一种基于RAA-LFD法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于RAA‑LFD法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合及其应用，所述引物和探针组合中，16s rRNA引物如SEQ ID NO.1‑2所示，ureA引物如SEQ ID NO.4‑5所示，16s rRNA探针如SEQ ID NO.3所示，ureA探针如SEQ ID NO.6所示。利用本发明专利技术的引物和探针组合，可以实现RAA‑LFD检测幽门螺杆菌，该反应体系在37℃条件下，仅需30min即可获得结果，并且辅助侧向流动试纸条(LFD)，可用于快速、可视化、现场检测幽门螺杆菌，辅助临床诊断HP的感染，进一步控制传播，对已患病人群的的病情实时监测和愈后诊断。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于幽门螺杆菌检测，具体涉及一种基于raa-lfd法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合及其应用。

技术介绍

1、在所有可引发胃肠道肿瘤中的致病因素中，幽门螺旋杆菌(hp)是最重要的致病因素之一。现阶段临床针对hp感染的治疗，主要是“三联疗法”和“四联疗法”，仅能依靠医生的经验以及院内的抗生素用药偏好。因各地区流行的菌株耐药情况不同，容易造成一次治疗根除率不高，浪费医疗资源，因此临床迫切需要一种快速、灵敏且高特异性的现场检测方法，用于预防hp的进一步传播和对已患病人群的的病情实时监测和愈后诊断。

2、hp感染有多种检测方法，胃黏膜组织活检作为hp诊断的金标准，具有侵入性，因此不适用于筛查或普查。rut机制是hp产生的尿素酶可分解检测剂中的尿素，生成nh3与co2，使苯酚磺酞由黄变红，来诊断是否hp阳性。但hp在胃内的分布不一，其检测结果受细菌数量、取材部位、观察时间等多种因素的影响。细菌培养阳性是其诊断的金标准，但是由于hp是一种微需氧菌，需要严格的培养条件，这对医院检验科的技术设备均有较高要求。血清hp检查的主要是ig g抗体，其本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于RAA-LFD法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合，其特征在于，包括16s rRNA RAA正向引物、16s rRNA RAA反向引物、ureA RAA正向引物、ureA RAA反向引物、16s rRNA RAA探针、ureA RAA探针；

2.根据权利要求1所述一种基于RAA-LFD法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合，其特征在于，所述16s rRNA RAA反向引物的5’端标记有Biotin；所述16s rRNA RAA探针的5’端进行荧光基团FAM修饰，第31位碱基G被THF替代，3’端修饰C3 spacer。

3.根据权利要求1所述一种...

【技术特征摘要】

1.一种基于raa-lfd法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合，其特征在于，包括16s rrna raa正向引物、16s rrna raa反向引物、urea raa正向引物、urea raa反向引物、16s rrna raa探针、urea raa探针；

2.根据权利要求1所述一种基于raa-lfd法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合，其特征在于，所述16s rrna raa反向引物的5’端标记有biotin；所述16s rrna raa探针的5’端进行荧光基团fam修饰，第31位碱基g被thf替代，3’端修饰c3 spacer。

3.根据权利要求1所述一种基于raa-lfd法用于检测幽门螺杆菌感染的引物和探针组合，其特征在于，所述urea raa反向引物的5’端标记有tamra；所述urea raa探针的5’端标记有dig，第31位碱基c被thf替代，3’端修饰c3spacer。

4.如权利要求1-3任一项所述的引物和探针组合在制备幽门螺杆菌的检测试剂、检测试剂盒或检测试纸条中的应用。

5.一种幽门螺杆菌的raa-lfd检测试剂盒，其特征在于，包括如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：何帮顺，尹思洁，聂珍琳，刘阳河，邰萍，范柏月，熊梦秋，
申请(专利权)人：南京市第一医院，
类型：发明
国别省市：