【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物制剂领域，尤其涉及一种nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物、制备方法及其应用。
技术介绍
1、仿生脂质体是近年来利用细胞膜仿生工程技术发展起来了的一种靶向脂质体。它通过将天然细胞膜或人工改造后的细胞膜均匀地“涂抹”到脂质体等纳米药物表面，达到“伪装”效果，躲避免疫系统识别，实现纳米药物安全、高效、靶向递送。目前，包括正常的红细胞、免疫细胞、血小板、癌细胞等在内的多种细胞膜已被修饰到不同的纳米药物表面用于炎症、病毒、细菌感染和肿瘤的高效治疗。其中，自然杀伤细胞（natural killer cell，nk）是人体固有的一种免疫细胞，在抗炎、清除衰老细胞方面发挥重要作用。最近研究发现：pd（帕金森症）患者大脑黑质区有大量的nk细胞（自然杀伤细胞）。nk细胞耗竭加重了pd的运动症状和发病率。同时受损神经元释放α-syn（α-突触核蛋白）被神经胶质细胞摄取后，会促进神经胶质细胞的活化，进一步促进帕金森病的发展。近期研究者在体外实验证明了人体来源的nk细胞可以通过tlr4（tlr是单个的跨膜非催化性蛋白质）高效内吞并降解α-突触核蛋白，这有助于pd的治疗。
2、另外，nkg2d是表达在所有nk细胞上的受体，其配体在细胞衰老过程中高表达，而在正常细胞上几乎不表达，这意味着nk细胞具有特异性识别衰老细胞的潜力。发展nk细胞膜仿生的纳米药物，入脑后占据释放的α-syn位点，抑制神经胶质细胞活化，同时通过nkg2d受体识别受损神经元增强摄取，协同治疗pd具有很大的应用潜力。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种包封率高、稳定性好，能抵抗免疫细胞的吞噬和清除，高效地将姜黄素药物送到靶点，有效地提高纳米药物的利用度的nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物。
2、本专利技术还提供了上述nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，该方法步骤简单，操作方便，该方法制得的药物包封率高、稳定性好，且药物利用度高。
3、本专利技术还提供了一种上述nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物在治疗帕金森症中的应用，该应用通过姜黄素药物有效抑制α-突触核蛋白对神经元的损伤，同时利用nk细胞膜（自然杀伤细胞）吸附大量的细胞炎症因子和α-突触核蛋白，通过nk细胞膜高效的抵抗免疫细胞的吞噬，同时特异性的靶向靶点（帕金森病），通过姜黄素联合nk细胞膜实现帕金森症的协同治疗。
4、本专利技术所述nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物所采用的技术方案是：该脂质体药物包括以下成分：姜黄素、磷脂、胆固醇和nk细胞膜。
5、上述方案可见，该药物采用nk细胞膜包覆的姜黄素脂质体纳米药物，能有效的避免脑膜淋巴管中的巨噬细胞等免疫细胞的吞噬，入脑后可通过nk细胞膜受体蛋白与黑质处受损的多巴胺神经元特异性相互作用，将姜黄素药物高效的递送到靶点。
6、上述nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法包括以下步骤：
7、（1）薄膜水化法制备脂质体：称取50 mg大豆卵磷脂，25 mg胆固醇溶解于氯仿溶液中；称取0.25 mg姜黄素溶解于无水甲醇中；在圆底烧瓶中充分混合这两种液体后，在旋蒸仪上蒸干成膜；加入5ml pbs水化薄膜后，将溶液置于液氮和65℃水域中反复处理5次，再将处理后的溶液经过装有聚碳酸酯膜的脂质体挤压器反复挤压20次，后用透析法除去游离的姜黄素，制备的脂质体置于4℃避光保存；
8、（2）nk细胞膜仿生姜黄素脂质体的制备：将nk细胞膜和上述姜黄素脂质体按照蛋白：脂质质量比为1：600的比例混和，充分混匀后，将该混合液用装有聚碳酸酯膜的脂质体挤压器挤压20次，得到的溶液置于透析袋中，在4℃避光条件下透析2h除去游离nk细胞膜，得到nk细胞膜仿生姜黄素脂质体药物，4℃条件下避光保存。
9、上述方案可见，该方法步骤简单，操作方便，该方法制得的药物包封率高、稳定性好，且药物利用度高。
10、一种上述nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物在治疗帕金森症中的应用。
11、上述方案可见，在该应用中，姜黄素具有清除ros，抑制α-突触核蛋白的聚集的功效；修饰在姜黄素脂质体表面的nk细胞膜可以特异性识别受损神经元上高表达的配体蛋白，增强姜黄素脂质体的靶向摄取效率，同时，nk细胞可以通过受体吸附被受损神经元释放的α-突触核蛋白，抑制星型胶质细胞的活化，还可以通过受体吸附tnf-α，il-1贝塔等炎性因子，发挥抗炎的作用；二者双管齐下，有效地抑制pd的病理进程，提高pd的疗效。
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1.一种NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物，其特征在于，所述脂质体药物包括以下成分：姜黄素、磷脂、胆固醇和NK细胞膜。
2.一种如权利要求1所述的NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
3. 根据权利要求2所述的NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述旋蒸仪在 27℃环境下工作，其转速为60rpm。
4.根据权利要求2所述的NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，处理后的溶液依次经过装有膜孔径分别为200nm、100nm和50nm的装有聚碳酸酯膜的脂质体挤压器反复挤压20次。
5. 根据权利要求2所述的NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，将该混合液依次用装有膜孔径分别为200nm、100nm 和50nm的聚碳酸酯膜的脂质体挤压器挤压20次。
6.一种如权利要求1所述的NK细胞膜包裹姜黄素脂质体药物在治疗帕金森症中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物，其特征在于，所述脂质体药物包括以下成分：姜黄素、磷脂、胆固醇和nk细胞膜。
2.一种如权利要求1所述的nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
3. 根据权利要求2所述的nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述旋蒸仪在 27℃环境下工作，其转速为60rpm。
4.根据权利要求2所述的nk细胞膜包裹姜黄素脂质体药物的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁振，范荣爱，宿金祥，耿晓瑞，卢若洋，
申请(专利权)人：珠海中信大有科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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