一种生产3,4-二羟基苯乙酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种生产3,4‑二羟基苯乙酸的方法。该方法是利用一种重组大肠杆菌以阿魏酸为底物生产3,4‑二羟基苯乙酸。其中，阿魏酸来源广、制备过程简单且价格低廉，是理想的底物；同时，本发明专利技术选择的酶具有活性高、光学专一性强等优势，因此，利用本发明专利技术的重组菌转化生产3,4‑二羟基苯乙酸，生产效率高、绿色环保且成本低，具有良好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，具体而言，涉及一种生产3,4-二羟基苯乙酸的方法。

技术介绍

1、3,4-二羟基苯乙酸，又称高原儿茶酸，是一种天然存在的酚酸，具有很强的自由基清除活性，它能够减少脂质过度氧化，可作为一种天然的抗氧化剂，也具有抗菌、抗病毒、保肝、治疗中枢神经性疾病、抑制环氧酶及酯氧酶等生理活性。

2、3,4-二羟基苯乙酸的制备方法主要有植物提取法、化学合成法及生物转化法。提取法的效率较低、成本高，阻碍了其大规模应用。化学合成法具有副产物多、步骤繁琐、产物光学纯度低等缺陷，不适合工业化生产。生物转化法具备特异性高、绿色环保、反应条件温和及无需多步分离纯化等优点，目前已经受到了广泛的关注。

3、目前，国内外学者报道了多种3,4-二羟基苯乙酸的生物法制备路线，xianglai li等对大肠杆菌合成3,4-二羟基苯乙酸的代谢路径进行改造，以葡萄糖为底物，通过工程菌发酵制备3,4-二羟基苯乙酸，最高可以获得1.9g/l的3,4-二羟基苯乙酸；pierre等以酪醇为底物，通过菌halomonassp.代谢转化制备3,4-二羟基苯乙酸，最高本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种合成3,4-二羟基苯乙酸的重组菌，其特征在于，包含编码阿魏酸脱羧酶、苯乙烯单加氧酶、环氧化物水解酶、丙二醇脱水酶、乙醛脱氢酶和O-脱甲基酶的基因。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述阿魏酸脱羧酶包括LhFDC和ScFDC；所述LhFDC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ScFDC的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将阿魏酸转化为3,4-二羟基苯乙酸功能的蛋白，其特征在于，所述核酸分子包括编码阿魏酸脱羧酶、苯乙烯单加氧酶...

【技术特征摘要】

1.一种合成3,4-二羟基苯乙酸的重组菌，其特征在于，包含编码阿魏酸脱羧酶、苯乙烯单加氧酶、环氧化物水解酶、丙二醇脱水酶、乙醛脱氢酶和o-脱甲基酶的基因。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述阿魏酸脱羧酶包括lhfdc和scfdc；所述lhfdc的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述scfdc的氨基酸序列如seq id no.2所示；

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将阿魏酸转化为3,4-二羟基苯乙酸功能的蛋白，其特征在于，所述核酸分子包括编码阿魏酸脱羧酶、苯乙烯单加氧酶、环氧化物水解酶、丙二醇脱水酶、乙醛脱氢酶和o-脱甲基酶的基因；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求4所述的核酸分子。

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【专利技术属性】
技术研发人员：秦勇，杨波，张炜，
申请(专利权)人：杭州唯铂莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：