【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种提高疫苗纯度的方法、通过该方法得到的疫苗及其应用，属于疫苗。
技术介绍
1、疫苗的纯化工艺从早期的直接收获病毒培养液澄清后灭活作为疫苗原液，到病毒培养液超滤浓缩后灭活作为疫苗原液，再发展到现在的病毒培养液经超滤浓缩、病毒灭活、dna去除和分子筛柱层析纯化收集病毒峰作为疫苗原液。疫苗的效价和纯度已得到很大的提高，暴露后抗体产生及时且产生水平高，严重不良反应率大幅降低。
2、对于病毒颗粒较大，易被破坏，对环境条件的耐受范围比较窄的缺陷问题，目前世界上纯化病毒疫苗主要有密度梯度离心和分子筛柱层析这两种方法。用分子筛柱层析纯化疫苗的原理是利用病毒颗粒与杂质分子量大小的差异进行分离，这种方法条件温和、操作简单，可控性强、重复性好，能够最大程度的保持病毒的完整性，但是也存在一定的局限性：由于部分杂质分子量与病毒颗粒比较接近，尤其是宿主蛋白和宿主dna，用分子筛的方式分离效果不佳，疫苗纯度难以进一步提高。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种提高疫苗纯度的方法，将杂质与目标蛋白分离，降低宿主细胞蛋白质浓度，实现疫苗的高纯度要求。
2、本专利技术的第二个目的在于提供一种疫苗，通过上述方法得到。
3、本专利技术的第二个目的在于提供一种上述提高疫苗纯度的方法的应用。
4、实现本专利技术的第一个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种提高疫苗纯度的方法，将病毒液过分子筛柱层析色谱，然后过层析色谱填料；
5、进一步地，病毒液为将病毒接种于生物反应器培养的vero细胞中，经培养、收获、浓缩、灭活后得到。
6、进一步地，过层析色谱填料的流速为150cm/h。
7、进一步地，过层析色谱填料上样量为4-8倍柱体积。
8、进一步地，ph为7.4-8.1。
9、进一步地，电导率为15-25ms/cm。
10、进一步地，病毒为狂犬病病毒。
11、进一步地，过层析色谱填料以流穿模式进行，把宿主细胞蛋白质与填料的配基结合，病毒流穿出来。
12、实现本专利技术的第二个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种疫苗，通过如上所述的方法得到。
13、实现本专利技术的第三个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种提高疫苗纯度的方法的应用，将如上所述的方法应用于疫苗生产中。
14、相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
15、1、本专利技术提高疫苗纯度的方法纯化后收率高、杂质残留量低，能显著降低注射疫苗带来的过敏反应；
16、2、本专利技术提高疫苗纯度的方法可应用于疫苗生产中，将杂质与目标蛋白分离，降低宿主细胞蛋白质浓度，实现疫苗的高纯度要求。
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1.一种提高疫苗纯度的方法，其特征在于，将病毒液过分子筛柱层析色谱，然后过层析色谱填料；所述填料含有N-苄基-N-甲基-乙醇胺配基，层析条件为10-20cm的柱高，上样量2-10倍柱体积，平衡缓冲液pH为7.0-8.5，电导率为10-50mS/cm。
2.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述病毒液为将病毒接种于生物反应器培养的Vero细胞中，经培养、收获、浓缩、灭活后得到。
3.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述过层析色谱填料的流速为150cm/h。
4.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述过层析色谱填料上样量为4-8倍柱体积。
5.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述pH为7.4-8.1。
6.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述电导率为15-25mS/cm。
7.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述病毒为狂犬病病毒。
8.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述过层析色谱
9.一种疫苗，其特征在于，通过如权利要求1所述的方法得到。
10.一种提高疫苗纯度的方法的应用，其特征在于，将如权利要求1所述的方法应用于疫苗生产中。
...【技术特征摘要】
1.一种提高疫苗纯度的方法，其特征在于，将病毒液过分子筛柱层析色谱，然后过层析色谱填料；所述填料含有n-苄基-n-甲基-乙醇胺配基，层析条件为10-20cm的柱高，上样量2-10倍柱体积，平衡缓冲液ph为7.0-8.5，电导率为10-50ms/cm。
2.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述病毒液为将病毒接种于生物反应器培养的vero细胞中，经培养、收获、浓缩、灭活后得到。
3.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述过层析色谱填料的流速为150cm/h。
4.如权利要求1所述的提高疫苗纯度的方法，其特征在于，所述过层析色谱填料上样量为4-8倍柱...
【专利技术属性】
技术研发人员：张乐峰，张剑术，何春辉，谢林清，刘洁萍，林文森，钟启明，李炳杰，区敏仪，方浩霖，赵起，周婷，庄秀娟，
申请(专利权)人：广州白云山生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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