【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体外检测，属于乳酸检测，具体涉及一种乳酸检测冻干试剂球、制备方法及微流控检测芯片。
技术介绍
1、乳酸是糖代谢的中间产物，主要来源于骨骼肌、脑、皮肤、肾髓质和红细胞。血液中乳酸浓度和这些组织产生乳酸的速率以及肝脏对乳酸的代谢速度有关，约65％的乳酸由肝脏代谢。血浆乳酸升高可见于剧烈运动或脱水导致的生理性升高，以及以下原因导致的病理性升高：(1)休克、心力衰竭、血液病和肺功能不全时出现组织严重缺氧，导致丙酮酸还原成乳酸的酵解作用增加，促使乳酸水平升高；(2)某些肝脏疾病时由于肝脏对乳酸的清除率减低，可出现血乳酸升高；(3)糖尿病患者胰岛素绝对或/和相对不足，机体不能有效利用血糖，丙酮酸大量还原成乳酸，导致体内乳酸堆积，出现乳酸酸中毒；(4)服用某些药物或毒物(如乙醇、甲醇、水杨酸等)亦可引起血乳酸增高。因此测定血浆中的乳酸浓度对临床诊断有重要的意义。
2、乳酸的测定方法有化学法、气相色谱法、电化学法、酶电极感应法和酶催化法。化学法操作复杂，时间长，准确性差。气相色谱法准确性好，样本量少，但需要气相色谱仪，不能用于常规试验室。电化学法灵敏度高，线性范围宽，快速、简便、准确，但需要专用设备。酶催化法灵敏度高，线性范围宽且适用于自动化分析仪，是乳酸测定较理想的常用方法。根据反应原理不同，酶催化法可分为乳酸脱氢酶法和乳酸氧化酶法。
3、乳酸脱氢酶法有紫外法和偶联四氮唑盐的比色法。乳酸氧化酶法的检测原理为：首先在乳酸氧化酶的作用下，乳酸和氧气反应生成丙酮酸和过氧化氢，然后在过氧化物酶的作用下，过氧化氢、
4、乳酸氧化酶法灵敏度高，重复性好，线性范围宽。但过氧化物酶对底物的专一性较差，干扰反应严重，分析准确度差；乳酸氧化酶在液体试剂状态下不稳定，在温度偏高的情况下容易失活；且，现有乳酸检测试剂依赖实验室中的大型全自动生化分析仪，难以随身携带即时诊断。
技术实现思路
1、鉴于现有技术中的上述缺陷或不足，本专利技术旨在提供一种稳定性好、抗干扰能力强、便于即时诊断的乳酸检测冻干试剂球、制备方法及微流控检测芯片。
2、本专利技术的目的之一在于提供一种乳酸检测冻干试剂球，包括r1冻干试剂球和r2冻干试剂球。
3、所述r1冻干试剂球包括以下原料：
4、
5、所述r2冻干试剂球包括以下原料：
6、
7、优选地，所述第一缓冲液和第二缓冲液各自独立地包括磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(tris)缓冲液、n-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(taps)缓冲液或4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(hepes)缓冲液中的一种或几种。
8、优选地，所述第一稳定剂和第二稳定剂各自独立地包括蔗糖、果糖、甘油或牛血清白蛋白中的一种或几种。
9、优选地，所述第一赋形剂和第二赋形剂各自独立地包括甘露醇、肌醇、peg3350、peg8000、葡聚糖1万或葡聚糖4万中的一种或几种。
10、优选地，试剂r1和试剂r2的ph值各自独立地为6～9。
11、优选地，所述去胆红素干扰剂包括亚铁氰化钾、高铁氰化钾或胆红素氧化酶中的一种或几种。
12、本专利技术的目的之二在于提供一种乳酸检测冻干试剂球的制备方法，所述制备方法包括：
13、首先各自配制试剂r1和试剂r2，然后分别将试剂r1和试剂r2结成冰球，然后分别将试剂r1冰球和试剂r2冰球进行冻干。
14、优选地，试剂r1的制备方法包括：
15、首先在水中加入第一缓冲液，充分溶解后，加入3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠和去胆红素干扰剂，然后调节溶液的ph值，然后依次加入第一稳定剂和第一赋形剂，然后加入抗坏血酸酶和过氧化物酶后，对溶液进行定容。
16、优选地，试剂r2的配制方法包括：
17、首先在水中加入第二缓冲液，充分溶解后，加入4-氨基安替比林盐酸盐，然后调节溶液的ph值，然后依次加入第二稳定剂和第二赋形剂，然后加入乳酸氧化酶后，对溶液进行定容。
18、优选地，分别将试剂r1和试剂r2通过定量控制滴珠点胶机直接滴在液氮中结成冰球。
19、优选地，分别将试剂r1冰球和试剂r2冰球在真空冷冻干燥机中进行冻干。
20、优选地，r1冻干试剂球和r2冻干试剂球的体积各自独立地为3.0～4.0μl。
21、本专利技术的目的之三在于提供一种微流控检测芯片，所述微流控检测芯片包括如上所述的乳酸检测冻干试剂球。
22、优选地，在空气湿度为8％的环境中，将乳酸检测试剂球封装于微流控芯片中。
23、本专利技术的有益效果包括：
24、本专利技术将乳酸检测试剂分为两部分，并制成r1冻干试剂球和r2冻干试剂球，提高了试剂的稳定性和测试的准确性，可以延长存储时间；r1冻干试剂球中，抗坏血酸酶用于消除血液中维生素c对trinder反应的干扰，去胆红素干扰剂用于消除胆红素的干扰，抗坏血酸酶和去胆红素干扰剂的添加使冻干试剂球具有更强的抗干扰能力；将3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠加入r1冻干试剂球中，将4-氨基安替比林盐酸盐加入r2冻干试剂球中，避免了在检测之前3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠和4-氨基安替比林盐酸盐发生反应，另外也避免了r1冻干试剂球中的过氧化物酶与4-氨基安替比林盐酸盐发生反应，进一步保证了测试的准确度。另外，r1冻干试剂球和r2冻干试剂球特别适用于封装于微流控检测芯片中，利用便携式自动生化分析仪，有利于实现乳酸的体外即时诊断。
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1.一种乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，包括R1冻干试剂球和R2冻干试剂球；
2.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一缓冲液和第二缓冲液各自独立地包括磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(TAPS)缓冲液或4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)缓冲液中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一稳定剂和第二稳定剂各自独立地包括蔗糖、果糖、甘油或牛血清白蛋白中的一种或几种。
4.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一赋形剂和第二赋形剂各自独立地包括甘露醇、肌醇、PEG3350、PEG8000、葡聚糖1万或葡聚糖4万中的一种或几种。
5.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，试剂R1和试剂R2的pH值各自独立地为6～9。
6.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述去胆红素干扰剂包括亚铁氰化钾、高铁氰化钾或胆红素氧化酶中的一种或几种。
7.如权利要求1～
8.如权利要求7所述的乳酸检测冻干试剂球的制备方法，其特征在于：
9.如权利要求7所述的乳酸检测冻干试剂球的制备方法，其特征在于，分别将试剂R1和试剂R2通过定量控制滴珠点胶机直接滴在液氮中结成冰球；
10.一种微流控检测芯片，其特征在于，包括如权利要求1～6所述的乳酸检测冻干试剂球；
...【技术特征摘要】
1.一种乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，包括r1冻干试剂球和r2冻干试剂球；
2.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一缓冲液和第二缓冲液各自独立地包括磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(tris)缓冲液、n-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(taps)缓冲液或4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(hepes)缓冲液中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一稳定剂和第二稳定剂各自独立地包括蔗糖、果糖、甘油或牛血清白蛋白中的一种或几种。
4.如权利要求1所述的乳酸检测冻干试剂球，其特征在于，所述第一赋形剂和第二赋形剂各自独立地包括甘露醇、肌醇、peg3350、peg8000、葡聚糖1万或葡聚糖4万中的一种或几种。
5.如权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔秀雲，陈方璐，康之裔，
申请(专利权)人：诺迈苏州科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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