗番茄软腐病致病菌等作用，以该菌株作为功能菌生产的生物有机水溶肥具有改良土壤、促进作物生长、防治番茄软腐病等作用。
11、2、本专利技术采用卡那霉素发酵废渣和低值鱼酶解物为主要原料制备生物有机水溶肥，不仅有利于降低生产成本，拓宽了原料来源，还有利于卡那霉素发酵废渣的无害化和资源化利用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株堆肥芽孢杆菌(Bacillus stercoris)PAPM-Y1-2，所述菌株的保藏编号为：CGMCCNo.27681。
2.权利要求1所述的堆肥芽孢杆菌菌株PAPM-Y1-2在产IAA、解蛋白、降解卡那霉素和拮抗番茄软腐病致病菌方面的应用。
3.权利要求1所述的堆肥芽孢杆菌菌株PAPM-Y1-2的发酵方法，包括菌种活化、三角瓶种子制备、液体种子罐菌种制备和液态发酵罐发酵；其特征是，菌种活化采用LB培养基试管斜面，培养温度为35-37℃，培养时间为20-24h；三角瓶种子制备和液体种子罐菌种制备均采用LB液体培养基，培养温度为32-37℃，震荡或搅拌转速180-220rpm，培养时间为18-30h；液态发酵罐发酵的接种量为2％-4％，于32-37℃培养36-48h，获得堆肥芽孢杆菌PAPM-Y1-2发酵液；所述液态发酵罐发酵采用复合培养基，具体为：卡那霉素发酵废渣干粉100-150g/L、磷酸二氢钾0.3-0.8g/L、硫酸镁0.3-0.8g/L、中性蛋白酶0.8-1.2g/L，于50-55℃酶解60-90min后灭菌，初始pH6.5-7.5。<...
【技术特征摘要】
1.一株堆肥芽孢杆菌(bacillus stercoris)papm-y1-2，所述菌株的保藏编号为：cgmccno.27681。
2.权利要求1所述的堆肥芽孢杆菌菌株papm-y1-2在产iaa、解蛋白、降解卡那霉素和拮抗番茄软腐病致病菌方面的应用。
3.权利要求1所述的堆肥芽孢杆菌菌株papm-y1-2的发酵方法，包括菌种活化、三角瓶种子制备、液体种子罐菌种制备和液态发酵罐发酵；其特征是，菌种活化采用lb培养基试管斜面，培养温度为35-37℃，培养时间为20-24h；三角瓶种子制备和液体种子罐菌种制备均采用lb液体培养基，培养温度为32-37℃，震荡或搅拌转速180-220rpm，培养时间为18-30h；液态发酵罐发酵的接种量为2％-4％，于32-37℃培养36-48h，获得堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液；所述液态发酵罐发酵采用复合培养基，具体为：卡那霉素发酵废渣干粉100-150g/l、磷酸二氢钾0.3-0.8g/l、硫酸镁0.3-0.8g/l、中性蛋白酶0.8-1.2g/l，于50-55℃酶解60-90min后灭菌，初始ph6.5-7.5。
4.权利要求3所述发酵方法制备的堆肥芽孢杆菌papm-y1-2发酵液。
【专利技术属性】
技术研发人员：孙中涛，刘丽英，史庆华，赵晓晓，辛寒晓，王泽利，孙国科，陈君君，贾思珂，刘红，杨东成，丁凯华，
申请(专利权)人：山东佐田氏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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