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一种Cas12a变体HyperFi-As及其在基因编辑中的应用制造技术

技术编号:40574579 阅读:27 留言:0更新日期:2024-03-06 17:15
本发明专利技术提供了一种Cas12a变体HyperFi‑As及其在基因编辑中的应用,所述Cas12a变体HyperFi‑As为II类V型CRISPR蛋白,氨基酸序列如SED ID NO.1所示。本发明专利技术首次在II类V型CRISPR蛋白AsCas12a的基础上获得更高保真度的变体HyperFi‑As;所述变体HyperFi‑As在真核生物细胞内全基因组脱靶效率明显低于原始AsCas12a。HyperFi‑As的发现进一步扩大了基因编辑工具的种类,对基础科研和临床治疗具有十分重要的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因编辑,特别涉及一种cas12a变体hyperfi-as及其在基因编辑中的应用。


技术介绍

1、自2013年以来,基因编辑技术取得了突破性进展,此项技术已经在基础科学研究、医药、临床、生物技术等许多领域引起了新的变革。除了具有代表性的cas9系统之外,cas12,又名cpf1,作为又一种被发现的具有基因编辑效应的crispr系统新成员,极大的扩大了基因编辑系统靶点的可编辑范围,相比于cas9系统,cas12a所具有的加工前提rna的功能,为其介导多基因编辑提供了相比与cas9系统更为便捷高效的编辑能力。除此之外,相比于cas9的向导rna,cas12a的向导rna组成更为简单,设计更为方便。

2、2015年,张峰团队首次发现了cas9系统之外的另外一种具有基因编辑能力的新成员,cas12a,又名cpf1,将其划分到crispr系统2类v型中。相比于cas9系统,cas12a的编辑效率与cas9的效率相当,在有些靶点低于cas9。cas12a的脱靶率极低,相比于cas9脱靶率高的特性,cas12a是一种安全的基因编辑工具。cas1本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Cas12a变体HyperFi-As,其特征在于,所述Cas12a变体HyperFi-As为II类V型CRISPR蛋白,氨基酸序列如SED ID NO.1所示。

2.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体表达权利要求1所述的Cas12a变体HyperFi-As。

3.根据权利要求2所述的重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包括质粒载体、病毒载体和噬菌体载体中的一种。

4.一种重组菌或重组细胞系或重组病毒,其特征在于,包含权利要求2所述的重组表达载体。

5.一种重组病毒,其特征在于,所述重组病毒采用权利要求3所述的病毒载...

【技术特征摘要】

1.一种cas12a变体hyperfi-as,其特征在于,所述cas12a变体hyperfi-as为ii类v型crispr蛋白,氨基酸序列如sed id no.1所示。

2.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体表达权利要求1所述的cas12a变体hyperfi-as。

3.根据权利要求2所述的重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包括质粒载体、病毒载体和噬菌体载体中的一种。

4.一种重组菌或重组细胞系或重组病毒,其特征在于,包含权利要求2所述的重组表达载体。

5.一种重组病毒,其特征在于,所述重组病毒采用权利要求3所述的病毒载体包装获得,所述重组病毒包括表达权利要求1所述的cas12a变体hyperfi-as的腺病毒或慢病毒。

6.一种包括权利要求1所述cas12a变...

【专利技术属性】
技术研发人员:殷雷周进雷骏陈鹏刘欢王宏健
申请(专利权)人:武汉大学
类型:发明
国别省市:

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